①关空气进气阀门,开空气进气阀前小排气,使空气流通。打开总排气阀,将蒸汽从罐底进入,调节进蒸汽量使升温时间不少于40分钟。同时消出料
②待温度升到90℃时,关小总排气,逐渐提高罐压、罐温。当温度达到121℃时,适当控制进、排汽,使培养基激烈翻动,保温保压60分钟。
③保压结束后先关出料管路各阀、然后再关罐底进蒸汽阀,当罐压低于过滤器压力时,关空气进气阀前小排气,关排气阀,开空气管路进气阀,将无菌空气通入,使罐压保持在0.10MPa以上,自然冷却。 ④灭菌完毕,与值班人员交接罐运行状态并认真填写消毒记录。 6.2.6.消毒与值班交接注意事项: ①保压状态
②交接靠罐第一阀的开关状态包括(取样阀、罐底蒸汽阀、)。 7发酵罐空消:(一级种子罐、二级种子罐、发酵罐、补料罐) 7.1空罐准备
7.1.1.洗罐:用自来水冲洗罐壁、罐顶、搅拌轴、搅拌叶,并将视镜擦洗干净,将洗罐水压出。
7.1.2.检罐:检修时要做好下罐前的准备工作,拉闸,挂警告牌,罐口设人监护。检查罐内的搅拌轴、搅拌叶、联轴节、拉筋等是否正常;罐内是否有死角、异物等;检查各类阀门,换阀垫,加填料。 7.1.3.严密性检查:关排气阀,开进气阀,起罐压后用肥皂水喷注轴封、视镜、焊缝、法兰、压力表接头、阀门、pH电极、溶氧电极、
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温度计套管等是否严密。
7.1.4.空消前通知仪表把pH电极、溶氧电极取下,防止空消温度过高,损坏电极。 7.2灭菌
7.2.1.先将总排气阀打开,开各路小排气、关内蛇管、外壁管进、回水阀门 ,开排地沟阀门。
7.2.2.关空气进气阀门,开空气进气阀前小排气,使空气流通。将蒸汽从空气分布管路、冲视镜管路、取样管路、移种管路调节进蒸汽量使升温时间不少于20分钟。保压温度121±1℃、保压时间30分钟。(注意:保压后打开罐底阀排冷凝水)
7.2.3.保压结束后先关各路小排汽阀、关冲视镜管路、再关取样管路、移种管路、罐底进汽阀、关空气分布管路进汽阀;当罐压低于过滤器压力时,关空气进气阀前小排气,开空气分布管路进气阀,将无菌空气通入,用空气降温,调节进排气(进气开2--3圈,调节排气),使罐压保持在0.02-0.05MPa之间。(注意:不能用循环水降温,防止把罐抽癟)
7.2.4灭菌完毕,与值班人员交接罐运行状态并认真填写空消毒记录 8.补料管路灭菌
8.1.消管路前要提前检查补料管路的阀门、法兰及小排汽的严密性。 8.2.消毒工在补料前1小时进行管路灭菌。
8.3.消管路时总蒸汽压力控制在0.3-0.5MPa之间,先开补料管路各小排汽,再稍开补料管路主蒸汽阀进行管路预热,排尽补料管路中的
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冷凝水,然后调节蒸汽阀和各小排汽阀,使蒸汽通畅。
8.4.在消补料管路的过程中,一定要有专人检查复核,保证各小排汽的通畅,但排汽量不宜太大。 9、染菌处理: 9.1、前期染菌:
前期染菌的原因:空气部分严重污染,而且会出现同系统大面积染菌;种子罐带菌移种,种后平皿会出现杂菌菌落;发酵罐灭菌不彻底;移种管道灭菌不彻底;发酵罐罐身阀严重渗漏;原材料有结块现象而没有灭透;前期逃液等。凡是前期染菌的,来势较猛,菌量较大。镜检及平皿检查,在18-24小时内可以发现;如果是系统原因,如空气、加料罐等,发现时间还可以提前,前期染菌如果治理得早,处理得当,进行复消后可以移种继续发酵。 9.2中期染菌:
中期染菌的暴发时间,一般在28~36小时,在镜检和平皿检 查中均能发现。a染菌的主要原因是:由于轻微逃液、罐身阀门渗漏、进风管道漏气(特别常见的是绝对过滤器以后的阀门,经过热膨胀,突然冷却后,应力裂纹),这种情况处理要谨慎,既要抑制杂菌生长,又要尽量产酶。b控制方法有:一种是采取饥饿政策;低风量,高罐压(最高不超过0.15MPa),这种方法适应杂菌菌量小,发酵酶活不高的情况下。另一种方法是:如果染细菌就采取不断地补加抗生素,控制细菌的大量繁殖。 9.3后期染菌:
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后期染菌的原因与中期染菌基本相同,而暴发时间较晚,发现时间一般在80小时以后,处理方法:首先看DE值、PH值,若DE 值在20左右,PH值下降速度很慢,先不急于放罐,待ED值降至10左右,两次检测酶活相差不多时放罐。 9.4染菌后设备处理:
9.4.1、设备的染菌机会较多,但原因多半在操作上,根据经验,绝大部分染菌是可以查出根源的,通过分析,对有关设备的部件进行严格地检查,建立查不到原因不投料的制度,当查出原因后,立即采取相应措施,而且要多次检查和多人检查,采取针对性措施。 9.4.2、 煮罐:染菌后设备因复消、泡沫等因素,设备内易产生污垢及有害物残留,一般情况要煮罐处理,操作如下:先往罐内注水至上封头线,加入罐体积0.1%的液碱,盖上人孔,打开封头上各排气阀;从取样管、空气管、移种管`直接蒸汽升温至沸腾,使罐内碱水由各排空管溢出冲洗阀门及排气弯管、流量计、煮罐时不开搅拌,不升压,煮罐完成后煮罐碱水冲洗放罐管道,碱水放完后,用清水冲洗罐内残留碱液,风干备查。
二、提取工段
1.目的:制订提炼车间各工序罐体设备、管道系统清洁消毒标准操作规程,使生产现场保持清洁通畅,避免物料之间的混淆,保证生产出安全高效品质优良的产品。
2.范围:适于提炼盐析、过滤、烘干、标准化处理和包装生产工序的清洁消毒。
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