菌的适宜PH值为7.2～7.6。
（4）合适的渗透压 多数细菌需要在等渗的环境中，才能较好的生长繁殖。
（5）适宜的气体环境 细菌的生长繁殖与氧的关系甚为密切，在细菌培养时，氧的提供与排除要根据细菌的呼吸类型而定。 五、综合题。
1. 细菌的致病作用：
构成细菌的毒力的因素主要有侵袭力和毒素。
（1）侵袭力 是指病原菌突破宿主皮肤、黏膜等防御屏障，进入机体定居、繁殖和蔓延扩散的能力。具有侵袭力的细菌结构主要是荚膜和菌毛，与侵袭力有关的酶是胞外酶。
（2）毒素 有些病原菌如破伤风梭菌、魏氏梭菌等能产生强有力的毒性物质，动物受到此种毒性物质作用后，可发生特异性的综合征，这种有毒物质叫做毒素。 2. 病毒的致病作用：
病毒侵入动物机体后是否引起发病，取决于病毒的致病力和宿主的易感性和抵抗力。病毒感染可对宿主组织和器官造成直接损伤，从而致病。但也可能并无组织器官损伤，而导致病理变化或易发生继发感染。
（1）病毒感染对宿主细胞的作用 病毒进入宿主细胞后，常呈现出杀细胞效应，稳定状态感染、包涵体形成、细胞凋亡、细胞转化等作用，使细胞死亡。导致机体组织器官损伤功能转变。
（2）病毒的持续感染 持续性感染是指不论是否发病，感染性病毒始终存在。可能很迟才发生免疫病理疾病或肿瘤。动物被病毒感染后一般产生免疫应答，借以消灭入侵的病毒，并保护宿主免受再次感染，然而有时病毒长期持续存在于感染动物体内几个月甚至几年，而不显临床症状，这种被感染的畜禽如被引入易感群，便会引起疫病的暴发，对病毒的传播具有重要意义。
（3）病毒感染对免疫系统的作用 病毒在感染宿主过程中，通过与免疫系统相互作用，导致免疫损伤，从而加重疾病，或使宿主易于再感染另一种病毒，造成双重感染。宿主还会因此出现免疫缺陷和免疫抑制。如传染性法氏囊病毒感染鸡后，导致法氏囊萎缩和严重的B淋巴细胞缺失，导致免疫抑制。
项目二 免疫学基础
一、选择题。
1．B 2. B 3. A 4. C
二、判断题（在括号内正确的打“√”，错误的打“×”）。 1．√ 2．× 3．√ 三、名词解释题。
1．免疫：是指机体识别自身与非自身的大分子物质，并清除非自身的大分子物质，从而维持机体内外环境平衡的生理学反应。
2. 抗体：是指机体免疫系统受抗原敇激后，B细胞分化成熟为浆细胞后合成分泌的一类能与相应抗原特异性结合的免疫球蛋白（Ig）。
3. 特异性免疫：是机体受到病原微生物及其产物的刺激作用后，免疫系统发生了应答而形成的抵抗力或机体直接接受抗体后形成的免疫力。
4. 免疫应答：是指动物机体的免疫系统受到抗原刺激后，免疫细胞对抗原分子识别并产
生一系列的反应以清除异物的过程。
5. 变态反应：是指免疫系统对再次进入机体的抗原物质作出的过于强烈或不适当的，并导致组织器官的损伤和机能紊乱的免疫反应。
6. 疫苗：是指利用病原微生物、寄生虫及其组分或代谢产物制成的，用于人工主动免疫的生物制品。 四、简答题。
1. 免疫的基本功能：
（1）免疫防御 指机体排斥外源性抗原异物的功能。这种能力包括两个方面：一是抗感染作用，即抗御外界病原微生物对机体的侵害；二是免疫排斥作用，即排斥异种或同种异体的细胞及器官，这是器官移植需要克服的主要障碍。 （2）自身稳定 这一功能在与维持体内细胞的均一性，其方式是不断清除衰老的和受损伤的细胞。如果这一功能失常，可能发生自身免疫病。
（3）免疫监视 正常机体具有识别和清除体内突变、畸形的细胞和病毒感染细胞的功能。这些突变细胞可以自发发生，也可以由于感染病毒或理化因素诱变发生。如果免疫监视功能失调，突变细胞就有可能无限地增生而形成肿瘤。
必须指出，在正常情况下，免疫反应对机体是有利的，但在某些特定条件下，也可能导致不良的后果，如免疫功能异常亢进时，可以起变态反应。 2.抗体的功能： （1）与特异性抗原结合 一种抗体只能与其相应的抗原呈特异性结合，而与不相应抗原不能结合，这就是免疫球蛋白与血清中正常球蛋白的根本区别。
（2）激活补体 抗体与抗原结合后，具有激活补体的作用，补体被激活后，可发挥溶菌和溶病毒作用。 （3）调理作用 抗体能促进吞噬细胞吞噬细菌等颗粒性抗原的作用。具有调理作用的物质称为调理素。 （4）ADCC效应（抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用） IgG与带有相应抗原的靶细胞结合后，可通过与效应细胞（NK细胞、巨噬细胞、中性粒细胞）表面的受体结合，增强效应细胞对靶细胞的杀伤作用。
（5）介导Ⅰ型变态反应 IgE能与肥大细胞和嗜碱性粒细胞等靶细胞结合，当特异性抗原再次进入机体后，结合在肥大细胞上的IgE与抗原形成复合物，促使肥大细胞脱颗粒，释放组织胺等生物活性物质，引起Ⅰ型变态反应。 3. 保存和使用疫苗应注意的问题：
（1）疫苗的质量 首先，疫苗应购自国家批准的生物制品厂家。购买及使用前应检查是否过期，并剔除破损、封口不严、无标签或标签不清，色泽、外观、透明度、有异物等与说明不符的疫苗。
（2）疫苗的保存 供免疫接种的疫苗购买后，必须按规定的条件保存，否则会使疫苗的质量明显下降而影响免疫效果，甚至会造成免疫失败。一般来说，灭活苗要保存于2～15℃的阴暗环境中，非经冻干的活菌苗（湿苗）要保存于4～8℃的冰箱中，这两种疫苗都不应冻结保存。冻干的弱毒苗，一般都要求低温冷冻～15℃以下保存，并且保存温度越低，疫苗病毒（或细菌）死亡越少。如猪瘟兔化弱毒冻干苗在-15℃可保存1年，0～8℃保存6个月，25℃约保存10 d。马立克病疫苗有一种细胞结合型疫苗，必须于液氮罐中保存和运输，要求更为严格。 （3）疫苗的运输 疫苗运输的理想温度应与保存的温度一致，在疫苗运输时通常都达不到理想的低温要求，因此，运输时间越长，疫苗中病毒（或细菌）的死亡率越高，如果中途转运多次，影响就更大，生产中要注意此环节。 （4）疫苗的稀释与及早使用 稀释剂的选择必须选择符合要求的稀释剂来稀释疫苗，除马立
克病疫苗等个别疫苗要用专用的稀释剂以外，一般用于滴鼻、滴眼、刺种、擦肛及注射的疫苗，可用灭菌的生理盐水或灭菌的蒸馏水作为稀释剂；饮水免疫时，稀释剂最好用蒸馏水或去离子水，也可用洁净的深井水，但不能用含消毒剂的自来水；气雾免疫时，稀释剂可用蒸馏水或去离子水，如果稀释水中含有盐类，雾滴喷出后，由于水分蒸发，盐类的浓度增高，亦会使疫苗病毒死亡。为了保护疫苗病毒，可在饮水或气雾的稀释剂中加入0.1%的脱脂奶粉或山梨糖醇。
疫苗应于临用前才由冰箱内取出，稀释后应尽快使用。尤其是活毒疫苗稀释后，于高温条件下或被太阳光照射易死亡，时间越长，死亡越多。一般来说，马立克病疫苗应于稀释后1～ 2 h内用完，其他疫苗也应于2～4 h内用完，超过此时间的要灭菌后废弃，更不能隔天使用。 （5）疫苗的型别与疫病的型别应一致 有些传染病的病原有多种血清型，并且各血清型之间无交互免疫性，因此对于这些传染病的预防就需要对型免疫或用多价苗。如口蹄疫、禽流感、鸡传染性支气管炎的免疫就应注意对型免疫或使用多价苗。
（6）防止药物的干扰 使用活菌苗前后10 d不得使用抗生素及其他抗菌药，活菌苗和活病毒苗不能随意混合使用。
（7）防止不良反应的发生 用疫苗接种时，应注意被免疫动物的年龄、体质和特殊的生理时期（如怀孕和产蛋期）。幼龄动物应选用毒力弱的疫苗免疫；对体质弱或正患病的动物应暂缓接种；对怀孕母畜和产蛋期的家禽使用弱毒疫苗，可导致胎儿的发育障碍和产蛋下降，因此，生产中应在母畜怀孕前、家禽产蛋前做好各种疫病的免疫工作，必要时，可选择灭活疫苗，以防引起流产和产蛋下降等不良后果。免疫接种完毕，要将用过的用具及剩余的疫苗高压灭菌。同时注意观察动物的状态和反应，有些疫苗使用后会出现短时间的轻微反应，如发热、局部淋巴结肿大等，属正常反应。如出现剧烈或长时间的不良反应，应及时治疗。 五、综合题
1.免疫细胞的分类及其主要功能：
凡有参与免疫应答或与免疫应答有关的各种细胞统称为免疫细胞。它们种类繁多，功能各异，但相互作用、相互依存。根据其功能差异可分为免疫活性细胞和免疫辅助细胞两大类。此外还有一些其他细胞，如K细胞、NK细胞、粒细胞、红细胞等，也参与了免疫应答中的某一特定环节。
（1）免疫活性细胞
在淋巴细胞中，受抗原物质刺激后能增殖分化，并产生特异性免疫应答的细胞，称为免疫活性细胞，主要指T淋巴细胞和B淋巴细胞，在免疫应答过程中起核心作用。 ① T 淋巴细胞 即胸腺依赖淋巴细胞，简称T细胞。骨髓中的一部分多能干细胞迁移到胸腺内，在胸腺素的诱导下分化成熟，成为具有免疫活性的T细胞。成熟的T细胞经血流分布至外周免疫器官的胸腺依赖区定居，并可经淋巴管、外周血和组织液等进行再循环，发挥细胞免疫及免疫调节等功能。效应性T细胞是短寿的，一般存活4～6 d，其中一小部分变为长寿的免疫记忆细胞，进入淋巴细胞再循环，它们可存活数月到数年。
② B 淋巴细胞 骨髓中的一部分多能干细胞在哺乳动物的骨髓或鸟类的腔上囊分化为成熟的B细胞，细胞接受抗原刺激后活化、增值、分化为浆细胞，由浆细胞产生特异性抗体，发挥体液免疫功能。浆细胞寿命短，一般只存活2 d。一部分B细胞变为长寿的记忆细胞，参与淋巴再循环，可存活100 d以上。 （2）免疫辅助细胞
T细胞和B细胞是免疫应答的主要承担者，但免疫应答的完成尚需体内的单核巨噬细胞、树突状细胞等对抗原进行捕捉、加工和处理，这些细胞称为免疫辅助细胞，简称A细胞。由于辅助细胞在免疫应答中能将抗原递呈给免疫活性细胞，因此称为抗原递呈细胞（APC）。它主要有单核吞噬细胞、树突状细胞
（3）其他免疫细胞
主要有K细胞、NK细胞、粒细胞、红细胞等，它们均能参与机体的免疫反应，具有重要的免疫功能。
2. 抗体产生规律：
动物机体初次和再次接触同一种抗原，体内抗体产生的速度、种类、抗体的水平等存在差异。 （1）初次应答抗体产生缓慢、滴度较低，持续时间较短；
（2）初次应答最早产生的抗体是IgM.随后产生IgG，IgA产生最迟。 （3）再次应答抗体产生快、滴度高，持续时间长； （4）再次应答产生的抗体大部分为IgG，IgM则很少。
再次应答取决于体内记忆性T细胞和B细胞的存在。当机体与抗原物质再次接触时，记忆细胞可被激活，加快增殖分化，迅速产生抗体。
抗体产生的一般规律提示我们：由于抗体的产生需一定的时间，因此预防接种应在传染病流行季节前或易感日龄前进行；由于再次应答免疫效果优于初次应答，在预防接种时间隔一定时间进行再次免疫，可起到强化免疫的功效。 3. 血清学试验类型有：
血清学试验根据抗原的性质、参与反应的介质及反应现象的不同，可分为凝集试验、沉淀试验、补体结合试验、中和试验和免疫标记技术等。兽医临床应用广泛的为凝集试验和沉淀试验。
（一）沉淀试验
可溶性抗原与相应的抗体结合，在适量电解质存在下，经过一定时间，形成肉眼可见的白色沉淀，称为沉淀试验。参与沉淀试验的抗原称沉淀原， 如细菌的外毒素、内毒素、菌体裂解液，病毒的可溶性抗原、血清、组织浸出液等，抗体称沉淀素。常用的沉淀试验有环状沉淀试验、琼脂扩散试验和免疫电泳技术。
1.环状沉淀试验 环状沉淀试验是将抗原与血清在试管内混合，在电解质存在的情况下，抗原与抗体相接触的界面出现白色环状沉淀带，称为环状沉淀反应。
方法：在小试管中加入已知抗血清，然后小心沿管壁加入等量待检抗原于血清表面，使两者之间成为分界清晰的两层。数分钟后在两层液面交界处出现白色环状沉淀，即为阳性反应。环状沉淀试验是最古老、最简单的一种沉淀反应。兽医上主要用于炭疽病的诊断、链球菌病的多糖抗原鉴定、血迹鉴定、肉品检验等。
2.琼脂扩散试验 简称琼扩，琼脂是一种含有硫酸基的多糖，加热溶解于水，
冷却后凝固成凝胶，琼胶凝胶是一种多孔结构，其孔径大小与琼脂含量有关。抗原抗体在含有电解质的琼脂凝胶中扩散，当两者在最适比例适当处相遇，即可发生沉淀反应，出现肉眼可见的沉淀线，称为琼脂扩散试验。琼脂扩散试验有多种类型，可分为单向单扩散、单向双扩散、双向单扩散和双向双扩散四种类型。其中以双向单扩散、双向双扩散应用最广泛。 （1）双向单扩散 实验在平皿或玻板上进行，用2%缓冲琼脂盐水，加热融化，待冷却后加入预热的抗血清(用1:5～1：10倍稀释)，混合后倒入平皿或玻板上，厚2～3mm。凝固后在凝胶板上打孔，孔径2～3mm，孔内滴加抗原液，放置湿盒中37℃下扩散。抗原在孔内向四周扩散，与凝胶中的抗体接触，形成白色沉淀环。此法在兽医临床已用于传染病的诊断，如鸡马立克氏病的诊断。
（2）双向双扩散 此法系采用1%琼脂倒于平皿或玻板上，制成凝胶板， 在其上按设计图形打圆孔或长方形槽，封底后在相邻孔（槽）内滴加抗原和抗体，饱和湿度下扩散24～96 h，观察沉淀带。抗原抗体在琼脂凝胶中相向扩散，在两孔间比例最适的位置上形成沉淀带。 双扩散主要用于抗原的比较和鉴定，两个相邻的抗原孔（槽）与其相对的抗体孔之间，各自形成自己的沉淀带。此沉淀带一经形成，就像一道特异性屏障一样，继续扩散而来的相同抗
