专题五 课题3
一、选择题
1．为防止血液凝固，在采血容器中要预先加入下列哪一种抗凝血剂( D ) A．NaCl C．蒸馏水
B．甲苯 D．柠檬酸钠
2．将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，其中第3层是( C )
A．无色透明的甲苯层 C．血红蛋白的水溶液
3．红细胞的洗涤过程错误的是( C ) A．低速短时间离心，如500r/min离心2min B．离心后用胶头吸管吸出上层透明的黄色血浆
C．将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯，再加入五倍体积的蒸馏水 D．直至上清液中没有黄色，表明红细胞已洗涤干净 4．在装填凝胶柱时，不得有气泡存在的原因是( A ) A．气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果 B．气泡阻碍蛋白质的运动 C．气泡能与蛋白质发生化学反应
D．气泡会在装填凝胶的时候，使凝胶不紧密
5．下列有关，“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中，正确的是( D ) A．用蒸馏水进行红细胞的洗涤，其目的是去除细胞表面的杂蛋白 B．将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较大的杂质 C．血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂 D．整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白的结构
[解析] 红细胞的洗涤应用生理盐水，其目的是去除血浆蛋白等杂质，有利于后续步骤的分离纯化，而不是洗去细胞表面的杂蛋白，A项不正确。将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较小的杂质，B项不正确。血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是溶解细胞膜，有利于血红蛋白的释放，而不是溶解血红蛋白，C项不正确。整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白的结构。D项正确。
6．已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊5种蛋白质分子，分子大小、电荷的性质和数
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B．脂溶性物质的沉淀层 D．其他杂质的暗红色沉淀物
量情况如图所示，下列有关蛋白质分离的叙述正确的是( A )
A．若将样品以2 000r/min的速度离心1．0min，分子戊在沉淀中，则丙也一定在沉淀中 B．若用凝胶色谱法分离样品中的蛋白质，则分子甲移动速度最快
C．将样品装入透析袋中透析12 h，若分子丙保留在袋内，则乙也一定保留在袋内 D．若用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子丁形成的电泳带相距最远
[解析] 分子丙的相对分子质量大于戊，所以，在离心时戊存在于沉淀中，丙也一定在沉淀中，A项正确。用凝胶色谱法分离蛋白质时，甲相对分子质量最小，容易进入凝胶内部，则移动速度最慢，B项错误。分子丙的相对分子质量大于乙，则丙保留在袋内，乙可能在袋外也可能在袋内，C项错误。SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速度完全取决于分子的大小，因此，分子甲与丙形成的电泳带相距最远，D项错误。
二、非选择题
7．凝胶色谱技术不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。下图甲为凝胶色谱柱分离蛋白质的示意图，图乙为几种被分离蛋白质相对分子质量大小与洗脱液的洗脱体积的关系，请据图分析回答：
(1)图甲a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是__a__，原因是__a相对分子质量较大，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快__。
(2)自己制作凝胶色谱柱时，在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由__尼龙网和100目的尼龙纱__替代。
(3)装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是__气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果__。
(4)若图乙被分离的蛋白质混合液中含有肌红蛋白(相对分子质量为16 900)、血清蛋白(相
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对分子质量为68 500)、牛乳球蛋白(相对分子质量为35 000)、牛胰岛素(相对分子质量为5 700)，则图乙中A、B、C、D代表的物质依次是__牛胰岛素、肌红蛋白、牛乳球蛋白、血清蛋白__。
[解析] (1)由于不同蛋白质的相对分子质量不同，相对分子质量较大的蛋白质不能进入凝胶内部通道，只能在凝胶外部移动，路程短，速度快，易洗脱；相对分子质量较小的蛋白质则进入凝胶内部通道，路程长，速度慢。(2)凝
胶色谱柱的制作：底部橡皮塞的凹穴上覆盖尼龙网和100目的尼龙纱，相当于多孔板。(3)凝胶色谱柱的装填：装填时尽量紧密，不能有气泡存在，因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。(4)据图可知，四种蛋白质的相对分子质量逐渐增大，因此图乙中A、B、C、D代表的物质依次是牛胰岛素、肌红蛋白、牛乳球蛋白、血清蛋白。
8．如图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请据图回答下列问题。
(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，它在红细胞中的作用体现了蛋白质具有__运输__功能。
(2)甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是__磷酸缓冲溶液__；乙装置中，C溶液的作用是__洗脱血红蛋白__。
(3)甲装置用于__透析(粗分离)__，目的是__去除样品中相对分子质量较小的杂质__。用乙装置分离蛋白质的方法叫__凝胶色谱法__。
(4)用乙装置分离血红蛋白时，待__红色的蛋白质接近色谱柱的底端__时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集。
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