交换作用进行分离的,其操作条件比较温和,可以有效地保持蛋白质的活性,并可延长膜的使用寿命,缺点是选择性较差。Sasagawat 等[22]先在中空纤维膜上接入环氧基团,然后通过亚硫酸钠接入SO3H基团,再与镁离子交联,制成阳离子交换膜,用于从蛋清中分离溶菌酶。以NaHCO3-NaOH 缓冲液为洗脱液,在pH 为9.0 时洗脱率达到100%。
4 反胶团萃取( reversed micellar extraction)
反胶团萃取是近年发展起来的一种新的萃取方法,它是利用有机溶剂中加入少量表面活性剂形成的反胶团来提取的方法,为一些不能使用有机溶剂萃取的酶和活性蛋白质等生物活性物质开拓了一种新的分离技术,扩大了有机溶剂萃取的适用范围[23]。 5 膨胀床吸附法
膨胀床吸附技术能直接从未经固液分离的生物产品料液中捕集目标产品,集固液分离、吸附纯化为一体,是一个过程集成的操作,可以直接从含有细胞或细胞碎片等固体颗粒的高粘度料液中分离纯化目标产物。天津大学的赵雪雁等人[24]研究了阳离子交换吸附剂Streamline SP 在膨胀床内的膨胀特性和流体力学性质,考察了Streamline SP对溶菌酶的吸附平衡和动力学特性,并从卵清蛋白溶液中分离纯化了溶菌酶。结果表明,通过Streamline SP 膨胀床一步分离纯化,溶菌酶活性收率达到86.6% ,纯化因子达到62.6。
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