液氮超低温保藏法: 效果好，方法简单，保藏对象广泛。 蒸馏水保藏法: 方法简单。
甘油保藏法: 方法简单，保藏期长，但需要有超低温箱。
补充题：何为细菌生长曲线？细菌长曲线分为哪几个时期？各有何特点？生长曲线在实践中有何应用？
答：细菌长曲线指在适宜的条件下进行培养，定时取样，测定其菌数，以菌数的对数为纵坐标，以生长时间为横坐标而绘制成曲线，其包括四个时期：即延迟期、对数期、稳定期及衰老期。各时期有如下特点：
①延迟期：菌体数量不增加，生长速度为零，主要在此阶段，菌体没有分裂，菌数没有增加，但菌体的生理活性很活跃。
②对数期：该时期菌体数量按几何级数增加，增长速度较快。 ③稳定性：死亡率与生长率相等，活细胞的数量达到最高水平。 ④衰老期：环境条件变得不适于细胞生长，死亡率上升。 生长曲线在生产中的应用：
① 延期限：在此时期菌体的遗传保守性较差，给予低于致死量的外界因素都可导致变异，所
以此时期是诱变育种的最佳时期。
②对数期：可以获得大量菌体，如果用于获得菌体或接种，需要延缓对数期。
③稳定性：如果以菌体为发酵产品的微生物，在此时活细胞达到最高水平，以代谢产物为发酵产品的微生物，它的产物积累量在平衡期后期达到收获期。
④衰亡期：芽孢细菌开始形成芽孢，霉菌形成孢子，所以保存菌种要利用衰亡期的芽孢或孢子。 39、请比较下列概念的区别。
（1）生长：微生物细胞吸收营养物质进行新陈代谢，当同化作用大于异化作用时，生命个体的重量和体积不断增大的过程。繁殖：生命个体生长到一定阶段，通过特定方式产生新的生命个体，使引起生命个体数量增加的生物学过程。
（3）营养缺陷型：野生型菌株经过人工诱变或者自然突发失去合成某种营养的能力，只有在基本培养基中补充所缺乏的营养因子才能生长。野生型：不需要生长因子而能在基础培养基中生长的菌株。
（4）自养：完全依靠无机养分合成复杂的有机物供自身生长发育需求并以光为能源。异养：必须摄取现成的有机物才能满足某生长发育的需求，并通过有机物的氧化来获取能源。
（6）间歇培养：是在一定体积的液体培养基中接种少量微生物并保持一定条件进行培养，结果会出现微生物数量由少变多，并达到高峰，又由多变少的变化规律。连续培养：在微生物的整个培养期间，通过一定的方式使微生物能以恒定的比生长速率生长并能持续生长下去的一种培养方法。
（7）液体发酵：将微生物接种到液体培养基中进行培养。固体发酵：利用固体培养基进行微生物繁殖。
（8）初级代谢：是给予生物能量和生成中间产物的过程。次级代谢：合成对维持自身生长发育和繁殖没有特别关系的蛋白质，酶以及由这些酶催化生成的物质。 （9）主动运输：在代谢能推动下，通过膜上特殊载体蛋白逆养料浓度梯度吸收营养物质的过程。被动运输：营养物质顺浓度梯度，以扩散方式进入细胞的过程。
（10）好氧：亦称好氧菌。在有氧环境中生长繁殖，氧化有机物或无机物的产能代谢过程，以分子氧为最终电子受体，进行有氧呼吸。厌氧：即不靠氧气生活生物仍然继续存在
（11）灭菌：杀死一切微生物（繁殖体孢子）的措施（包括杂菌和生产菌，病原和非病原菌在内）消毒：杀死引起感染的微生物，通常是指杀死病原微生物。
（13）抗代谢药物：有些化合物在结构上与生物体所必需的代谢物相似，以至于可以和特定的酶结合，从而阻碍酶的功能，干扰代谢的正常进行，用于疾病治疗。抗生素：是许多生物的生命活动过程中产生的一类次级代谢产物或其人工衍生物，它们在很低浓度时就能抑制或影响其他种类生物的生命活动。
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（14）选择性培养基：是根据某种或某一类群微生物的特殊营养需要，或对某种化合物的敏感性不同而设计出来的一类培养基。利用这种培养基可用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来；鉴别性培养基：用于鉴别不同类型微生物的培养基，在普通培养基中加入能与某种代谢产物发生反应的指示剂或化学药品，从而产生某种明显的特征性变化，以区别不同的微生物。
40. 请辨析下列说法：
(1)除少数光合细菌以外，水并不参与微生物的代谢反应。×
(2)当菌体生长、氧吸收和糖利用的比速度下降时，青霉素的合成达到最高值。√ (3)恒化培养与恒浊培养的区别在于前者的培养物群体始终处于对数生长期。× (4)营养物跨膜的主动运输必需依靠载体和能量，而被动运输不需要载体和能量。× (5)大多数微生物可以合成自身所需的生长因子，不必从外界摄取。√
(6)(NH4)2SO4是一种良好的速效性氮源。但被单独利用时，它会引起培养基pH下降。√ (7)一切好氧微生物都含有超氧化物歧化酶（SOD）。√
(8) 为防止冰晶体对微生物细胞的损伤，菌体冷冻的速度越快越好。√
第四章 微生物代谢的调节
3、酶活性调节与酶合成调节有何区别？它们之间又有何联系？
答：酶合成调节，通过调节酶合成的量来控制微生物代谢速度的调节机制，在基因转录水平上进行，对代谢活动调解是间接缓慢的。通过阻止酶的过量合成，能够节约生物合成的原料和能量。
酶活性调节，通过改变酶分子活性来调节代谢速度的调解方式，方式更直接，属于精细调节，见效快。是发生在蛋白质水平上的调节。 都是微生物代谢调节机制。
4、图示并解释乳糖操纵子的作用机制。
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诱导物—是起始酶诱导合成的物质，如乳糖等，它们可与调节蛋白结合，抑制其与操纵基因结合，从而促进转录进行。
6、分支代谢途径中存在哪些反馈控制的类型？它们各自有哪些特点？ 答：（1）协同或多价反馈控制，分支代谢途径中几个末端产物同时过量时才能抑制共同途径中的第一个酶的一种反馈调节方式(一个也不能少)。（2）合作反馈控制，两种末端产物同时存在，共同作用大于二者单独作用之和。（3）累积反馈控制，每一分支途径末端产物按一定百分比单独抑制共同途径中前面的酶。当几种末端产物共同存在时，控制作用积累，各末端产物之间既无协同效应，亦无拮抗作用。（4）顺序反馈控制，一种终产物积累，导致前一中间产物积累，通过后者反馈抑制合成途径关键酶活性，使合成终止。（5）同工酶控制，在一个分支代谢途径中，如果分支点以前一个较早的反应是由几个同工酶催化时，则几个分支代谢的几个最终产物往往分别对这几个同工酶发生抑制作用。 8、何谓分解代谢物阻遏？在含乳糖和葡萄糖的培养基中，E.coli 生长周期中会出现什么现象？请从操纵子模型来解释这一现象。 答：（1）当细胞内同时存在两种可利用底物（碳源或氮源）时，利用快的底物会阻遏与利用慢的底物有关的酶合成。阻遏并不是由于快速利用底物直接作用的结果，而是由这种底物分解过程中产生的中间代谢物引起的，所以称为分解代谢阻遏。（2） 乳糖与葡萄糖同时存在时，由于分解葡萄糖的酶类属于组成酶，能迅速地将葡萄糖降解成某种中间产物（X），X既会阻止ATP环化形成cAMP，同时又会促进cAMP分解成AMP，从而降低了cAMP浓度，继而阻遏了与乳糖降解有关的诱导酶合成（见下图）。只有当葡萄糖耗尽后，cAMP才能回升到正常浓度，操纵子重新开启，并开始利用乳糖作为碳源，形成菌体的二次生长。
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11、请简述下列概念的区别。
（1）反馈抑制：是指代谢途径的终产物抑制催化该途径中的一个反应（通常是第一个反应）的酶活力。反馈阻遏：是指终产物（或终产物的结构类似物）阻止该途径的一个反应中酶的合成（或几个反应酶的合成）。
（2）酶的诱导：有些物质可使某些代谢酶的含量增加和活力增强，这种现象称为酶的诱导。酶的阻遏：细胞中受反应最终产物的影响而中止特定酶合成的作用。
（4）同工酶：又称同功酶，是指催化相同的生化反应，但酶蛋白结构有差异，而且控制特征也不同的一组酶的通称。变构酶：为一种变构蛋白，酶分子空间构象的变化影响酶活性。 12.请辨析下列说法：
(1)反馈抑制作用的酶一定是变构酶，而反馈阻遏作用的酶不一定是变构酶。 √
(2)因为葡萄糖分解物对利用乳糖酶系具反馈抑制作用，所以，同时存在葡萄糖和乳糖的培养基中，大肠杆菌会出现二次生长现象。×
(3)一个操纵子中的结构基因通过转录、转译控制蛋白质的合成，而操纵基因和启动基因通过转录、转译控制结构基因的表达。×
(4)渗透酶(Permease)属于诱导酶，而其它种类的酶往往属于组成酶。×
第五章 微生物的菌种选育
4.诱变育种的基本环节有哪些？整个工作的关键是什么？
答：a.选择合适的出发菌株——制备待处理的菌悬液——诱变处理——筛选——保藏和扩大试验；
b.整个工作的关键是“筛选”。
5.微生物的DNA分子中的碱基发生改变可能会出现哪些情况？碱基改变是否一定会产生变异菌种？
答：a.错义突变、无义突变、同义突变、沉默突变；
b.不一定，假如碱基改变造成多肽链中一个氨基酸的改变，如果该氨基酸对蛋白质的结构和功能没有多大的影响，就不会引起细胞表型变化。 7.染色体畸变主要包括哪些类型？ 答：染色体畸变包括染色体数目的变化和染色体结构的变化。染色体结构变化包括染色体缺失、插入、重复、倒位和易位。
10.请用简图表示5-溴尿嘧啶（5-BU）引起AT—>GC和GC—>AT的碱基转换过程。 答：P226图5.2.27
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