2014 届毕业生毕业论文
pH梯度结合大孔树脂萃取尖头瓶尔小草中
的高黄酮
学生姓名 裴泰明 学 号 7071210111 所属学院 生命科学学院 专 业 化学工程与工艺 班 级 14-1 指导教师 万传星 副教授
日 期 2014年5月
塔里木大学教务处制
目 录
1引言 ............................................................................. 2
1.1研究背景 ................................................................... 2 1.2高黄酮研究与概括 ........................................................... 2 1.3PH梯度萃取的原理 ........................................................... 3 1.4大孔树脂的简介 ............................................................. 3 2材料与方法 ....................................................................... 4
2.1材料与仪器 ................................................................. 4
2.1.1仪器 ................................................................. 4 2.1.2试剂 ................................................................. 4 2.2实验方法 ................................................................... 4
2.2.1实验步骤 ............................................................. 4 2.2.2大孔树脂结合pH梯度萃取 .............................................. 4 2.2.3实验工艺流程图 ....................................................... 4 2.2.4 高效液相色谱检测 ..................................................... 5
3实验结果及分析 ................................................................... 5
3.1 标准品结构式 ............................................................... 5 3.2结果与分析 ................................................................. 6 4小结 ............................................................................. 8 参考文献 ........................................................................... 9 致 谢 .......................................................................... 10
塔里木大学毕业论文
pH梯度结合大孔树脂萃取尖头瓶尔小草中
的高黄酮
裴泰明
（塔里木大学生命科学学院，新疆 阿拉尔 843300）
摘要 尖头瓶尔小草中含有大量的高黄酮、糖以及色素等物质，糖与色素是阻碍提取高黄酮的主要因素。本实验先用大孔树脂（D101）除去色素并且除去糖类物质，在采用 pH梯度萃取法，适合于酸性强弱不同的游离的黄酮类化合物的分离，将混合物溶于有机溶剂（乙酸乙酯）中，依次用5％NaHCO3、5％Na2CO3、0.2％NaOH、5％NaOH分别萃取出萃取出7，4′－二羟基黄酮、7－或4′－羟基黄酮、具一般酚羟基黄酮以及5－羟基黄酮，从而达到分离的效果。
关键字 尖头瓶尔小草；pH；梯度；高黄酮；萃取
pH gradient combined with macroporous resin extracted pointed
Ophioglossum the high flavonoid
Pei Taiming
(College of Life Science, Tarim University, Xinjiang Alar 843300)
Abstract：Tip Ophioglossum contains a lot of high flavonoids, substances such as sugar and coloring, sugar and coloring are the main factors hindering the extraction of high flavonoid. In this study, first remove the pigment with macroporous resin (D101) and the removal of carbohydrates in the use of pH gradient extraction method is suitable for the separation of the free acid strength of different flavonoids, the mixture is dissolved in an organic solvent (ethyl acetate ), washed with 5% NaHCO3, 5% Na2CO3, 0.2% NaOH, 5% NaOH and extracted were extracted from the 7,4 '- dihydroxy flavone, 7 - or 4'-hydroxy flavone, flavonoids and phenolic hydroxyl groups with the general 5 - hydroxy flavone, so as to achieve the effect of separation.
Key words ：Pointed bottle;the grass;Ph;The gradient;High flavonoid;extraction;HPLC
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塔里木大学毕业论文
1引言
1.1研究背景
瓶尔小草属（Ophioglossum）植物隶属于蕨类植物门（Pteridophyta）真蕨亚门（Filicophytina）蕨纲（Filicopsida）厚囊蕨亚纲（Eusporangiatidae）瓶尔小草目（Ophiglossales）瓶尔小草科（Ophioglossaceae），是我国重点保护的珍稀蕨类植物。我国仅有7种，它们是尖头瓶尔小草Ophioglossum pedunculosum Desv.，瓶尔小草O.vulgatum Linn.，狭叶瓶尔小草O.thermale Kom.，心脏叶瓶尔小草O.reticulatum Linn.， 钝头瓶尔小草O.petiolatum Hook.，小叶瓶尔小草O. parvifolium Grev. et Hook. 和永仁瓶尔小草 O.yongrenense Ching ex Z.R.He，主要分布于亚洲的热带和亚热带地[14-15]区。
国内药材市场上流通的瓶尔小草属植物（俗称一支箭）经鉴定主要是尖头瓶尔小草、瓶尔小草和狭叶瓶尔小草这3个种，瓶尔小草属植物具有清热解毒、活血散瘀之功效，主治毒蛇咬伤、痈肿疮毒、疥疮身痒、跌打损伤、瘀血肿痛、烧烫伤、瘀滞腹痛等[16-17]。
现代植物化学研究表明，瓶尔小草属植物化学成分主要为黄酮、脂肪酸及其甘油酯类化合物，其特征化合物为高黄酮类化合物。迄今为止从该属植物中报道的相关化合物列举如下：
高黄酮类 （Homoflavonoids）化合物：此类黄酮在C环或B环骨架上通过C-C键多连一个碳而有别于黄烷酮、黄酮醇、查耳酮等其它类型黄酮，是黄酮类化合物的特例。除南蛇筋 （Caesalpinia
[18]
minax）中最近报导一个天然高黄酮外，其它高黄酮主要存在于瓶尔小草属植物中，高黄酮改变了黄酮C6-C3-C6结构单元的传统看法，也为瓶尔小草属植物特殊的分类学地位提供了植物化学分类学证据，因此值得特别重视。目前从瓶尔小草属植物中分离并报道的高黄酮有6个，ophioglonin, ophioglonin 7-O-β-D-glucopyranoside, ophioglonol, ophioglonol prenyl ether, ophioglonol 4’-O-β-D-glucopyranoside[19]。其结构如下：
黄酮类（Flavones）化合物：从瓶尔小草属报道的其它黄酮类成分有槲皮素（quercetin）, 木犀草素（luteolin）, 山奈酚（kaempferol）, 3-O-甲基槲皮素（quercetin 3-O-methyl ether）, 8-异戊烯基槲皮素（3,5,7,3’,4’-pentahydoxy-8-prenylflavone）以及3-O-甲基-槲皮素-7-O-二葡萄糖-4’-O-葡萄糖苷 （3-O-methylquercetin 7-O-diglucoside 4’-O-glucoside）[19]。 1.2高黄酮研究与概括
高黄酮（Homoflavonoids），是一类在黄酮C6-C3-C6 骨架上多一个碳的特殊黄酮[1-3]。按照结构特点，我们把它归纳为两种类型：Ⅰ型高黄酮，是黄酮C环多连一个碳的高黄酮；Ⅱ型高黄酮，是黄酮B环多连一个碳且与C环形成吡喃环D的高黄酮，这一类是否属于高黄酮尚有争议，有学者把它称之为C16 黄酮或盾木酮（Peltogynoids）类化合物[4-5]。此外，黄酮A环或B环的甲基取代不包括在高黄酮范畴之内。两类高黄酮的典型结构如下图所示。
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