Alb、TRF↓↓。
（三）肾脏疾病 肾脏疾病早期可因蛋白尿而导致血浆蛋白质丢失，丢失的蛋白质与其分子量有关，小分子蛋白质丢失明显，而大分子量蛋白质因肝细胞代偿性合成增加。主要表现是Alb↓↓，PA、AAG、AAT、TRF↓；而AMG、Hp、β-LP↑。
第二节 血浆蛋白质测定
临床生化检验中测定蛋白质的方法很多，主要利用蛋白质的分子组成，结构或性质进行。
一、测定蛋白质特征元素——氮 如凯氏定氮法，是测定蛋白质的经典方法，1883年Kjeldahl首创，精密度准确度高，但操作复杂、费时、技术性强，不适合临床常规检测，一般用于标准血清的标定和校正。
二、利用重复的肽链结构 如双缩脲法，1914年首创，操作简便，重复性好，各种蛋白产生的颜色反应相近，但灵敏度较低，是目前临床上测定总蛋白的常规方法。
三、利用酪氨酸、色氨酸残基与试剂的反应或紫外吸收 如：
1. 酚试剂法 1921年，Folim首创，后又经改进，1951年Lowry改良成今法、灵敏度高（较双缩脲法高100倍），主要用于微量蛋白质检测，但各种蛋白质中酪氨酸含量不一，故准确性较差，试剂配制复杂且不稳定，化学干扰多，目前临床上仅用于粘蛋白测定。
2. 紫外吸收法 在280nm处有一吸收峰，快速、简单，不需加任何试剂，保留蛋白质活性，化学干扰大。
四、利用与染料的结合能力
1. 考马克斯亮蓝G-250结合蛋白法（CBB法） 1976年Bradford应用于蛋白质测定，操作简便、快速、重复性好，灵敏度高，干扰因素少，但特异性不高，大分子肽（分子量300以上），也参与反应，线性范围窄，临床上主要用于尿、脑溶液蛋白质测定。
2. 溴甲酚绿结合清蛋白法（BCG法） 灵敏度高，血清用量少，操作简便，但特异性不高，部分球蛋白也能与之结合（α1-球蛋白、运铁蛋白、触珠蛋白等），是目前临床上测定清蛋白的常规方法。
五、利用沉淀后借浊度或光折射测定 如比浊法、折光测定法，方法简便，试剂易得，但浊度的强弱受反应的条件影响大（加试剂的方法、温度等），结果准确性差，一般用于尿、脑脊液蛋白测定。
六、电泳法 CAE、PAGE，目前临床上常用电泳技术，但只能计算各种蛋
白质百分含量。
七、利用免疫学特性 免疫化学法，特异性、灵敏度高，只能用于某种特异蛋白的测定。
第三节 血清总蛋白的测定（双缩脲法）
一、原理
蛋白质分子中的肽键在碱性条件下能与二价铜离子作用生成紫红色的络合物，产生的颜色强度在一定范围内与蛋白质的含量成正比，但双缩脲反应并非蛋白质特有的颜色反应，分子中含二个以上肽键者有此反应。
二、双缩脲试剂
未失结晶水的硫酸铜（CuSO4·5H2O）3.0g溶于500ml新鲜制备的蒸馏水或刚煮沸冷却的去离子水中，加酒石酸钾钠（NaKC4O4O6·4H2O）9.0g，碘化钾5.0g，待完全溶解后加入6mol/L NaOH溶液100ml，最后加蒸馏水至1L，置聚乙烯瓶内盖紧保存。
酒石酸钾钠的作用是结合铜离子，维持铜离子在碱性溶液中的溶解度，碘化钾防止两价铜离子还原。
三、正常参考范围：60～80g/L 四、临床意义 （一）血清总蛋白增高
1. 血液浓缩 严重腹泻 、呕吐、高烧。
2. 合成增加 主要见于球蛋白合成增加，多发性骨髓瘤。 （二）血清总蛋白降低
1. 血液稀释 静脉滴注过多低渗溶液，各种原因所引起的水钠潴留。 2. 摄入不足和消耗增加 营养不良，慢性胃肠道疾病引起的消化吸收不良，消耗性疾病，结核病、甲亢、恶性肿瘤。
3. 合成障碍 严重肿瘤
4. 蛋白质丢失 严重烧伤，大量血浆渗出，肾病综合症。
第四节 血清清蛋白测定（溴甲酚绿法）
一、原理
溴甲酚绿（BCG）在pH4.2的环境中，在有非离子去垢剂（Brij-35）存在时，可与清蛋白结合形成蓝绿色复合物，颜色的深浅在一不定范围内与清蛋白含量成
正比。
BCG与蛋白结合的特异性较低，它不仅与Alb结合呈色，还可与其他蛋白质呈色，其中α1-球蛋白，TRF、Hp最明显，但反应速度不同，Alb可立即反应（快反应），其他蛋白质反应慢（慢反应）。
二、试剂
1. 10mmol/L BCG贮存液 BCG1.75g，溶于5ml 1 mol/L NaOH溶液中，加蒸馏水至250ml。
2. 0.5mol/L在琥珀酸缓冲贮存液（pH4.0） NaOH10g，琥珀酸56g，溶解于800ml蒸馏水中，用1mol/L NaOH溶液调pH至4.10±0.05，加蒸馏水至1L。
3. 叠氮钠贮存液 叠氮钠40g溶于1000ml蒸馏水中。
4. Brij-35溶液 Brij-35 25g，加蒸馏水80ml，置60℃左右水浴使其溶解，然后加水至100ml。
5. BCG试剂 于IL容量瓶内加蒸馏水400ml，琥珀酸缓冲贮存液100ml，BCG贮存液8ml，叠氮钠贮存液2.5ml，Brij-35溶液2.5ml，加蒸馏水至刻度，配好的BCG试剂的pH应为4.15±0.05。
Brij-35可提高蛋白质与染料的结合力及溶解度，提高呈色稳定性，如无Brij-35可用吐温-20代替，叠氮钠有防腐作用。
三、正常参考范围：35～5.5g/L。 四、临床意义 1.血清清蛋白
（1）增高 常见于严重脱水所致的血浆浓缩。
（2）降低 临床上较常见，与总蛋白降低的原因大致相同。急性降低常见于大量出血或严重烧伤；慢性降低见于肾病蛋白尿、肝功受损、肠道肿瘤与结核、慢性出血、营养不良和消耗性疾病等。清蛋白如低于20g/L，患者可出现水肿。
2.血清球蛋白
（1）增高 严重脱水、炎症、免疫系统疾病和肿瘤。
（2）降低 血液稀释、严重营养不良、胃肠道疾病等。肾上腺皮质激素和其它免疫抑制剂有抑制免疫功能的作用，会导致球蛋白合成减少。球蛋白浓度如低于10g/L时，可怀疑为无γ球蛋白血症。
3.清蛋白与球蛋白比值（A/G） 临床上常用A/G值衡量肝病的严重程度，当A/G值小于l时，称比值倒置，为慢性肝炎或肝硬化的特征之一。
【方法评价】
1.高胆红素血症和溶血标本对本法不产生干扰。严重高脂血症可使结果偏
高，应采用标本空白校正。若标本混浊，可做标本空白（血清0.02ml，加琥珀酸缓冲液4ml），用测定管吸光度减去标本空白管吸光度后再计算结果。
2. BCG系一种pH指示剂，它受酸、碱影响较大，所用器材必须清洁，无酸、碱污染。
3.BCG试剂的pH必须严格控制在pH4.15±0.05，pH升高可使染料空白增高，与清蛋白结合率下降。所以，控制反应液的pH是本法测定的关键。
4.BCG与蛋白质结合的特异性较低。它不仅与清蛋白结合呈色，还与血清中其它蛋白质呈色，其中以α1球蛋白、运铁蛋白（属β球蛋白）、触珠蛋白（属α2球蛋白）最为明显， BCG与不同蛋白质的反应速率不同，与清蛋白可立即发生反应（快反应），与其它蛋白质反应较慢（慢反应）。实验证明，血清与BCG试剂一经混合，“慢反应”即可发生，约持续1h才完成。
5. Brij-35是一种非离子去垢剂，它可增强BCG-清蛋白复合物的溶解度，消除BCG同清蛋白反应时可能产生的沉淀，它的浓度高于或低于所指定的浓度时，均导致敏感度降低和直线性丧失，对测定结果有较大影响。故其配制浓度和所加试剂量一定要准确。
6.当60g/L清蛋白标准液与BCG试剂作用后，溶液在光径1cm、波长630nm时，测定的吸光度应为0.811±0.035，若达不到此值，表示BCG试剂灵敏度较差。
7.本法灵敏度高，操作简便，重复性好，并可用于自动化分析技术。 8.线性范围为10～60 g/L，CV＜3%。
