老鹰茶虫酿茶营养成分及其提取物体外抗氧化作用研究 - 图文

两南大学硕。Ｉｊ学位论文３．２．４．１老鹰茶虫酿茶不同溶剂提取物制备水提取液：称取虫茶粉末１０９，加１００ｍＬ蒸馏水，室温浸泡过夜，滤取２０ｍＬ作为冷水提取液，剩余物在６０℃水浴中加热ｌｈ，过滤得热水提取液。乙醇提取液：称ｌ魄样品，力ｕＡ．５０一１００ｍＬ７，醇，水浴加热同流１ｈ，过滤得乙醇提取液。乙醚提取液：称取５９样品，ｊＪｌ５０ｍＬ７，醚，水浴回流２０ｍｉｎ，将滤液浓缩至５ｍＬ，即为乙醚提取液甲醇提取液：将乙醚提取过得滤渣，力１２０ｍＬ甲醇，水浴同流２０ｍｉｎ，趁热过滤即得甲醇提取液。３．２．４．２老鹰茶虫酿茶功能成分的定性分析方法以３．２．４．１各溶剂提取物按照下述实验步骤进行定性分析。（１）有机酸ｐＨ实验：用广泛ｐＨ试纸检查水捉液和乙醇提取液，如呈酸性，示含有游离的有机酸或酚性化合物。（２）酚类化合物、鞣质１％－－－氯化铁试剂：取样品液ｌｍＬ，溶液如为酸性，即直接检查：如为碱性，应加醋酸酸化后，再滴加此试剂１～２滴，显蓝、暗绿或蓝紫色，示含有酚类或鞣质。（３）糖、多糖和苷斐林试剂法：取水提取液ｌｍＬ，加入新配制的斐林试剂４＿５滴，在沸水浴中加热数分钟，如产生红棕色沉淀，示有还原糖。为了检查多糖和苷，另取水提液２ｍＬ，加斐林试剂ｌｍＬ，在沸水浴中加热１０ｍｉｎ，滤去沉淀，滤液加１０％盐酸酸化后，再加入过量的盐酸ｌｍＬ，于沸水浴上加热半小时，如有混悬物析出，表明可能是苷元，滤去沉淀。力ｎｌＯ％的氢氧化钠溶液使呈碱性，再加入斐林试剂，加热１０ｍｉｎ，如有红棕色沉淀，示有多糖或苷。（４）甾体氯仿．浓硫酸反应：取醇提液置蒸发皿中，于水浴锅上蒸干，残渣用ｌｍＬ氯仿饱和液溶解转入试管中，加浓硫酸ｌｍＬ，如氯仿层显红色或青色，硫酸层有绿色荧光，示含有甾体。（５）内酯、香豆素及其苷异羟肟酸铁反应：取乙醇提取液ｌｍＬ，加入盐酸羟胺的饱和乙醇液１０滴，氢氧化钠饱和乙醇液２０滴，加温至反应开始（有气泡产生），冷却后滴：Ｊ１５０％的盐酸使之呈弱酸性，滴：Ｊｉｌ％－－氯化铁溶液５滴，如显橙红色或紫色，示含有内酯、香豆素及其苷。（６）强心苷碱性苦味酸试剂（Ｂａｌｊｅｔ试剂）：取乙醇提取液ｌｍＬ，加入此试剂１滴（放置１５ｍｉｎ），呈橙色或橙红色，示含有强心苷。Ｂ锄ｅｔ试剂：甲液１％苦味酸水溶液；乙液１０％的氢氧化钠溶液，等量混合制得。（７）葸醌类化合物Ｂｏｍｔｒａｇｅｒ实验：取乙醇提取液１ｍＬ，加入１０％氢氧化钠溶液ｌｍＬ，如产生红色，示含有蒽类。（８）氰苷１２第３章老匿茶虫酿茶品质成分研究取中药粗粉０．２９，置于试管中，加入５％硫酸溶液３．５ｍＬ，摇匀，在试管口置一条浸过苦味酸钠盐的滤纸条，然后紧塞试管口，如纸条呈红色，示含有氰苷类。（９）生物碱（滤纸不要接触溶液），试管于沸水浴上加热十几分钟，碘化汞钾试剂（Ｍａｙｅｒ试剂）：取水提液ｌｍＬ力ｎ盐酸酸化，滴加此试剂，如有白色或淡黄色沉淀产生，示可能含有生物碱。Ｍａｙｅｒ试剂：氯化汞１．３６９和碘化钾５９各溶于２０ｍＬ水中，混合后加水稀释至１００ｍＬ。３．２．４．３老鹰茶虫酿茶一般营养成分分析．（１）水分：直接干燥’法【４１１（ＧＢ／Ｔ５００９．３－２００３）。（２）灰分：高温灼烧法重量法（ＧＢ厂ｒ５００９．４．２００３）。（３）粗蛋白质：凯式定氮法（ＧＢ厂ｒ５００９．２００３）。（４）脂肪：索式浸提法测定１４２１。（５）可溶性搪：葸酮比色法（ＧＢ／Ｔ６１９４．８６）。（６）水浸物：重鼍法（ＧＢ８３０５．８７）。（７）粗纤维：酸性洗涤法（Ｇａｆｆ８３１０．８７）。（８）矿物元素含量的测定：原子吸收光谱法。３．２．５数据处理按实验统计分析数据处理要求进行。对老鹰茶虫酿茶各指标的测定，测试３次，取其平均值，小数点后保留２位有效数字。３．３结果与分析３．３．１老鹰茶虫酿茶主要化学成分的初步定性按３．２．４．２的方法对老鹰茶虫酿茶进行初步定性实验，具体结果见表３一ｌ所示。由预试结果初步判断老鹰茶虫酿茶中可能含有显弱酸性的有机酸、酚及黄酮类，还有一定量的多糖和苷，多肽或蛋白质，甾体皂甙、内酯、香豆素及其苷，强心苷和生物碱。而葸醌类化合物及氰苷均为阴性反应，可初步判定老鹰茶虫酿茶中不含有该几类物质。３．３．２老鹰茶虫酿茶一般营养成分分析对老鹰茶虫酿茶的水分、灰分、蛋白质、纤维素、粗脂肪、可溶性总糖进行测试，并与老鹰茶、贵州绿茶相应成分的含量进行对比，结果见表３－２。由表３．２可以看出，与贵州绿茶相比，老鹰茶虫酿茶的蛋白质含量明显偏低，但纤维素和脂肪含量明显高于贵州绿茶与老鹰茶。值得一提的是老鹰茶虫酿茶不含可溶性糖，这可能是由于经过昆虫的胃肠道的复杂的生理过程而产生的结果。１３两南人学硕Ｉｊ学位论文表３．１老鹰茶虫酿茶化学成分初步定性分析结果Ｔａｂｌｅ３－１ＲｅｓｕｌｔｏｆｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｉｎｒｏｏｔｏｆＬａｏｙｉｎｇｉｎｓｅｃｔ－ｆｅｒｍｅｎｔｅｄｔｅａ注：－４－表示反应结果为阳性。即可能存在某种化合物；一表示反应结果为阴性，即不存在某种化合物，士表示现象不明显或无法确定。表３－２老鹰茶虫酿茶与其他茶一般营养成分的比较Ｔａｂｌｅ２ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｇｅｎｅｒａｌｎｕｔｒｉｔｉｏｎｏｎＬａｏｙｉｎｇｉｎｓｅｃｔ－ｆｅｒｍｅｎｔｅｄｔｅａａｎｄｏｔｈｅｒｔｅａ３．３．３老鹰茶虫酿茶的茶特征成分分析评定茶品质的特征指标主要有：茶多酚、咖啡碱和水浸出物等，水浸出物是茶汤浓度的评价指标，茶多酚是茶叶苦涩味感的特征，而咖啡碱是茶饮料具有兴奋提神作用的基础。经对老鹰茶虫酿茶的这些生化指标进行测试，结果列于表３．３。从表３．３看出，老鹰茶虫酿茶的水浸出物略低于贵州绿茶，与普通茶叶相当；咖啡碱含量１４第３章老匿茶虫酿茶品质成分研究极低，茶多酚含量较低，说明老鹰茶虫酿茶虽然具有茶叶的某些特征，可作茶用，但不能代替真正意义上的茶叶１４３１。但这对需要控制咖啡碱的人群或者不喜欢绿茶苦涩味感的人群来讲，老鹰茶虫酿茶不失为一种理想的饮料选择。表３－３老鹰茶虫酿茶与其他茶特征生化成分的比较（％）Ｔａｂｌｅ３－３ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｏｎＬａｏｙｉｎｇｉｎｓｅｃｔ－ｆｅｒｍｅｎｔｅｄｔｅａａｎｄｏｔｈｅｒｔｅａ（％）３．３．４老鹰茶虫酿茶的矿物质含量及组成分析对老鹰茶虫酿茶１１种矿物质元素进行了检测，结果列于表３－４。老鹰茶虫酿茶富含钾、镁、钙、磷、钠、铁、锌、锰、铜和铬等，其中，钾、钠、镁、铁、锌和铬含量高于遵义毛峰和都匀毛尖。表３－４老鹰茶虫酿茶与其他茶矿物质组成的比较Ｔａｂｌｅ３－４ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｍｉｎｅｒａｌｏｎＬａｏｙｉｎｇｉｎｓｅｃｔ－ｆｅｒｍｅｎｔｅｄｔｅａａｎｄｏｔｈｅｒｔｅａ茶名矿物质（ｍｇ／ｋｇ）钾钠可维持细胞内外液正常渗透压和体液酸碱平衡，蛋白质和碳水化合物的正常代谢依赖于钾钠的正常浓度，适宜的血浆钾浓度可维持心肌收缩运动的协调；钙是构成骨骼和牙齿的重要元素，还具有维持神经与肌肉活动，促进体内某些酶的活性，参与体内重要的生命活动等功能：镁是一种增强记忆力的元素，具有保护心脏，参与酶促反应和神经肌肉传递等作用；锌具有增进食欲，增强免疫力，促进组织生长发育与再生的功能；而常规食品包括常规１５