南京中医药大学
大学生创新训练计划项目
项目名称 所在学院 申请学生 联系电话 指导教师 申请日期
申 请 表
针刺在GDNF促进浦肯野细胞恢复过程中作用的研究
____________第二临床医学院_______________
______沈翠翠_____________________
______ 15151805396__________________
______________姜劲峰____________________
____________ scc128@sina.com ________
2011年05月30日________________
南京中医药大学教务处制
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江苏省高等学校大学生实践创新训练计划项目申请表
项目名称 项目所属 一级专业门 项目类型 项目实施时间 主持人 针刺在GDNF促进浦肯野细胞恢复过程中作用的研究 中医学类 项目所属 二级专业类 针灸学 （） 个人项目 （√） 团队项目 起始时间：2011年9月 完成时间：2012年8月 姓名 沈翠翠 许林玲 韦庆波 窦杰 年级 2008 所在院系 /专业 第二临床医学院 第二临床医学院 第二临床医学院 第二临床医学院 年龄 行政职务/专业技术职务 联系电话 15151805396 13815879180 13776674907 13913315760 E-mail scc128@sina.com 申请人或申请团队2008 annie90aa@126.com 成员 2007 2007 姜劲峰 525829492@qq.com 450694859@qq.com 44 姓名 单位 第二临床医学院 针药结合实验室副主任/副教授 导师“针灸治疗神经精神系统疾病的效应规律及机制研究” ――获2009年度江苏省科技进步三等奖（第3）。 在“针灸学理论体系的解析与重构”方向参加973专项课题2项。主持江苏省中医药管理局科研项目、南京中医药大学校级课题各1项；参加课题（在研）：国家自然科学基金、教育部博士点基主要成果 金课题、江苏省教育厅重大项目各1项。完成其它科研课题5项。公开发表学术论文20篇，参编著作3部。
一、申请理由（包括自身的知识条件、自己的特长、兴趣、已有的实践创新成果等） 本团队成员均为针推七年制的学生，已经主修了中西医基础知识，并且对人体解剖学、细胞生物学、组织学、免疫学、统计学等课程有了一定的掌握和了解。而且，通过课堂各种实验的操作以及在导师指导下参与了一些课题的研究，本团队成员都已具备了良好的实验技能。而且，本团队的成员多次获得各项奖学金和荣誉，如：人民奖学金一、二等奖，朱敬文奖学金，朱文军奖学金，校级优干，通过计算机一二级等等。此外，本团队的成员在创新方面都有浓厚的兴趣，曾参与申请课题或进行相关科研实验。 1.研究背景 胶质细胞源性神经营养因子（glial cell line-derived neurotrophic factor，GDNF）于1993年由Lin等从大鼠神经胶质细胞系B49的培养液中首先纯化并命名[1]。目前已在多种神经细胞和神经相关细胞的培养中发现GDNF表达，并有靶源性神经营养因子的作用[2,3]。 存在于小脑皮层的浦肯野细胞层中的浦肯野细胞，胞体大，呈梨状，长径约50~70μm，粗径约30~35μm，是小脑皮质中最大的神经元。在小脑皮质的5种细胞中，只有浦肯野细胞发出轴突离开小脑皮层，成为小脑皮层中唯一的传出神经元，途中发出侧支返回胞体。轴突经颗粒层入髓质，终止于小脑髓质内核群，是抑制性神经元。浦肯野细胞的脱落及萎缩是临床小脑萎缩性共济失调的病因之一，该疾病多在成年后起病，进展缓慢，表现有上肢意向性震颤，共济失调性步态及构音困难，亦可有躯干共济失调，下肢肌张力增高，形成共济失调-痉挛步态等。 作为多效能的神经营养因子，GDNF是目前发现的对小脑浦肯野细胞和颗粒细胞最有效的神经营养因子，是一种能阻止神经元变性、周围神经萎缩的细胞因子，能促进浦肯野细胞成熟和发育并增加其在总体细胞中的比例[4,5]。但是，GDNF在不同时期表达不一，胚胎期高表达，出生后表达降低，靶组织或神经元损伤后表达迅速增加，在退行性神经元病中则表达降低[6]。因此，增强GDNF作用于浦肯野细胞，对防治小脑萎缩性共济失调具有重要的意义。 神经营养因子在神经元保护中的作用非常重要。如果能够调动自身神经营养因子的分泌并行使其功能，必将起到“扶正祛邪”的作用。针刺或电针是一种刺激，
无论刺激神经的主干还是刺激神经的末梢，都会引起神经产生动作电位。许多研究证明：神经营养因子的合成、释放及受体的信息传导均受动作电位的调节[7]。神经营养因子与其受体结合后，受体上的酪氨酸酶被激活。同时，神经营养因子结合的受体形成入胞化的囊泡进入细胞。入胞后，神经营养因子受体嵌在囊泡中，由细胞内的囊泡运输系统从神经远端转运到神经细胞胞体。在胞体内，这些被激活的神经营养因子受体启动第二信使系统，对神经元的营养、存活及神经突触的可塑性产生影响[8]。因此，针刺或电针相关穴位均可以引起外周和中枢神经系统两个层次的反应，从而激活GDNF。但目前对于针刺激发GDNF阳性细胞数表达增加与否，及其能否促进浦肯野细胞恢复的研究甚少。为了探讨针刺在治疗小脑萎缩性共济失调中，对于GDNF的表达及其对浦肯野细胞恢复的影响，本实验将对小脑萎缩前后GDNF和浦肯野细胞的变化情况进行对比研究。 2.研究意义 小脑萎缩性共济失调大多在成年后发病（平均年龄在30-40岁），这既会造成家庭的损伤，也会成为社会的负担。但是，目前临床缺乏治疗小脑性共济失调的确切有效药物，原因很多，如小脑性共济失调的病因繁多，同一种药物治疗不同原因的共济失调疗效差异很大，即使同一家族的不同患者对于药物的反应也可能不一致[9]。而且很多药物在发挥药效的同时，也会对机体带来毒副作用。本次实验研究中，采用针刺作为治疗手段，不仅可以避免对机体的二次伤害，而且可以利用针刺治疗的特异性与非特异性的特点，激发机体产生自身修复物质，如本研究中探讨利用针刺激发机体自身产生神经营养因子GDNF来修复损伤的浦肯野细胞，用以寻求小脑萎缩性共济失调的治疗方法。这与药物相比，更加安全、经济，体现了一种人文主义关怀，具有长远的社会效益。 3.研究假说 通过针刺大鼠风池、风府、哑门，使GDNF免疫反应阳性细胞数增加，从而促进其对小脑皮质中萎缩的细胞，特别是浦肯野细胞的修复，达到防治小脑萎缩性共济失调的目的。
