1、微生物的有哪些特点？最基本的特点是什么？为什么？ 微生物的类群及特点：个体小、结构简、胃口大、食谱广、繁殖快、易培养、数量大、分布广、种类多、级界宽、变异易、抗性强、休眠长、起源早、发现晚、。
最基本的特点：体积小、面积大，吸收多、转化快，生长旺、繁殖快，适应强、变异易，种类多、分布广 2、什么是微生物学？研究内容是什么？ 微生物学是研究微生物生命活动的科学。
其研究内容涉及微生物的类型、成分、结构、新陈代谢、生长繁殖、遗传、进化、分化等生命活动的各个方面，以及微生物与其它生物和环境的相互关系等。
3、简述巴斯德和科赫对微生物学的主要贡献。 巴斯德的工作：
(1) 发现并证实发酵是由微生物引起的 (2) 彻底否定了“自然发生”学说(3) 免疫学——预防接种 (4) 其他贡献：巴斯德消毒法等
柯赫的工作：(1) 微生物学基本操作技术方面的贡献 a） 细菌纯培养方法的建立 b） 配制培养基 c） 流动蒸汽灭菌、 d） 染色观察和显微摄影 （2） 对病原细菌的研究作出了突出的贡献：
a） 具体证实了炭疽病菌是炭疽病的病原菌。 b） 发现了肺结核病的病原菌
c） 证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则——柯赫原则
4、什么是微生物？包括哪些类群？
微生物是指所有形体微小、无细胞结构或个体结构较为简单的低等生物的统称。
微生物包括无细胞结构的病毒、类病毒、朊病毒等；原核细胞的细菌、放线菌、蓝细菌、立克次氏体、衣原体、支原体等；真核生物的真菌、单细胞藻类和原生动物等。
5、简述微生物学在生命科学发展中的地位，并描绘其前景。 微生物是生物学基本理论研究中的理想实验对象：
（1）对微生物的研究促进许多重大生物学理论问题的突破--遗传密码的破译；基因表达调控机制的研究
（2）对生命科学研究技术的贡献--细胞的人工培养；突变体筛选；DNA重组技术和遗传工程
（3）微生物与“人类基因组计划”---作为模式生物；基因与基因组的功能研究的重要工具;
在将来微生物学在工业、经济、环境保护、人类健康等方面还将继续起着关键作用，同时微生物学与数、理、化、信息科学和技术科学进一步的交叉、渗透和融合，既是它的发展趋势，又是它旺盛生命力的所在。微生物具备生命现象的特性和共性，将是21世纪进一步解决生物学重大理论问题，如生命起源与进化，物质运动的基本规律等，和实际应用问题，如新的微生物资源的开发利用，能源、粮食等的最理想的材料。
6、Woese三原界分类系统是什么？
(1)古细菌原界,包括产甲烷细菌,极端嗜盐菌和嗜热嗜酸菌; (2)真细菌原界,包括蓝细菌和各种除古细菌以外的其它原核生物;
(3)真核生物原界,包括原生生物,真菌,动物和植物 7、简述烟草工程与微生物学科的关系？ (1)微生物肥料在烟草生产中的应用：烟田中使用微生物肥料，利用PGPR 类、固氮菌类、解磷细菌类、解钾菌类、菌根菌类、光合细菌类、内生菌类和复合微生物肥料等及拮抗细菌、拮抗真菌等微生物的生命活动，增加土壤有效养分，提高烟草营养，可以充分利用土壤资源，提高烟叶品质，增强烟草的抗病力，肥料中的有益微生物还可分泌多种代谢产物，对大量随残余烟草茎枝在土壤内越冬的病原菌产生拮抗作用，抑制土传病害的发生危害。避免和减少大量使用化肥对烟田的污染，提高烟田肥效和烟叶品质，有利于烟草生产的可持续发展。 农用抗生素、生物农药等在烟草生产中也具有重要作用。 （2）提高烟叶质量：提高有益物质含量、降低有害物质含量，以及协调相关化学物质组成等方面。 （3）选育抗TMV烟草：（4）提高卷烟品质
（5）利用烟叶废料发酵生产天然级苯乙醇香料（下脚料综合利用）。
（6）卷烟产品保存防腐技术。
8、如何理解微生物既是人类的朋友，又是人类的敌人？ 第一、对人类有益的微生物就是人类的好朋友，比如人体中
含有的“大肠杆菌”等就是对人类有好处的病菌，它可以帮助人类消化食物。其实人的肠子中是含有很多微生物的。只有在它们的共同帮助下，人才可以快速的消化食物。
第二、对人类没有益处的就是人类的敌人。比如“结核杆菌，伤寒、痢疾、血吸虫等等等。正是由于有了这些微生物的存在 ，才影响了人类的寿命。
第三、自然界中的微生物可以起到降解作用，例如，动物的死尸，只所以能腐烂，就是微生物在起作用。 微生物既是人类的敌人，更是人类的朋友！
1、自然界的物质循环和环境保护2、 医药领域3、 食品行业4、 生物工程制药5、 基因工程研究
解词：
无菌技术：指在试验操作过程中，防止一切医微生物侵入机体和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术和管理方法。
菌落：单个微生物在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到
一定程度；形成肉眼可见有一定形态结构的子细胞的群落。
二元培养物：只含有两种微生物的培养物，是有意保持两者
的特定关系的培养物；如寄生物与寄主。
分辨率：分辨力也叫分辨率或分辨本领。分辨力的大小是用
分辨距离（所能分辨开的两个物点间的最小距离）的数值来表示的。
显微技术：（microscopy）是利用光学系统或电子光学系统设
备，观察肉眼所不能分辨的微小物体形态结构及其特性的技术。包括：①各种显微镜的基本原理、操作和应用的技术；②显微镜样品的制备技术；③观察结果的记录、分析和处理的技术。
冰冻蚀刻技术--首先将标本在标本台上于-100℃的冰中或
-196℃的液氮中超低温冰冻，然后用冰刀将冻结的标本骤然断开。温度上升后，冰在真空中迅速升华，断裂面上的结构得以暴露，然后喷涂上一层蒸气碳和铂，组织溶掉后，把喷涂的碳和铂的膜剥离下来，置电镜下观察。
2、叙述稀释涂布平板法和稀释倾注平板法的操作过程。 倾注平板法： 编号：取6支盛有4.5ml无菌水的试管排列于试管
－1－2－3－4－5－6
架上，依次标上10，10，10，10，10，10字样。 稀释：以1ml无菌吸管按无菌操作从样品中吸取
－1－1
0.5ml菌液于10试管中，然后用另一吸管在10试管中吹
－1
吸三次，使其混合均匀，制成10稀释液。再用此吸管从10－1－2－2
管中吸取0.5ml稀释液注入10管中，依次制成10，10－3－4－5－6
，10，10，10稀释液。
－4－5－6
加样：用1ml无菌吸管分别吸取10，10，10
－4－5－6
稀释液1ml注入已编好号的10，10，10号无菌培养皿中。 倾注平板：将融化后冷至45℃左右的琼脂培养基，向加有稀释液的各培养皿中分别倒入10－15ml，迅速旋转培养皿，使培养基和稀释液充分混合，水平放置，待其凝固后，倒置于28－30℃恒温箱中培养。18－24h后，观察并记录各平板上菌落生长和分布情况。 涂布平板法：
－4
平板制备：制备三套无菌平板，并分别写上10，－5－6
10，10。 稀释：同倾注平板法。
－4－5－6
加样：用无菌吸管分别吸取10，10，10稀释液0.2ml对号注入编好号的琼脂平板中。 涂布：用无菌棒在各平板表面进行均匀涂布。待涂布的菌液干后，将培养皿倒置于28－30℃恒温培养箱中培养。18－24小时后观察并记录单菌落的生长和分布情况。 3、欲从土壤中分离纯化出可产生淀粉酶的芽孢细菌及固氮细菌。写出技术路线。
（1）采样：采耕作土或菜园土，肉类加工厂、饭店附近土壤更好。灭菌处理的采样铲将表层土铲去，取5-25cm土样，放入灭菌的纸袋中。带回，立即分离。
（2）增殖培养：土样置有玻璃珠的无菌水中振荡打散土粒，1g/ml。80-90℃保温10-15分钟。土样10倍系列稀释106倍，取后3个稀释度涂布于以酪蛋白为唯一氮源的选择培养基上，37℃培养24-48小时。
（3）菌种分离：挑有透明圈的单菌落采用划线分离法分离，
1
得到单菌落。镜检单菌落，并用芽孢染色法染色，确证为芽孢细菌。
（4）性能测定：挑取透明圈/菌落直径大的菌落，接种以酪蛋白为唯一氮源液体培养基，37℃培养24-48小时，测定蛋白酶活力。
4、用油镜观察时，为什么要在载玻片上滴加香柏油？
因香柏油的折射率n=1．52，与玻璃相同。当光线通过载玻片后，可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射。当光线通过玻片后，受到折射发生散射现象，进入物镜的光线显然减少，这样就减低了视野的照明度。
利用油镜不但能增加照明度，更主要的是能增加数值孔径，因为显微镜的放大效能是由其数值孔径决定的。
5、使用普通光学显微镜观察物象时，如何增加图象和视野的反差？
6、暗视野显微镜、相差显微镜和荧光显微镜在生物学研究中有什么作用？
暗视野显微镜可用来各种死活酵母细胞的死、活鉴别，对于梅毒螺旋体等娇弱微生物的观察也特别有用。相差显微镜可用以观察活细胞或未染色标本，能更清晰地观察活细胞的细微结构。荧光显微镜在免疫学、环境微生物学和分子生物学中应用十分普遍。
7、扫描电子显微镜有什么特点？
(1) 可以观察直径大到 30mm 的大块试样，制样方法简单。 (2) 场深大。三百倍于光学显微镜，适用于粗糙表面和断口的分析观 察；图像富有立体感、真实感、易于识别和解释。 (3) 放大倍数变化范围大，一般为 15 ～ 200000 倍，最大可达 10 ～ 1000000 倍，对于多相、多组成的非均匀材料便于低倍下的普查和高倍下的观察分析。
(4) 具有相当的分辨率，一般为 2 ～ 6nm ，最高可达0.5nm 。
(5) 可以通过电子学方法有效地控制和改善图像的质量，如通过调制 可改善图像反差的宽容度，使图像各部分亮暗适中。采用双放大倍数装 置或图像选择器，可在荧光屏上同时观察不同放大倍数的图像或不同形 式的图像。
(6) 可进行多种功能的分析。与 X 射线谱仪配接，可在观察形貌的同时 进行微区成分分析；配有光学显微镜和单色仪等附件时，可观察阴极荧 光图像和进行阴极荧光光谱分析等。 (7) 可使用加热、冷却和拉伸等样品台进行动态试验，观察在不同环境 条件下的相变及形态变化等。 8、叙述用油镜观察细菌形态的操作过程。
1、解词：原核微生物：指核质和细胞质之间不存在明显核
膜，其染色体由单一核酸组成的一类微生物
原生质体：脱去细胞壁使细胞成为只有细胞膜包裹的对渗透
压敏感的球形
真菌：是一类具有真正细胞核，能产生大量孢子进行繁殖，
无叶绿素不能进行光合作用，一般具有发达菌丝体，以吸收为营养方式，细胞壁含有几丁质或（和）纤维素的有机体。
霉菌：指哪些菌丝体比较发达，又不产生大型子实体的真菌。 酵母菌：是一类一般以单细胞状态存在，营出芽生殖或裂殖，
能发酵糖类产能，细胞壁常含有甘露聚糖，喜在含糖量较高、酸度较大的水生环境中生长的真菌的总称。
蕈菌：能够产生大型子实体的大型真菌，分类上属于子囊菌
或担子菌。
拴菌试验：，设法把单毛菌鞭毛的游离端用相应抗体牢牢“拴”
在载玻片上，然后在光学显微镜下观察细胞的行为。结果发现，该菌是在载玻片上不断打转（而非伸缩挥动），从而肯定了“旋转论”是正确的。
放线菌：是一类呈菌丝状生长，主要以孢子繁殖，陆生性较
强的原核生物。
蓝细菌：是一类含有叶绿素a，具有放氧性光合作用的原核微
生物。
蛭弧菌：寄生于其他细菌关能导致其裂解的一类细菌。 菌丝：单条管状细丝，为大多数真菌的结构单位，一些原核
生物也有菌丝，如放线菌。很多菌丝聚集在一起组成真菌的营养体，即菌丝体。
菌环：在伞菌子实体幼期，菌盖边缘伸向菌柄，由一层薄膜
包被着菌褶。当菌盖长大展平时，薄膜破裂，残留于菌柄上的部分称菌环。在蘑菇菌柄中部常见。
吸器：一些专性寄生真菌从菌丝上分化出来的旁枝，侵入细
胞内分化成指状、球状或丝状，用以吸收细胞内的营养。
菌核：是一种休眠的菌丝组织。由菌丝密集地交织在一起，
其外层教坚硬、色深，内层疏松，大多呈白色。有些寄生性真菌与宿主共同形成假菌核。例如冬虫夏草
子座：菌丝交织成垫状、壳状等，在子座外或内可形成繁殖
器官。
伴孢晶体：少数芽孢杆菌，例如苏云金芽孢杆菌在其形成芽
孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体—内毒素，称为伴孢晶体。
糖被：在细胞膜的外表，有一层由细胞膜上的蛋白质与多糖
结合形成糖蛋白，叫做糖被。
鞭毛：细菌表面着生的一种从细胞内伸出的细长并呈波形弯
曲的丝装物，式细菌的运动器官
菌毛：长在细菌体表的纤细、中空、短直、数量较多的蛋白
质类附
属物，具有使菌体附着于物体表面的功能。
性毛：构造和成分与菌毛相同，但比菌毛长，数量仅一至少
数几根。性毛一般见于革兰氏阴性细菌的雄性菌株（即供体菌）中，其功能是向雌性菌（即受体菌）传递遗传物质。有的性毛还是RNA噬菌体的特异性吸附受体。
2、对一株未知菌进行革兰氏染色，如何确证染色结果可靠？
3、通过革兰氏染色，为什么能把细菌分成两个类群？
染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用G-表示。细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。
4、比较真细菌和古细菌主要的不同点。
+-5、G和G细菌细胞壁特征性成分各有哪些？
革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖和磷壁酸组成形成的网状结构组成的；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质含量高
-6、G细菌细胞壁中脂多糖的功能有哪些？
7、叙述细菌细胞膜的功能。
8、为什么芽孢的抗逆性特别强？
9、细菌荚膜的功能是什么？
10、为什么不同的细菌具有不同的菌落特征？
菌落形态是指某种微生物在一定的培养基上由单个菌体形成的群体形态。微生物种类、大小、细胞结构等的不同，会影响菌落特征。以菌丝体为营养体的微生物菌落呈绒毛状、毡状等，单细胞微生物菌落呈黏液状等；营养细胞大的微生物菌落一般也大；生长繁殖快的微生物出现菌落时间早；无鞭毛的球菌菌落较小，较厚，边缘圆整；有芽孢的细菌菌落较大，扁平、形状不规则，边缘多缺刻；有荚膜的细菌菌落光滑，较大，呈透明蛋清状；产芽孢的细菌菌落不透明，干燥，表面粗糙，有褶皱感，边缘不规则。没有细胞壁的细菌菌落呈油煎蛋状，烈性噬菌体会裂解宿主细菌产生嗜菌斑，植物和动物病毒危害宿主形成一定形态的病灶或多角体。丝状真菌菌丝生长速度、产孢子能力及孢子颜色、能否分泌色素、是否产生气味等都影响菌落的色泽、表面特征、质地、渗出液和气味。
11、真菌的有性繁殖方式有哪些？
卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子。
12、利用血球计数板对微生物进行总菌计数，影响结果的误差主要有哪些？ 13、为什么用0.1%美蓝染液染色能区分出死、活酵母菌细胞？
14、霉菌、酵母菌和细菌的菌落特征。
2
15、磷壁酸的生理功能。
16、微生物有那些主要内含物？各自特点和功能是什么？
1、微生物的营养物质有哪些？
营养物质按照它们在机体中的生理作用不同，可将它们区分成碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子、和水六大类。 2、解词：生长因子（growth factor）通常指那些微生物生长
所必需而且需要量很小，但微生物自身不能合成或合成量不足以满足机体需要的有机化合物。各种微生物生长需要的生长因子的种类和数量是不同的。 培养基：（medium）是人工配制的,适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。
选择培养基：在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物
质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长
鉴别培养基：用于鉴别不同类型微生物的培养基
营养缺陷型：某些菌珠发生突变（自然或人工）后失去合成
某种对该菌珠生长必不可少的物质（、通常是生长因子）的能力。必须从外界环境获得该物质才能生长繁殖。
腐生型：在化能异养型微生物中，利用无生命活性的有机物
作为生长的碳源
合成培养基：化学成分完全了解的物质配制而成的培养基 半固体培养基：半固体培养基中凝固剂的含量比固体培养基
少,培养基中琼脂量一般为0.2～0.7%。半固体培养基常用来观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定等。 还原性培养基：
加富培养基：特殊营养物质包括血液、血清、酵母浸膏、动
植物组织液等
膜泡运输
水活度：在天然环境中，微生物可实际利用的自由水或游离
水的含量，一般用在一定的温度和压力条件下,溶液的蒸汽压力与同样条件下纯水蒸汽压力之比表示，即：αw=Pw/Pow式中Pw代表溶液蒸汽压力, POw代表纯水蒸汽压力。纯水αw为1.00,溶液中溶质越多, αw越小
3、比较营养物质进入微生物细胞的几种方式。 （1）扩散
在营养物质的吸收方式中，扩散(diffusion)是一种简单的吸收方式。正如溶质通过透析袋进行扩散一样，不规则运动溶质（如营养物质）通过细胞膜中的含水小孔，由高浓度的胞外环境向低浓度的胞内扩散，这种扩散是非特异性的，但膜上的含水小孔的大小和形状对被扩散的营养物质的分子大小有一定的选择性。物质运输的过程中，既不与膜上的分子发生反应，本身的分子结构也不发生变化。物质运输的速率随细胞膜内外该物质浓度差的降低而减小，直到膜内外物质浓度相同时，导致运输的速率最后降低到零既达到动态平衡。由于扩散是一个不需要代谢能的运输方式，因此，物质不能进行逆浓度运输。 （2）促进扩散
促进扩散(facilitated diffusion)也是一种物质运输方式，它与扩散的方式相类似，例如物质在运输过程中不需要代谢能，物质本身在分子结构上也不会发生变化，不能进行逆浓度运输，运输的速率随着细胞内外该物质的浓度差的缩小而降低，直至膜内外的浓度差消失，从而达到动态平衡。 （3）主动运输
与上面两种运输方式相比，主动运输(active transport)是物质运输的过程中要消耗代谢能，运输的速率不依赖于细胞膜内外被运输物质的浓度差，而是可以逆浓度运输的运输方式。 （4）基团转位
基团转位(group translocation)是另一种类型的主动运输。在这种运输方式里，除了在运输过程中，物质分子发生化学变化这一特点以外，其它的特点都与主动运输方式相同。 4、水的生理作用主要有哪些？ ①起到溶剂与运输介质的作用 ②参与细胞内一系列化学反应
③维持蛋白质、核酸等生物大分子稳定的天然构象 ④热的良好导体
⑤通过水合作用与脱水作用控制由多亚基组成的结构 5、微生物有哪四种营养类型？比较其主要特点，并各列出2种微生物。
根据微生物获取能源，碳源、氢、电子共体的方式分为四种类型。
（1）光能无机自养型 这是一类能以CO2作为唯一碳源或主要碳源并利用光能进行生长的微生物，它们能以无机物如硫化氢、硫代硫酸钠或其它无机硫化物作为供氢体，使CO2还原成细胞物质，并且伴随有元素硫的放出。
（2）光能有机异养型 这类微生物不能以CO2作为主要碳源或唯一碳源，而必须以有机物作为供氢体，利用光能将CO2还原成细胞物质，红螺菌属中的一些细菌就属这种营养类型。它们能利用异丙醇作为供氢体，使CO2还原成细胞物质，同时积累丙酮。 （3）化能无机自养型 这类微生物与光能自养型微生物相比，它们生长所需要的能量来自无机物氧化过程中放出的化学能。它们在以CO2或碳酸盐作为唯一或主要碳源进行生长时，利用电子供体如氢气、硫化氢、二价铁离子或亚硝酸盐等使CO2还原成细胞物质。属于这类微生物的有硫化细菌、硝化细菌、氢细菌与铁细菌等。它们广泛分布在土壤与水域环境中，在物质转换过程中起重要作用。 （4）化能有机异养型 目前在已知的微生物中大多数属于化能异养型。它们生长所需要的能量均来自有机物氧化过程中放出的化学能，生长所需要的碳源主要是一些有机化合物，如淀粉、糖类、纤维素、有机酸等。因此，在化能异养型微生物里有机物通常即是它们生长的碳源物质又是能源物质。 6、琼脂用作培养基配制的凝固剂有哪些优点？
7、叙述配制500毫升牛肉膏蛋白胨培养基（牛肉膏0.5%，蛋白胨1.0%，氯化钠0.5%，pH7.2～7.4）的过程。
8、为什么培养基配制后要尽快灭菌？
9、选用和设计培养基有哪几个原则？
（1）目的明确 。（2）选择适合的营养物质。（（3）营养物质浓度及配比合适。（4）理化适宜（5）原料来源的选择——经济节约。
1、名词解释：发酵：指在无氧条件下，低物脱氢后产生的还
原氢不经过呼吸链而直接交给某一内源性之间产物的一类低效产能的现象。
次级代谢：在一定生长阶段出现非生命活动所必需的代谢类
型
2、叙述底物脱氢EMP、HMP、ED途径的生理意义、特征酶、关键酶。
EMP途径：为微生物的生理活动提供ATP和NADH，其中间产物又可为微生物的合成代谢提供碳骨架，并在一定条件下可逆转合成多糖。
特征酶：1，6-二磷酸果糖醛缩酶。 HMP途径：产生大量的还原力，为合成代谢提供不同碳原子骨架的磷酸糖；
特征酶：转酮醇酶、转醛醇酶。 ED途径：生理意义同EMP；
特征酶：KDPG醛缩酶、6-磷酸葡萄糖酸脱水酶。 3、比较硝化细菌和反硝化细菌生理不同点。
在营养类型上：硝化细菌为化能无机自养型，氧化无机物亚硝酸根离子为硝酸根离子，获得氢和电子，经顺式电子和氢传递，以氧气为受体。在电子传递过程中产生ATP。还原力产生通过电子的反向传递，消耗ATP而产生。反硝化细菌为化能有机异养型，以氧化有机物获得能量及氢和电子，电子和氢经传递后，交给硝酸根离子，使其还原。在与氧气的关系上，硝化细菌大多为好氧菌，反硝化细菌为厌氧菌。
4、比较环式光合磷酸化和非环式光合磷酸化，并各列举出2种微生物。
循环式光合磷酸化和非循环式光合磷酸化。前者是在光反应的循环式电子传递过程中同时发生磷酸化，产生ATP。后者是在光反应的非循环式电子传递过程中同时发生磷酸化，产生ATP。在非循环式电子传递途径中，电子最终来自于水，最后传到氧化型辅酶Ⅱ（NADP+）。因此，在形成ATP的同时，还释放了氧并形成还原型辅酶Ⅱ（NADPH）。 5、叙述原核生物电子传递的特点。
3
（1）位于细胞膜上；（2）氧还载体的取代性强，如辅酶Q可被甲基萘醌或脱甲基萘醌取代，细胞色素a1可被细胞色素aa3、细胞色素o或细胞色素d取代；（3）氧还载体的数量可增可减，如大肠杆菌细胞色素就有9种以上；（4）有分支呼吸链存在，受环境的影响大，如后端细胞色素系统中分支较多。
6、细菌乙醇发酵和酵母菌乙醇发酵有何不同？ 酵母菌（在pH3.5-4.5时）的乙醇发酵： 脱羧酶 脱氢酶
丙酮酸 ------------------->乙醛-------------->-乙醇 通过EMP途径产生乙醇，总反应式为：
C6H12O6+2ADP+2Pi > 2C2H5OH+2CO2+2ATP 细菌(Zymomonas mobilis)的乙醇发酵： 通过ED途径产生乙醇，总反应如下：
葡萄糖+ADP+Pi----------------> 2乙醇+2CO2+ATP 细菌(Leuconostoc mesenteroides)的乙醇发酵
通过HMP途径产生乙醇、乳酸等，总反应如下：
葡萄糖+ADP+Pi---------------->乳酸+乙醇+CO2+ATP 同型乙醇发酵：产物中仅有乙醇一种有机物分子的酒精发酵 异型乙醇发酵：除主产物乙醇外，还存在有其它有机物分子的发酵
7、乳酸发酵有哪三种类型？比较其不同，并各列举一种微生物。
由于菌种不同，代谢途径不同，生成的产物有所不同，将乳酸发酵又分为同型乳酸发酵、异型乳酸发酵和双歧杆菌发酵。 同型乳酸发酵：（经EMP途径） 异型乳酸发酵：（经HMP途径）
双歧杆菌发酵: （经HK途径—磷酸己糖解酮酶途径） 8、叙述化能自养微生物的代谢特点。
无机底物的氧化直接与呼吸链发生联系，由脱氢酶或氧化还原酶催化的无几底物脱氢或脱电子后，直接进入电子传递链；呼吸链组分更加多样化，氢或电子可以从任一组分进入呼吸链；产能效率比一般异养微生物更低。
9、什么是次级代谢？次级代谢产物主要有哪些？ 次级代谢： 在一定生长阶段出现非生命活动所必需的代谢类型；
产物：抗生素、色素、激素、生物碱等 10、初级代谢与次级代谢有什么关系？
次级代谢与初级代谢关系密切，初级代谢的关键性中间产物往往是次级代谢的前体，比如糖降解过程中的乙酰CoA是合成四环素、红霉素的前体；次级代谢一般在菌体对数生长后期或稳定期间进行，但会受到环境条件的影响；某些催化次级代谢的酶的专一性不高；次级代谢产物的合成，因菌株不同而异，但与分类地位无关；质粒与次级代谢的关系密切，控制着多种抗生素的合成。
次级代谢不象初级代谢那样有明确的生理功能，因为次级代谢途径即使被阻断，也不会影响菌体生长繁殖。次级代谢产物通常都是限定在某些特定微生物中生成，因此它们没有一般性的生理功能，也不是生物体生长繁殖的必需物质，虽然对它们本身可能是重要的。
1、解词：细菌群体生长曲线：将一定量的细菌接种到定量适
宜的液体培养基中培养，定时取样测定细胞数量，以培养时间为横座标，以菌数的对数为纵座标作图，得到的一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。
恒化连续培养：在整个培养过程中通过控制培养基中某种营
养物质的浓度基本恒定的方式，保持细菌的比生长速率恒定，使生长“不断”进行。
恒浊连续培养：通过连续培养装置中的光电系统控制培养液
中菌体浓度恒定、使细菌生长连续进行的一种培养方式。
抗生素：是一类用微生物或其它生物生命活动过程中合成的
次生代谢产物或其人工衍生物。
抗代谢物：一类在化学结构上与细胞内必要代谢物的结构相
似，并可干扰正常代谢活动的化学物质。
除菌：
巴氏消毒：
同步培养：是一种培养方法，它能使群体中不同步的细胞转
变成能同时进行生长或分裂的群体细胞。
石炭酸系数：指在一定时间内被试药剂能杀死全部供试菌的
最高稀释度和达到同效的石炭酸的最高稀释度的比率。一般规定处理时间为10分钟，而供试菌定为Salmonella typhi（伤寒沙门氏菌）。
2、什么是代时，推算出细菌代时的计算公式。影响微生物代时有哪些因素？
在细菌个体生长里，每个细菌分裂繁殖一代所需的时间为代时(Generation time)
t1 – t0 0.639
G = —————— = ————— n m m：比生长速率
影响微生物增代时间（代时）的因素：
1）菌种，不同的微生物及微生物的不同菌株代时不同； 2）营养成分，在营养丰富的培养基中生长代时短
3）营养物浓度，在一定范围内，生长速率与营养物浓度呈正比，
4）温度，在一定范围，生长速率与培养温度呈正相关。 3、如何实现同步培养？
获得细菌同步培养的方法主要有两类，其一是调整生理条件诱导同步性，主要是通过控制环境条件如温度、光线和处于稳定期的培养物添加新鲜培养基等来诱导同步；其二是机械法（又称选择法），它是利用物理方法从不同步的细菌群体中选择出同步的群体，一般可用过滤分离法或梯度离心法来达到。在选择法中，代表性的是硝酸纤维素薄膜法 4、叙述温度、pH和氧气对微生物生长的影响。
在一定温度范围内，机体的代谢活动与生长繁殖随着温度的上升而增加，当温度上升到一定程度，开始对机体产生不利的影响，如再继续升高，则细胞功能急剧下降以至死亡。不同的微生物都有其最适生长pH值和一定的pH范围，即最高、最适与最低三个数值，在最适pH范围内微生物生长繁殖速度快，在最低或最高pH值的环境中，微生物虽然能生存和生长，但生长非常缓慢而且容易死亡。不同的微生物有其最适的生长pH值范围，同一微生物在其不同的生长阶段和不同的生理、生化过程中，也要求不同的最适pH值。氧气对微生物的生命活动有着重要影响。按照微生物与氧气的关系，可把它们分成好氧菌（aerobe）和厌氧菌（anaerobe）两大类。好氧菌中又分为专性好氧、兼性厌氧和微好氧菌；厌氧菌分为专性厌氧菌、耐氧菌。
5、叙述血球计数板对微生物总菌计数的原理。
将经过适当稀释的菌悬液（或孢子悬液）放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中，在显微镜下进行计数。由于
2
计数室的容积是一定的（ 0．1mm），所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积内的微生物总数目。由于此法计得的是活菌体和死菌体的总和，故又称为总菌计数法。
6、灭菌、消毒、防腐和除菌的区别，各举出2例实际应用的例子。
1）灭菌：采用强里的理化因素使任何物体内外的一切微生物丧失繁殖能力的措施。
2）消毒：用较温和的理化因素，仅仅杀死物体仪表面的或内部的部分对人体或动物，植物有害的病原菌，而对消毒的物体基本无害。
3）防腐：利用某些理化因素抑制霉腐微生物的生长繁殖，如低温，缺氧，干燥，高渗，高酸等。
4）除菌：既化学治疗，利用具有高度毒力的即为对病原菌有高度毒力而对宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体内病原微生物的生长，借以达到治疗宿主传染病的一种措施。 7、叙述高压蒸汽灭菌的操作过程。 高压蒸汽灭菌流程：
1、加水；2、装锅；3、对称拧紧螺丝，封闭锅门；4、加热升温；5、排气；6、保温；7、自然降温；8、干燥灭菌物体；9、出锅；10、趁热倒出锅内余水。 排气方法：
1、加热开始，一直开启排气阀，加热到有大量水蒸气冒出，再维持3-5分钟；关闭排气阀，升温灭菌。
2、开始关闭排气阀，加热升压，待温度至105℃，开启排气阀排除锅内气和汽；如此反复3次。关闭排气阀，升压灭菌。 8、高压蒸汽灭菌对培养基有哪些影响？
形成沉淀物、破坏营养，提高色泽、改变pH，降低培养物浓度
9、细菌对抗生素产生耐药性的机理有哪些？
4
