单位
定义为每分钟产生1ug酪氨酸的酶量,请计算:
(1)(1)酶溶液的蛋白浓度及比活力。(蛋白浓度=0.2×6.25mg/2ml=0.625mg/ml 比活力=(1500/60×1ml/0.1ml)÷0.625mg/ml=400U/mg) (2)(2)每克酶制剂的总蛋白含量及总活力。(总蛋白=0.625mg/ml×1000ml
=625mg;
总活力=625mg×400U/mg=2.5×105U) 4.decamethonium[(CH3)3N+--CH2一(CH2)8一CH2一N+(CH3)3]是一种用于肌肉松弛的药物,是乙酰胆碱酯酶的抑制剂,这种抑制作用可以通过增加乙酰胆碱的浓度来逆转或解除。请问这种药物是否与酶共价结合?属于哪种类型的抑制剂?并解释为什么可以通过增加乙酰胆碱的浓度来解除抑制。
5.α—糜蛋白酶(Mr24 000)可以水解苯甲酰—L—酪氨酸乙酯。比活为45.0 umol/min/mg酶。已知α—糜蛋白酶只有一个活性位点。求转换数。 (转换数=45.0×10-6×1000×24000=1080/min)
6.α—胰凝乳蛋白酶可以催化N—乙酰—L—Phe-p—硝基苯酯的水解,在不同的底物浓度下测反应初速度得到一组实验数据,见下表。求Km和Vmax [S]umol/L Vo umol/L/min 10 11.7 15 15.0 20 17.5 25 19.4 30 21.0 35 22.3 40 23.3 45 24.2
50 50 25.0
(作1/v~1/[S]图,则横轴截距=-1/Km=-5.2×104L/mol,Km=1.9×10-5mol/L 纵轴截距=1/Vmax=2.9×104min/mol/L,Vmax=3.45×10-5mol/L/min)
7.甘油醛—3—磷酸脱氢酶(Mr 150 000)的活性位点有一个Cys残基,假定为使 5ml 1.2mg/ml的酶溶液完全失活,需要3.0×10—2mg碘乙酰胺(Mr 185),计 算酶的催化亚基的数目。(酶的量(mmol)=1.2×5/150 000=4.0×10—5mmol; 碘乙酰胺的量(mmol)=3.0×10—2/185=1.6×10—4mmol所以酶的催化亚基数为 4。)
8.对活细胞的实验测定表明,酶的底物浓度通常就在这种底物的Km值附近。请解释其生理意义。为什么底物浓度不是大大高于Km或大大低于Km呢?
(据v~[S]的米氏曲线,当底物浓度大大低于Km值时,酶不能被底物饱和,从酶的利用角度而言,很不经济;当底物浓度大大高于Km值时,酶趋于被饱和,随底物浓度改变,反应速度变化不大,不利于反应速度的调节;当底物浓度在Km值附近时,反应速度对底物浓度的变化较为敏感,有利于反应速度的调节。) 9.在一组10ml的反应体系中,加入不同浓度的底物。分别测反应初速度,得数据如下:
[S]mol/L V(umol/min) 5.0×10—7 0.0096 5.0×10—6 0.071 5.0×10—5 0.20 5.0×10—4 0.25 5.0×10—3 0.25 5.0×10—2 0.25 不作图计算: (1)Vmax和Km。
(2)计算[S]=1.0×10—6mol/L和[S]=1.0×10—1mol/L时的v。 (3)计算[S]=2.0×10—3mol/L.或[S]=2.0×10—6mol/L时最初5min内的产物
总量。
(4)假如每一个反应体系中酶浓度增加至4倍时,km,Vmax是多少? 当[S]=5.0× 10—5mol/L时,v是多少?
[(1)Vmax=0.25umol/min,Km=1.25×10—5mo1/L (2)v1= 0.0185umol/min v2=0.25/umo1/min (3)v=0.25/umo1/min
p=0.25×5=1.25umol<2.0×10—3×0.01=20/umol
v=0.25×2.0×10—6/(1.25×10—5+2.0×10—6)=0.033umol/min p=0.033×5=0.17umol>2.0×10—6×0.01=0.02umo1 所以,p≤0.02umol
(4)因为,Km与[E]无关,所以,Km不变, 因为,Vmax=k3[E],[E]增大4倍,
所以,Vmax增大4倍=0.25×4=1.Oumol/min
v=1.0×5.0×10—5/(1.25×10—5+5.0×10—5)=0.8umo1/min ]
第四章 维生素与辅酶 一、填充题 1.维生素是维持生物体正常生长所必需的一类 有机物质。主要作用是作为 的组分参与体内代谢。(1.微量2.辅酶)
2.根据维生素 性质,可将维生素分为两类,即 和 。 (1.溶解2.水溶性维生素3.脂溶性维生素)
3.维生素A的活性形式是 ,可与视蛋白组成 ,后者是维持 视觉所必需的。(11-顺视黄醛2.视紫红质3.暗)
4.维生素D在体内的主要作用是调节 代谢,与 生长有关。 (1.钙磷2.骨骼)
5.维生素B1由 环与 环通过 相连,主要功能是以 形式,作为 和 的辅酶,转移二碳单位。(1.嘧啶2.噻唑3.亚甲基4.TPP 5.脱羧酶6.转酮酶)
6.维生素B2的化学结构可以分为二部分,即 和 ,其中
原子上可以加氢,因此有氧化型和还原型之分。(1.二甲基异咯嗪基2.核糖醇基3.1,10位氮)
7.维生素B6是 衍生物,也称吡哆素,有 , , 三种形式,可以以 、 的形式作为氨基
酸 、 、 的辅酶。(1.吡啶2.吡哆醛3.吡哆胺4. 吡哆醇5.磷酸吡哆醛6.磷酸吡哆胺7.脱羧酶8.转氨酶9.消旋酶) 8.生物素可看成由 , , 三部分组成,是
的辅酶,在 的固定中起重要是作用。(1.尿素2.噻吩3.戊酸侧链4.羧化酶5.CO2) 二、是非题
1. 四种脂溶性维生素都是异戊二烯衍生物,属于类脂。(-) 2. B族维生素都可以作为辅酶的组分参与代谢。(+) 3. 脂溶性维生素都不能作为辅酶参与代谢。(-)
4. 除了动物外,其他生物包括植物、微生物的生长也有需要维生素的现象。(+) 5. 植物的某些器官可以自行合成某些维生素,并供给植物整体生长所需。(+) 6. 维生素E不容易被氧化,因此可做抗氧化剂。(-) 7. B族维生素具有相似的结构和生理功能。(-)
8. 经常做日光浴有助于预防佝偻病和骨软化症的出现。(+) 9. L—抗坏血酸有活性,D—抗坏血酸没有活性。(+) 10. 有些动物可以在体内合成维生素C。(+)
三、选择题(下列各题有四个或五个备选答案,试从其中选出一个) 1.下列那一项不是辅酶的功能?( E )
(A) 转移基团 (B) 传递氢 (C) 传递电子 (D)某些物质分解时的载体 (E) 决定酶的专一性 2.下列哪一种维生素是甲基和甲酰基的载体( C )
(A)硫胺素 (B)抗坏血酸 (C)叶酸 (D)CoA (E)核黄素 3.抗氧化作用的脂溶性维生素是:( B )
(A)维生素C (B)维生素E (C)维生素A (D)维生素B1 (E)维生素D 4.缺乏哪种维生素将导致癞皮病:( E )
(A) 维生素B2 (B)维生素E (C)维生素A (D)维生素B1 (E)维生素PP 5.下列哪一叙述是错的? ( E )
(A)维生素D促进肠吸收钙和磷
(B)维生素K是凝血酶原合成的必需物质
(C)维生素A是脂溶性维生素,鱼肝脏中富含维生素A. (D)坏血病,一般认为是由于维生素C的缺乏所致
(E)维生素B12也称吡哆醇,是氨基转移酶的辅酶 6.下列辅酶中的哪个不是来自于维生素?( B )
(A)CoA (B)CoQ (C)PLP (D)FH2 (E)FMN 7.下列叙述哪一种是正确的?( C ) (A)所有的辅酶都包含维生素组分。
(B)所有的维生素都可以作为辅酶或辅酶的组分。
(C)所有的B族维生素都可以作为辅酶或辅酶的组分。 (D)只有B族维生素可以作为辅酶或辅酶的组分。
(E)只有一部分B族维生素可以作为辅酶或辅酶的组分。 8.下列化合物中除哪个外,常作为能量合剂使用。( D ) (A)CoA (B)ATP (C)胰岛素 (D)生物素 9.下列化合物中哪个不含腺苷酸组分?( B )
(A)CoA (B)FMN (C)FAD (D)NAD+ (E)NADP+ 四、问答题
1.请指出与下列生理功能相对应的脂溶性维生素。
(1)(1)调节钙磷代谢,维持正常血钙、血磷浓度。 (2)(2)促进肝脏合成凝血酶原,促进凝血。
(3)(3)维持上皮组织正常功能,与暗视觉有关。 (4)抗氧化剂,与动物体生殖功能有关
(1.维生素D 2.维生素 K 3.维生素A 4.维生素E) 2. 指出下列症状分别是由于哪种(些)维生素缺乏引起的?
(1)脚气病 (2)坏血病 (3)佝偻病 (4)干眼病 (5)癞皮病
(6)软骨病 (7)新生儿出血 (8)巨红细胞贫血
(1.(1.维生素B1 2. 维生素C 3. 维生素D 4. 维生素A 5. 维生素PP 6. 维生素D 7. 维生素K 8.叶酸) 3. 指出下列各种情况下,应补充哪种(些)维生素。 (1)多食糖类化合物 (2)多食肉类化合物 (3)以玉米为主食 (4)长期口服抗生素
(5)长期服用雷米封的肺结核病人
(6)嗜食生鸡蛋清的人
维生素B1 2. 维生素B6 3. 维生素PP 4. 维生素K、生物素、叶酸、维生素B12 5.维生素PP、维生素B6 6. 生物素)

