临检SOP

2026/1/12 6:45:34

浆膜腔积液常规检测

目的:协助诊断结核性胸膜炎、肺炎、恶性肿瘤、血胸等疾病。 原理:目测法。 标本要求

1种类:新鲜浆膜腔积液

2保存:1 小时内检测完毕,室温放置时,不超过 2 小时。 3 样本量:5 ml。 4 标本的收集:

1 )由穿刺取得的标本为防止细胞变性出现凝块或细菌破坏溶解等,送检及 检查必须及时。

. 2) 为防止凝固,最好加入 100g/L 乙二胺四乙酸二钠(EDTA 钠盐)抗凝,每 0.1ml 可抗凝 6ml 浆膜腔积液,及时完成细胞涂片检查。

器材与试剂

一次性滴管、试管、吸头、20 微升的吸管、0.1%冰乙酸溶液、计数池、显微镜、 干净玻片、1%盐酸溶液

操作程序

1.一般性状检查

记录标本颜色及透明度,有无凝固物质或沉淀物,可按浆液性、粘液性、 黄色透明、脓样浑浊、乳糜样、血样等报告。

2.李凡他试验:

原理:渗出液中可含多量浆膜粘蛋白,在酸性条件下可产生白色雾状沉淀。

操作:取100ml量筒,加蒸馏水100ml滴入冰醋酸0.1ml(PH3~5),充分混匀,静止数分钟,将穿刺液先靠近量筒液面逐滴轻轻滴下,在黑色背景下,观察白色雾状沉淀的发生及其下降速度等

结果判断:阴性:清晰不显雾状;(±)渐呈白雾物状;(+)加后呈 白雾状;(2+)白薄云状;(3+)白浓云状。

3. 细胞学检查

1)非血性标本:小试管内放入冰乙酸1~2滴,转动试管,使内壁沾有冰乙酸后倾去之,然后滴加混匀的浆膜腔积液3~4滴,数分钟后,混匀充入计数池,将标本混匀充入牛鲍氏计数板,计数10个大方格内白细胞总数。如细胞较多可计数1个大方格内的细胞数,再乘以10,即为每μl标本中细胞总数。

血性标本:将混匀的浆膜腔积液用1%冰醋酸溶液稀释后进行计数(同白细胞计数) .2) 细胞分类:将浆膜腔积液离心沉淀,取沉淀物 2 滴,推制成薄膜,置室温

待干,进行瑞氏染色后油镜下分类。

临床意义:

1 颜色:漏出液多为淡黄色,渗出液根据病因不同呈现不同的颜色,红色多见 于恶性肿瘤、结核急性期等;化脓性细菌感染时积液多呈黄色;绿脓杆菌感染 时呈绿色;丝虫病淋巴结肿瘤肝硬化、腹膜癌等积液呈乳白色,脓胸和化脓性 胸膜炎时呈乳酪色。

2 透明度:漏出液多为透明后微浊;渗出液因含较多细胞、细菌等成分而呈

现不同程度的混浊。

.3 比重:漏出液比重多低于 1.018,渗出液因含有多量蛋白质及细胞比重一般 高于漏出液,常大于 1.018。

4 李凡他试验:渗出液多呈阳性。

5 细胞学检查:以多型核白细胞为主,多提示化脓性炎症或早期结核性积液; 以淋巴细胞增多为主,提示慢性炎症,可见于结核性渗出液中期以后、病毒感 染、系统性狼疮等;以间皮细胞及组织细胞增多为主,提示浆膜上皮脱落旺盛, 可见于淤血、恶性肿瘤等。

参考文献

1 陆永绥,张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社, 2004. 2 叶应妩,王毓三,申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学出版社,2006.

前列腺液检测

目的:协助诊断前列腺炎和前列腺癌等。 原理:目测法。 样本要求:。

1.种类:前列腺液湿涂片。 2.保存:接诊即检。

器材:显微镜、玻片、盖玻片。

检测方法: 湿片镜检。

操作步骤

记录液体颜色,是否混有血液,粘稠度(有无脓块) 。

湿片镜检,高倍镜下观察白细胞、红细胞、卵磷脂小体,其次为上皮细胞,精子,淀粉颗粒等。革兰染色后检查细菌。

生物参考值: 正常人卵磷脂小体为多量或满视野,白细胞<10/HP,RBC<

5/HP。

临床意义:前列腺炎时白细胞增多,可找到细菌,卵磷脂小体减少;前列腺

癌时可有血性液体,镜检可有多量的红细胞、癌细胞。

参考文献

1 陆永绥,张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社, 2004. .2 叶应妩,王毓三,申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学出版社

瑞氏染色法操作规程

【目的】

规范瑞氏染色法操作技术,保证瑞氏染色法准确性。 【原理】

把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片,用复合染料染色。细胞染色包括物理吸附及化学亲和作用。不同的细胞种类及细胞的不同成分,对酸性及碱性染料的结合能力不同,而使各种细胞呈现出各自的染色特点。 【器材】

载玻片、推片、显微镜。 【试剂】

瑞-吉复合染液:

Ⅰ液:瑞氏染料1g、吉姆萨染料0.3g、甲醇(AR)500ml、中性甘油10ml。将瑞氏染料和吉姆萨染料置洁净研钵中,加少量甲醇,研磨片刻,吸上液。如此连续几次,共用甲醇500ml。收集于棕色玻璃瓶中,每天早晚各摇3min,共5d,存放1w即能使用。

Ⅱ液:磷酸盐缓冲液(pH6.4-6.8)。含磷酸二氢钾(无水)6.64g、磷酸氢二钠(无水)2.56g,加少量蒸馏水溶解,用磷酸盐调整pH,加水至1000ml。 【标本】

EDTA抗凝静脉血后外周血。 【操作】

1.采血:静脉采血后,使用玻璃棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端1cm处加1滴抗凝血,如果使用手指采血则直接用洁净玻片蘸1滴血。

2.推片:有左手平执载波片,或放在类似桌子等平坦地方,右手持推片从后方或前方接近血滴,使血液沿推片边缘展开成适当的宽度,立即将玻片与载波片呈30度~45度角,轻压推片边缘将血液推制成厚薄适宜的血涂片,血涂片应成舌状,头、体、尾三部分,且清晰可见。

3.干燥:将推好的血涂片在空气中晃动,使其迅速干燥。天气看冷或潮湿时,应于37℃温箱中保温促干,以免细胞变形缩小。

4.标记:在载波片的一端用记号笔编号。

5.染色:待血涂片干透后,用蜡笔在两端画线,以防染色时时染液外溢。然后将玻片平置于染色架上,滴加染液(I液)3~5滴,使其迅速盖满血涂片,约0.5~1min后,滴加等量或稍多的缓冲液(II液),轻轻摇动玻片或用吸球对准血涂片吹气,使染液充分混合。

6.冲洗:5~10min后用流水冲去染液,待干。

7.观察结果:将干燥后的血涂片置显微镜下观察。用低倍镜观察血涂片体、尾交界处的血细胞。 【注意事项】

1.许多因素可影响血涂片的厚度。学滴大、学粘度高、推片角度大、推片速度快则雪涂片后;反之,则血涂片薄。针对不同的患者应有的放矢,对血细胞比容高、血袅度高的患者应采用小血滴、小角度、慢推;而贫血患者则采用大血滴、大角度、快推。

2.如血涂片面积太小,可观察的部分会手到局限,故应在离开载波片另一端2cm的地方结束涂抹为宜。

3.推片时如用力过猛,白细胞容易破损。

4.血涂片干透后可固定染色,否则细胞尚未牢固地吸附在玻片上,在染色过程中容


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