（1）直接滴定法：适用于原料药
（2）两步滴定法：①中和:氢氧化钠中和各种游离酸，阿司匹林成为钠盐②定量过量氢氧化钠，再用硫酸滴定 2.双相滴定法：苯甲酸钠可用酸滴定，将滴定过程中产生的苯甲酸不断萃取入有机溶剂中，降低苯甲酸在水相中的量，使滴定反应完全，终点易于判断。 3.标示量的计算 五、体内药物分析
血清中阿司匹林和水杨酸：高效液相法，十八烷基硅烷键合硅胶，反相色谱
第七章 芳香胺类药物的分析
一、芳胺类 1.性质
A.对氨基苯甲酸酯类药物——盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺 （1）芳伯氨基特性：重氮化-偶合反应 （2）水解：酯键（酰胺键），生成对氨基苯甲酸
（3）弱碱性：叔胺氮原子。①与生物碱沉淀剂作用②只能在非水溶液体系中滴定 B.酰胺类药物——对乙酰氨基酚、盐酸利多卡因 （1）水解后先芳伯氨基特性：芳酰胺基
（2）酚羟基特性：对乙酰氨基酚有酚羟基，与三氯化铁呈色 （3）弱碱性：利多卡因有叔胺氮原子，与三硝基苯酚生成沉淀
（4）与重金属离子沉淀：酰胺基上的氮与铜离子或钴离子生成有色配合物沉淀 2.鉴别试验
（1）重氮化-偶合反应—— 芳伯氨基或潜在芳伯氨基
①盐酸普鲁卡因 +稀盐酸,亚硝酸钠+碱性β-萘酚→猩红色沉淀 ②对乙酰氨基酚 +稀盐酸,亚硝酸钠+碱性β-萘酚→红色沉淀 （2）与三氯化铁反应：酚羟基+三氯化铁→蓝紫色 （3）与重金属离子反应
①盐酸利多卡因：芳酰胺+硫酸铜→蓝紫色配位化合物；+氯化钴→亮绿色沉淀 ②盐酸普鲁卡因胺：芳酰胺+过氧化氢→羟肟酸+三氯化铁→配合物
（4）水解产物反应：盐酸普鲁卡因+氢氧化钠→白色沉淀，加热→二乙胺基乙醇，红色石蕊试纸变蓝，+盐酸→白色沉淀，能溶于过量盐酸 3.特殊杂质检查
（1）对乙酰氨基酚：对氨基酚，+亚硝基铁氰化钠，比色法
（2）盐酸普鲁卡因注射液：对氨基苯甲酸，薄层色谱法，杂质对照品法 4.含量测定——亚硝酸钠滴定法p169 ★
（1）对象：测定结构中有芳伯氨基或水解后有芳伯氨基
（2）原理：芳伯氨基在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，用永停滴定法滴定。
（3）条件：①加入适量溴化钾，使重氮化反应速度加快；②加入过量盐酸加速反应（a.重氮化反应速度加快b.重氮盐在酸性溶液中稳定c.防止生成偶氮氨基化合物而影响测定结果）；③在室温下进行，低温反应太慢；④滴定速度要先快后慢
（4）指示终点：终点前，溶液中无亚硝酸，线路无电流通过，电流计指针指零；终点时溶液中有微量亚硝酸存在，电极即起氧化还原反应，线路中遂有电流通过，此时电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。 二、苯乙胺类——肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素
1.性质（1）弱碱性:仲胺氮（2）酚羟基特性（3）旋光性:手性碳 2.鉴别反应
（1）与三氯化铁反应
（2）与甲醛-硫酸反应（苯的鉴别试剂）：形成醌式有色化合物 3.特殊杂质检查：生产中易引入酮体，紫外分光光度法 4.含量测定：
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（1）非水滴定：+冰醋酸、醋酸汞（消除氢卤酸干扰），高氯酸滴定，结晶紫指示终点 （2）溴量法：盐酸去氧肾上腺素
第八章 杂环类药物的分析
一、吡啶类——异烟肼、尼可刹米 1.结构与性质p195
（1）弱碱性（2）还原性：酰肼基（3）UV特征吸收 2.鉴别试验
（1）吡啶环的开环反应
①戊烯二醛反应（koning反应）：尼可刹米+溴化氰,芳伯胺 ②二硝基氯苯反应（Vongerichten反应）：异烟肼+2,4-二硝基氯苯→紫红色 （2）酰肼基的反应
①还原反应：异烟肼+氨制硝酸银→银镜
②缩合反应：异烟肼+香草醛→异烟腙（黄色结晶）
（3）沉淀反应：与苦味酸、硫酸铜及硫氰酸铵、氯化汞等反应 （4）分解产物的反应：+氢氧化钠→臭味逸出，红色石蕊试纸变蓝 3.有关物质检查——异烟肼中的游离腈
（1）产生：可在合成工艺中由原料引入，又可在贮藏过程中降解而产生 （2）薄层色谱法：p200
以异丙醇-丙酮展开，以乙醇制对-二甲氨基苯甲醛显色，采用自身对照法，控制限量的计算。 二、喹啉类：绿奎宁反应p203 三、托烷类——硫酸阿托品
Vitaili反应：水解→+发烟硝酸→+氢氧化钾→深紫色 四、吩噻嗪类——盐酸氯丙嗪、盐酸异丙嗪 1.理化性质
（1）紫外:三吸收峰205nm、254nm、300nm（2）氧化呈色:二价硫（3）与金属离子配合呈色:钯离子 2.鉴别试验
（1）显色反应：被硫酸、硝酸、过氧化氢等氧化 （2）与钯离子配合显色：二价硫+钯离子→红色 五、苯并二氮杂卓类——地西泮、氯氮卓p219-220 1.鉴别试验
（1）沉淀反应：+碘化铋（碘化铋钾）→橙红色沉淀
（2）水解后呈芳伯胺反应：水解→+亚硝酸钠,碱性β-萘酚→橙红色沉淀 六、含量测定
1.非水溶液滴定法p224 ★
（1）原理：强酸（高氯酸）置换与有机弱碱结合的较弱酸 （2）方法：+高氯酸,冰醋酸，电位滴定，结晶紫作指示剂
（3）适用范围：用于pKb>8的有机弱碱性药物及其盐类的含量测定。pKb为8-10，选冰醋酸；pKb为10-12，选冰醋酸与醋酐；pKb>12，用醋酐。
（4）酸根的影响：加入定量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其生成在醋酸中难解离的卤化汞，以消除氢卤酸对滴定的干扰与不良影响。磷酸盐与有机酸盐，可以直接滴定；硫酸盐也可直接滴定，但滴定至其成为硫酸氢盐为止；硝酸盐，电位滴定法。
（5）应用：卤酸盐类药物、硫酸盐类药物、硝酸盐、磷酸盐与有机酸盐 2.酸性染料比色法p230 ★
（1）原理：碱性药物与氢离子结合成的阳离子+酸性染料解离成的阴离子→定量结合，生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对→有机溶剂定量萃取→特定波长测吸光度 （2）影响因素
①水相的pH：过低抑制酸性染料解离，过高有机碱药物呈游离态，均影响离子对形成
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②酸性染料种类：常用溴麝香草酚蓝、溴甲酚绿、甲基橙 ③有机溶剂种类：常用三氯甲烷、二氯甲烷
④有机相中的水分：萃取过程中，应严防水分混入有机相中
⑤酸性染料中的有色杂质：加供试品前先用有机溶剂萃取除去酸性染料中的有色杂质
第九章 维生素类药物的分析
一、维生素A
1.结构：全反式p244 2.鉴别试验
（1）三氯化锑（Carr-Price反应）
+饱和无水三氯化锑，无醇三氯甲烷溶液→显蓝色，渐变成紫红色（蓝色碳正离子） （2）紫外：脱水维生素A多一个共轭双键，最大吸收峰红移
（3）薄层色谱：硅胶G为吸附剂，环己烷-乙醚（非极性）为流动相。 3.含量测定——紫外（三点校正法）p246-252 ★★★
（1）原理：①杂质的无关吸收在310-340nm的波长范围内几乎呈一条直线，且随波长的增大吸光度下降；②物质对光吸收呈加和性的原理。
（2）测定方法——第一法（直接测定法，适用于纯度高的维生素A醋酸酯）p249-250 （3）测定方法——第二法（皂化法，适用于维生素A醇）p250-251 二、维生素B1 1.结构及性质p258
（1）硫色素反应：噻唑环在碱性介质中可开环，再与嘧啶环上的氨基环合，经铁氰化钾等氧化剂氧化成具有荧光的硫色素，后者溶于正丁醇中呈蓝色荧光。
（2）与生物碱沉淀试剂反应：如碘化汞钾、三硝基苯酚、碘溶液和硅钨酸等。 （3）氯化物的特性：维生素B1为盐酸盐，显氯化物的鉴别反应 2.鉴别试验
（1）硫色素反应：专属反应 碱性溶液+铁氰化钾→硫色素→溶于正丁醇→显蓝色荧光 （2）沉淀反应：与碘化汞钾、碘、硅钨酸、苦酮酸等。 （3）氯化物反应：与银离子生成沉淀。
（4）硝酸铅反应：+NaOH→硫化钠+硝酸铅→黑色沉淀 3.含量测定 ★
（1）非水滴定法p259
①原理：维生素B1中含有两个碱性已成盐的伯胺和季铵基团，在非水溶液中（在醋酸汞存在下），均可与高氯酸作用，根据消耗高氯酸的量即可计算维生素B1的含量。
②方法：+冰醋酸，+醋酸汞（消除盐酸干扰）+喹哪啶红-亚甲蓝混合指示剂，+高氯酸滴定 （2）硫色素荧光法p260
①原理：维生素B1在碱性溶液中被铁氰化钾氧化成硫色素，用异丁醇提取后，在紫外光（365nm）照射下呈现蓝色荧光（435nm），比较对照品荧光强度，即得供试品含量。 ②方法：p260-261 三、维生素C 1.性质p262
（1）溶解性:水中易容（2）酸性:烯二醇基（3）旋光性:2个手性碳（4）还原性: 烯二醇基具极强的还原性（5）水解性:内酯（6）糖类的性质（7）紫外:共轭双键 2.鉴别试验
（1）与硝酸银反应：产生黑色金属银沉淀
（2）与2,6-二氯靛酚反应：玫瑰红色（氧化性）→无色（还原型）
（3）与其他氧化剂反应：亚甲蓝、高锰酸钾、碱性酒石酸铜、磷钼酸等 （4）糖类的反应（了解）
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（5）紫外：243nm处有唯一的最大吸收
3.杂质检查：铜、铁离子，采用原子吸收分光光度法。 4.含量测定——碘量法★
（1）原理：维生素C在醋酸酸性条件下，可被碘定量氧化。根据消耗碘滴定液的体积，即可计算维生素C的含量。
（2）方法：+新沸过的冷水，稀醋酸，淀粉指示剂→溶液显蓝色并在30s内不褪。
（3）注意事项：稀醋酸使滴定在酸性溶液中进行；新沸过的冷水为减少水中溶解的氧对测定的影响；注射剂测定前加丙酮2ml，以消除抗氧剂亚硫酸氢钠的影响。 四、维生素E
1.结构与性质p273 α-异构体的生理活性最强
（1）溶解性：丙酮、乙醚等易溶，水中不溶（2）水解性：生成游离生育酚（α-生育酚）（3）氧化性：生成α-生育醌和α-生育酚二聚体（4）紫外：苯环的酚羟基 2.鉴别试验
（1）硝酸反应：+硝酸，水解→生育酚+硝酸→邻醌结构的生育红，显橙红色
（2）三氯化铁反应：水解→生育酚+三氯化铁→对-生育醌；还原生成的亚铁离子+联吡啶→血红色 3.杂质检查：生育酚，采用硫酸铈滴定法（铈量法） 4.含量测定：气相色谱 本书中唯一用GC测含量的药物 第十章 甾体激素类药物的分析
一、基本结构与分类
1.环戊环并多氢菲母核结构p283 2.肾上腺皮质激素：氢化可的松p283 3.雄性激素：甲睾酮p284 4.孕激素：黄体酮p285 5.雌性激素：雌二醇p286 二、鉴别反应★
1.与强酸的呈色反应：硫酸、盐酸、磷酸、高氯酸等 2.官能团的反应
（1）C17-α-醇酮基的呈色反应：α-醇酮基具有还原性，能与碱性酒石酸酮（裴林试液）、氨制硝酸银（多伦试液）以及四氮唑试液反应呈色
（2）酮基的呈色反应：与羰基试剂如2,4-二硝基苯肼、硫酸苯肼、异烟肼等反应 （3）甲酮基的呈色反应：黄体酮灵敏、专属的鉴别反应 与亚硝基铁氰化钠反应，黄体酮显蓝紫色，其他常用甾体激素呈淡橙色或不显色。 （4）酚羟基的呈色反应
（5）炔基的沉淀反应：+硝酸银→白色炔银沉淀 （6）卤素的反应 三、特殊杂质检查
1.有关物质：甾体激素药物多由其他甾体化合物经结构改造而来，有关物质主要是药物中存在的合成的起始物、中间体、副产物以及降解产物等。采用薄层色谱、HPLC等检查。
2.硒的检查：在生产工艺中需使用二氧化硒脱氢，在药物中可能引入杂质硒。 3.游离磷酸盐：某些特殊药物中可能有。 四、含量测定
1.高效液相p299：ODS柱（非极性），流动相为甲醇-水（极性）[反相色谱]
2.紫外：具有Δ4-3-酮基结构最大吸收峰在240nm附近，雌激素具有苯环在280nm附近。 3.比色法p301★
（1）四氮唑比色法：用于皮质激素药物。第一类 有红四氮唑、蓝四氮唑两种，利用C17-α-醇酮基的还原性。 （2）异烟肼比色法：前三类
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