第四章 药物的含量测定方法与验证
1、药物的含量：指药物中所含主成分的量，是评价药物质量的重要标准。 2、可供药物含量测定的分析方法： （1）容量分析法
①优点：操作简便，结果准确，方法耐用性高。 ②缺点：方法缺乏专属性。
③适用：适用于对结果准确度与精密度要求较高的样品的测定。 （2）光谱分析法
①优点：简便，快速，灵敏度高，并具有一定的准确度。 ②缺点：方法专属性稍差。
③适用：适用于对灵敏度要求较高、样本量较大的分析项目。 （3）色谱分析法
①优点：高灵敏度与高专属性，并具有一定的准确度。 ②缺点：结果计算需要对照品。
③适用：适用于对方法的专属性与灵敏度要求较高的复杂样品的含量测定。 3、为确保分析结果的可靠性，要求分析方法应准确、稳定、耐用。
4、验证内容包括：准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用
性。
§4-1 定量分析方法的分类与特点
一、容量分析法
容量分析法：也称滴定法。是将已知浓度的滴定液（标准物质溶液）由滴定管滴加到
被测药物的溶液中，直至滴定液与被测药物反应完全（通过适当方法指示），然后根据滴定液的浓度和被消耗的体积，按化学计量关系计算出被测药物的含量。
当滴定液与被测药物完全作用时，反应达到化学计量点。在进行容量分析时，当反应达到化学计量点时应停止滴定，并准确获取滴定液被消耗的体积。但在滴定过程中反应体系常常无外观现象的变化，必须借助适当的方法指示化学计量点的到达。其中，最常用的方法是借助指示剂的颜色或电子设备的电流或电压变化来判断化学计量点。指示剂的颜色或检测设备的电信号的突变点通常被称为滴定终点。但滴定终点与滴定反应的化学计量点不一定恰好符合，二者之差被称为滴定误差。滴定误差是容量分析法中系统误差的重要来源之一，为了减少滴定误差，要选用合适的指示剂或指示方法（如在非水溶液中常见用电位滴定法），使滴定终点尽可能的接近滴定反应的化学计量点。
（一）容量分析法的特点与适用范围 1、容量分析法的特点
（1）方法简便易行：本法所用仪器廉价易得，操作简便、快速。 （2）方法耐用性高：影响本法测定的试验条件与环境因素较少。
（3）测定结果准确：通常情况下本法的相对误差在0.2%以下，适用于对准确度要求较高的试样的分析。 （4）方法专属性差
2、容量分析法的适用范围
由于容量分析法具有以上特点，被广泛应用于化学原料药物的含量测定，而较少应用于药物制剂的含量测定。
（二）容量分析法的有关计算
1、滴定度：指每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测药物的质量。 《中国药典》用毫克（mg）表示。 2、滴定度的计算
被测物质分子（A）与滴定剂（B）进行反应
aA?bB?cC?dD
当反应完全时，被测药物的量（wA）与滴定剂的量（wB）
wAw?BaMAbMB wA?wBaa?aMA?nB??MA?mB?VB??MA bMBbbmB：滴定液浓度VB；：消耗的滴定液的体积滴定度T：单位体积（VB=1ml）的滴定液相当于被测药物的量。
awA?mB??MAb wA?T?VB
T：mg/ml不同药物的摩尔质量以及与滴定剂反应的摩尔比不同，同一滴定液对不同被测药物的滴定度是不同的。
T(mg/ml)?m?a?M bm：滴定液浓度；M：被测药物的毫摩尔质量[例1]用溴酸钾法测定异烟肼[M(C6H7N3O)=137.14]的含量时，溴酸钾滴定液的摩尔浓度为0.01667mol/L（以溴酸钾为单元），化学反应式如下
3C6H7N3O?2KBrO3?3C6H5NO2?3N2??2KBr?3H2O
3则滴定度T?0.01667??137.14?3.429mg/ml
23、含量的计算 （1）直接滴定法：
V?T?100% wV：滴定液的消耗体积；T：滴定度；w：供试品的称取量含量（%）?实际的滴定度（T′）=滴定度（T）×浓度校正因数（F） 实际的体积（V′）=滴定体积（V）×浓度校正因数（F）
F?实际摩尔浓度
规定摩尔浓度V?T?V??TV?T?F含量（%）??100%??100%??100%
www(2)间接滴定法
①生成物滴定法：指被测药物与化合物A作用，定量生成化合物B，再用滴定液滴
定化合物B。
该法的百分含量计算方法与直接滴定法相同，只是在计算滴定度时需考虑被测药物与化合物B以及化合物B与滴定剂三者之间的化学计量关系（摩尔比）。
[例2]葡萄糖酸锑钠的含量测定：取本品约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加水
100ml，盐酸15ml与碘化钾试液10ml，密塞，振摇后在暗处放置10分钟，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试液校正。每1ml硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于6.088mg的锑（Sb）。反应式：
Sb5??2I??Sb3??I2I2?2S2O32??2I?S4O6?2?
1mol锑与1mol碘化钾作用生成1mol碘单质，而1mol碘单质消耗2mol硫代硫酸钠。所以，硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）对葡萄糖酸锑钠（以Sb=121.76计算）的滴定度
a1T?m??M?0.1??121.76?6.088mg/mL
b2②剩余量滴定法：亦称回滴定法。先加入定量过量的滴定液A，使其与被测药物定量
反应，待反应完全后，再用另一滴定液B回滴定反应后剩余的滴定液A。在计算含量时，要考虑滴定过程中是否进行空白试验校正。
当不进行空白试验校正时：
含量（%）?(VA?FA?VB?FB)?TA?100%WVA：滴定液A的体积 VB：滴定液B在回滴定中被消耗的体积FA：滴定液A的浓度校正因数当进行空白试验校正时：
0S（VB-VB）?FB?TA含量（%）??100%W0VB：空白试验时消耗滴定液B的体积 SVB：样品测定时消耗滴定液B的体积W：供试品的称取量[例3]司可巴比妥钠的含量测定：取本品约0.1g，精密称定，置250ml碘瓶中，加水10ml，振摇使溶解，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml，再加盐酸5ml，立即密塞并振摇1分钟，在暗处放置15分钟后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。
已知：M=260.27；司可巴比妥钠与溴反应比为1:1；W=0.1022g；F（Na2S2O3）
=1.038；供试品滴定消耗硫代硫酸钠滴定液15.73ml；空白试验消耗硫代硫酸钠滴定液23.21ml。
计算：溴滴定液的滴定度[T（Br2）]及司可巴比妥含量。
1解：TBr2?0.05??260.27?13.01mg/mL1（V0?VS）Na2S2O3?FNa2S2O3?TBr2司可巴比妥%??100%
W（23.21?15.73）?1.038?13.01??100%?98.8%0.1022?1000二、光谱分析法
光谱：当物质吸收辐射能（或热能）后，其内部发生能级跃迁。记录由能级跃迁所产
生的辐射能随波长的变化所得到的图谱。
光谱分析法：利用物质的光谱进行定性、定量和结构分析的方法。 （一）紫外-可见风光光度法
紫外光区：波长为200-400nm；可见光区：波长为400-760nm 1、朗伯-比耳定律
单色光辐射穿过被测物质溶液时，在一定的浓度范围内被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层厚度（光路长度）成正比。
1?Ecl TA：吸光度；T：透光率；E：吸收系数；c：溶液浓度；l：液层厚度A?lgE通常采用百分吸收系数（E1 m）表示，其物理意义为：当待测溶液浓度为每100ml中还有待测药物1g（1%，g/ml），该液层厚度为1cm时的吸光度值。
计算出供试品含量：c(g/100ml)?A1%
E1cm2、方法特点与适用范围
（1）简便易行：本法使用的仪器价格较低廉，操作简单，易于普及。
（2）灵敏度高：本法灵敏度可达10-7—10-4g/mL，适用于低浓度试样分析。 （3）准确度较高：本法的相对误差约为2%—5%。 （4）专属性较差：
由于紫外-可见分光光度法具有以上特点，故本法较少应用于原料药的含量测定，可用于药物制剂的含量测定，但更多应用于药物制剂的定量检查，如片剂的溶出度或含量均匀度检查。 3、仪器校正和检定 （1）波长
仪器波长的允许误差为：紫外光区±1nm，500nm处±2nm。 （2）吸光度的准确度
可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。 （3）杂散光的检查 （4）对溶剂的要求
含有杂原子的有机溶剂，通常均具有很强的末端吸收。因此，当作溶剂使用时，它们的使用范围均不能小于截止使用波长。
当溶剂不纯时，也可能增加干扰吸收。因此，在测定供试品之前，应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求。 （5）测定法 ①对照品比较法
按各品种项下的方法，分别配制供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液中所含被
