(3)不含二硫键的蛋白质的可逆变性;如有二硫键存在时还需加什么试剂? (4)在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。 (4)在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。
(5)在赖氨酸和精氨酸残基羧基侧水解肽键。
10.根据蛋白质一级氨基酸序列可以预测蛋白质的空间结构。假设有下列氨基酸序列(如 图):
1 5 10 15
Ile-Ala-His-Thr-Tyr-Gly-Pro-Glu-Ala-Ala-Met-Cys-Lys-Try-Glu-Ala-Gln-
20 25 27
Pro-Asp-Gly-Met-Glu-Cys-Ala-Phe-His-Arg
(1)预测在该序列的哪一部位可能会出弯或β-转角。 (2)何处可能形成链内二硫键?
(3)假设该序列只是大的球蛋白的一部分,下面氨基酸残基中哪些可能分布在蛋白 的外表面,哪些分布在内部?
天冬氨酸;异亮氨酸;苏氨酸;缬氨酸;谷氨酰胺;赖氨酸
第二章 酶化学
(一)名词解释
1.米氏常数(Km 值)
2.底物专一性(substrate specificity) 3.辅基(prosthetic group)
4.单体酶(monomeric enzyme) 5.寡聚酶(oligomeric enzyme) 6.多酶体系(multienzyme system) 7.激活剂(activator)
8.抑制剂(inhibitor inhibiton) 9.变构酶(allosteric enzyme) 10.同工酶(isozyme)
11.诱导酶(induced enzyme) 12.酶原(zymogen)
13.酶的比活力(enzymatic compare energy) 14.活性中心(active center)
(二)、填空题
1.结合蛋白酶类必需由__________和___________相结合后才具有活性,前者的作用是_________,后者的作用是__________。
2.酶促反应速度(v)达到最大速度(Vm)的80%时,底物浓度[S]是Km的___________倍;而v达到Vm90%时,[S]则是Km的__________ 倍。
3.不同酶的Km________,同一种酶有不同底物时,Km值________,其中Km值最小的底物是__________。
4.__________抑制剂不改变酶反应的Vm。 5.__________抑制剂不改变酶反应的Km值。
6.乳酸脱氢酶(LDH)是_______聚体,它由________和_________亚基组成,有________种同工酶,其中LDH1含量最丰富的是__________组织。
7.L-精氨酸只能催化L-精氨酸的水解反应,对D-精氨酸则无作用,这是因为该酶具有_________专一性。
8.酶所催化的反应称________,酶所具有的催化能力称_________。
(三)、选择题
1.关于酶的叙述哪项是正确的? A.所有的酶都含有辅基或辅酶 B.只能在体内起催化作用
C.大多数酶的化学本质是蛋白质
D.能改变化学反应的平衡点加速反应的进行 E.都具有立体异构专一性(特异性) 2.酶原所以没有活性是因为: A.酶蛋白肽链合成不完全 B.活性中心未形成或未暴露 C.酶原是普通的蛋白质 D.缺乏辅酶或辅基 E.是已经变性的蛋白质 3.磺胺类药物的类似物是: A.四氢叶酸 B.二氢叶酸 C.对氨基苯甲酸 D.叶酸 E.嘧啶
4.关于酶活性中心的叙述,哪项不正确?
A.酶与底物接触只限于酶分子上与酶活性密切有关的较小区域 B.必需基团可位于活性中心之内,也可位于活性中心之外
C.一般来说,总是多肽链的一级结构上相邻的几个氨基酸的残基相对集中,形成酶的活性中心
D.酶原激活实际上就是完整的活性中心形成的过程
E.当底物分子与酶分子相接触时,可引起酶活性中心的构象改变 5.辅酶NADP+分子中含有哪种B族维生素? A.磷酸吡哆醛 B.核黄素 C.叶酸 D.尼克酰胺 E.硫胺素
6.下列关于酶蛋白和辅助因子的叙述,哪一点不正确? A.酶蛋白或辅助因子单独存在时均无催化作用 B.一种酶蛋白只与一种辅助因子结合成一种全酶 C.一种辅助因子只能与一种酶蛋白结合成一种全酶 D.酶蛋白决定结合酶蛋白反应的专一性 E.辅助因子直接参加反应
7.如果有一酶促反应其〔8〕=1/2Km,则v值应等于多少Vmax? A.0.25 B.0.33
C.0.50 D.0.67 E.0.75
8.有机磷杀虫剂对胆碱酯酶的抑制作用属于: A.可逆性抑制作用 B.竞争性抑制作用 C.非竞争性抑制作用 D.反竞争性抑制作用 E.不可逆性抑制作用
9.关于pH对酶活性的影响,以下哪项不对? A.影响必需基团解离状态 B.也能影响底物的解离状态
C.酶在一定的pH范围内发挥最高活性 D.破坏酶蛋白的一级结构 E.pH改变能影响酶的Km值
10.丙二酸对于琥珀酸脱氢酶的影响属于: A.反馈抑制 B.底物抑制 C.竞争性抑制 D.非竞争性抑制 E.变构调节
11.Km值的概念是:
A.与酶对底物的亲和力无关 B.是达到Vm所必须的底物浓度
C.同一种酶的各种同工酶的Km值相同 D.是达到1/2Vm的底物浓度 E.与底物的性质无关
(四)问答题
1.怎样证明酶是蛋白质?
2.简述酶作为生物催化剂与一般化学催化剂的共性及其个性? 3.简述Cech 及Altman 是如何发现具有催化活性的RNA 的? 4.试指出下列每种酶具有哪种类型的专一性?
(1)脲酶(只催化尿素NH2CONH2 的水解,但不能作用于NH2CONHCH3); (2)|?-D-葡萄糖苷酶(只作用于|?-D-葡萄糖形成的各种糖甘,但不能作用于其他的 糖苷,例如果糖苷);
(3)酯酶(作用于R1COOR2 的水解反应);
(4)L-氨基酸氧化酶(只作用于L-氨基酸,而不能作用于D-氨基酸);
(5)反丁烯二酸水合酶[只作用于反丁烯二酸(延胡索酸),而不能作用于顺丁烯二 酸(马来酸)];
(6)甘油激酶(催化甘油磷酸化,生成甘油-1-磷酸)。
5.称取25mg 蛋白酶配成25mL 溶液,取2mL 溶液测得含蛋白氮0.2mg,另取0.1mL 溶液测酶活力,结果每小时可以水解酪蛋白产生1500|ìg 酪氨酸,假定1 个酶活力 单位定义为每分钟产生1|ìg 酪氨酸的酶量,请计算:
(1)酶溶液的蛋白浓度及比活。
(2)每克纯酶制剂的总蛋白含量及总活力。
6.Vmax 与米氏常数可以通过作图法求得,试比较V~[S]图,双倒数图,V~V/[S]作图, [S]/V~[S]作图及直接线性作图法求Vmax 和Km 的优缺点?
7.(1)为什么某些肠道寄生虫如蛔虫在体内不会被消化道内的胃蛋白酶、胰蛋白酶消 化?
(2)为什么蚕豆必须煮熟后食用,否则容易引起不适?
8.使用下表数据,作图判断抑制剂类型(竞争性还是非竞争性可逆抑制剂)?
[S] mmol/L 2.0 3.0 4.0 10.0 15.0
每小时形成产物的量 (|ìmol) 13.9 17.9 21.3 31.3 37.0 (没有抑制剂)
每小时形成产物的量(|ìmol) 8.8 12.1 14.9 25.7 31.3 (有抑制剂)
9.甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Mr 150 000)的活性位点有一个Cys 残基,假定为使5mL 的 1.2mg/mL 的酶溶液完全失活,需要3.0×10 -2mg 碘乙酰胺(Mr 185),计算酶的催 化亚基的数目?
10.对活细胞的实验测定表明,酶的底物浓度通常就在这种底物的Km 值附近,请解释 其生理意义?为什么底物浓度不是大大高于Km 或大大低于Km 呢? 11.有时别构酶的活性可以被低浓度的竞争性抑制剂激活,请解释? 12.(1)对于一个遵循米氏动力学的酶而言,当[S]=Km 时,若V=35|ìmol/min,Vmax 是 多少|ìmol/min?
(2)当[S]=2×10 -5mo/L,V=40|ìmol/min,这个酶的Km 是多少?
(3)若I 表示竞争性抑制剂,KI=4×10-5mol/L,当[S]=3×10-2mol/L 和[I]=3×10-5mol/L 时,V 是多少?
(4)若I 是非竞争性抑制剂,在KI、[S]和[I]条件与(3)中相同时,V 是多少? (2)计算[S]=1.0×10-6mol/L 和[S]=1.0×10-1mol/L 时的v?
(3)计算[S]=2.0×10-3mol/L 或[S]=2.0×10-6mol/L 时最初5min 内的产物总量? (4)假如每一个反应体系中酶浓度增加到4 倍时,Km,Vmax 是多少? 13.在很多酶的活性中心均有His 残基参与,请解释?
第三章 核酸化学
(一)名词解释
1.单核苷酸(mononucleotide)
2.磷酸二酯键(phosphodiester bonds) 3.不对称比率(dissymmetry ratio)
4.碱基互补规律(complementary base pairing) 5.反密码子(anticodon) 6.顺反子(cistron)
7.核酸的变性与复性(denaturation、renaturation) 8.退火(annealing)
9.增色效应(hyper chromic effect) 10.减色效应(hypo chromic effect) 11.噬菌体(phage)
12.发夹结构(hairpin structure)

