电镜技术在临床病理诊断中的应用
电镜技术在医学里的应用是其它任何领域不能与其相提并论的。电镜在临床病理诊断中的广泛应用，为临床疑难疾病的诊断和鉴别诊断提供了更可靠地科学依据。本文拟从临床电镜诊断技术在血液疾病诊断、肿瘤诊断、活检病理诊断等方面阐述其在临床病理诊断中的应用。 从20世纪30年代开始，随着电子显微技术的问世，人们能在原子的尺度上观察研究物质的结构，使人们的对物体的观察由宏观世界进入了原子级的微观世界。目前的电镜种类很多，有透射电镜（TEM）、扫描电镜（SEM）、扫描隧道电镜、原子力电镜等，但应用于临床病理诊断中的主要是透射电镜和扫描电镜。前者注重组织核细胞内的超微结构，后者则用于观察组织和细胞内的表面形貌。经过80余年的发展，电子显微镜技术已成为医学科学领域内不可缺少的研究手段及工具，对医学科学研究起着重要作用。临床病理诊断为最终诊断，目前电镜诊断技术已广泛应用于现代临床病理诊断中，特别是在传统的临床诊断手段无法确诊的病例，电子显微镜发挥着重大作用。本文拟就电镜技术在临床病理学诊断中的作用进行综述。
1.电镜在血液疾病诊断中的应用
在血液系统疾病的诊断和研究方面，从最初单纯的超微结构观察到成为某些疾病分型和鉴别诊断的重要工具，电镜在血液系统疾病中的运用正不断扩展，并越来越受到认可和重视。近年来，电镜凭借其自身优势成为相关研究的重要手段，在临床和研究中发挥了巨大作用。 电镜观察白血病已成为研究白血病的重要手段，电镜对白血病的作用主要是对某些分化较差的白血病细胞作出正确判断，可确立诊断及鉴别诊断指标；对于特定细胞采用样品包埋和超薄切片技术，用电镜观察又可充分发挥电镜分辨率高的优点，结构准确，形态清晰，这是光学显微镜无法达到的。尤其是临床表现不典型时，再结合扫描电镜(表面微绒毛)更加有其诊断价值。而光镜和电镜结合起来，又可使诊断全面可靠或者对了解同一类型白血病细胞的不同形态表现的意义具有一定的价值，为临床诊断提供较为有效的方法[1]。 2.电镜在肿瘤诊断中的应用 在肿瘤病理诊断中，电子显微镜对肿瘤的诊断和鉴别诊断得到了广泛的应用，主要通过对超微结构的观察以及寻找各类组织特有的细胞分化标记，从而确诊和鉴别相应的肿瘤类型。甲状腺髓样癌是发生于甲状腺C细胞的一种恶性肿瘤,占甲状腺癌的5%-10%,因其组织学形态多样,光镜观察往往易与甲状腺其他良恶性肿瘤相混淆，王玉兰[2]等利用光镜和电镜相结合的手段，对6例甲状腺髓样癌进行了研究,结果电镜下彼此结构差别不大,胞质内均有电子密度不一的圆形神经内分泌颗粒,与Holm等的报道一致[3]。髓样癌电镜检查最有诊断性特征的是胞质内有圆形分泌颗粒,较大者电子密度中等,较小者电子密度高,二型可见于同一细胞内。大多数病例间质中有淀粉样原纤维物质沉积。滤泡型肿瘤电镜下瘤(癌) 细胞呈低立方-高柱状,胞质内有疏密不均的胶体小滴。嗜酸细胞性腺瘤可见胞质内充满增生肥大的线粒体,而粗面内质网和高尔基复合体都不发达。玻璃样变梁状腺瘤间质则见不到淀粉原纤维。可见电镜为肿瘤的临床诊断和治疗提供了重要科学依据。但越来越多的资料表明，细胞凋亡与肿瘤有着密切关系，而电镜在细胞凋亡中的研究也起着重要的作用。因此，利用电镜观察细胞的超微结构病理变化和细胞凋亡情况，有利于深入地认识肿瘤的生物学特性、发病机制及其进展和预后。
3.电镜检查在活检病理诊断中的应用 电子显微镜在慢性肾病、肝脏代谢性疾病诊断中的作用也是值得肯定的，用得最多的是肾脏活检的诊断。肾活检病理诊断与其他疾病(如肿瘤等)病理诊断不同,肾活检病理诊断比较复杂,光镜、免疫荧光(免疫组化)和电镜检查是肾活检病理诊断中三个重要组成部分,缺一不可。但是目前国内有不少单位(包括一些大医院)只重视光镜和免疫荧光检查,却忽略了电镜观察,这
样势必有一部分病例被误诊或漏诊,给临床诊断和治疗带来误区。近年来通过电镜发现的一些肾小球疾病, 如薄基底膜肾病、纤维素样肾小球病、Ⅲ型胶原肾小球病 ,免疫触须样肾小球病、Fabry病等[4]。由于电镜既可以发现组织结构改变又可以观察到免疫复合物的沉积情况,通过电镜观察可基本上做出诊断,从而弥补了因取材的失误带来的无法诊断的后果。国外学者对电镜诊断尤为重视[5]，1996年Haas对228例肾活检病例进行了分析,其中约为1/2的病例需要电镜提供有价值信息才能诊断, 21%的病例完全依赖电镜进行诊断, 26%的病例提供了肯定性依据或补充信息。作者的研究表明必须依赖电镜才能明确诊断占27.88% ,需要做电镜加以证实占22.43%。因此,常规肾活检进行电镜观察是十分必要的,它可以避免误诊、漏诊,对肾脏疾病的诊断及其疾病分布、发病率等研究有着十分重要的意义。
电镜诊断虽然有着重要作用,却有很多单位在肾活检诊断中不被重视,其原因有以下几方面: ①部分基层单位由于条件限制没有电镜。②有些单位虽然有电镜,但由于电镜制片复杂、耗时、费用贵而不愿意进行电镜检查。③有些单位进行肾活检诊断的医生可能对电镜诊断没有经验,不能充分发挥电镜在肾活检中的作用。④个别单位可能由于经历电镜制样最后没有肾小球或制片效果不佳而无法正常观察,对电镜诊断失去了信心。总之,无论是什么原因在肾活检诊断中没有电镜观察结果是不完善的,诊断的可信度都会大大降低。 电镜在病理学中的广泛使用，一方面不断完善和丰富了病理学的内容，另一方面也为疾病的诊断提供了更可靠的依据。随着科学技术的迅猛发展，在病理诊断中一般电镜技术虽仍将大量使用，但单一的一般的电镜技术在病理学上的应用存在较大的局限性。由于电镜的分辨率高，使得每一视野的范围大大缩小，一个视野只能观察到一个细胞或某个细胞器的结构；另外，无论是通过光镜还是电镜观察，我们只能观察到静止的、死的标本，不能直接在活体上使用。因此，在积极使用电镜技术的同时，应积极与其它技术（如超微结构的形态定量和图像分析技术、核酸原位杂交技术等）和新兴理论（如细胞凋亡理论等）相结合，积极将扫描隧道显微镜、原子力显微镜等新型的超显微镜引入到病理学的应用当中，不断改良电镜技术，使电镜的诊断水平又提高到一个新的水平，从而开拓病理学的新领域。另外，电镜的发展与计算机技术的紧密相连，通过计算机和网络，可使人们更方便地控制电镜。 参考文献：
[1]虞功清,张泉,邹伟民,等,电镜在白血病诊断上的应用与研究[J],江西医药2004,36 (9),426-427.
[2]王玉兰,郑晓刚,周晓军,电镜在甲状腺髓样癌诊断中的应用价值[J],诊断病理学杂志2003,10(3),156-157.
[3] Holm R ,Farrants GW,Nesland JM et al, Ultrastructural and electron immunohistochemical features of medullary thyroid carcinoma.Virchows ArchA Pathol AnatHistopathol ,1989,414:375 [4] Fischer EG, Moore MJ , Lager DJ. Fabry disease: a morphologic study of 11 cases [J]. Mod - Pathol,2006,19(10):1295-1301.
[5] HassM. A re-evaluation of routine electron microscopy in the examination of native renal biop sies [J]. J Am soc Nephrol,1997, 8:69-70.
