13．下列有关连接反应的叙述，错误的是 【 】 Ａ： 连接反应的最佳温度为 37 ℃；
Ｂ： 连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于 10%； Ｃ： 连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mM； Ｄ： 连接酶通常应过量 2-5 倍； Ｅ： DTT 可以维持连接酶的结构。 14．提高重组率的方法包括 【 】
I： 加大外源 DNA 与载体的分子之比；II： 载体分子除5?端磷酸基；III： 连接酶过量；IV 延长连接反应时间 Ａ： I + II； Ｂ： I + II + III； Ｃ： I + III + IV； Ｄ： II + III + IV； Ｅ： I + II + III + IV。 15．载体的功能是 【 】
I：运送外源基因高效进入受体细胞；II：为外源基因提供复制能力；III：为外源基因提供整合能力。 Ａ： I； Ｂ： I + II； Ｃ： I + III； Ｄ： II + III； Ｅ： I + II + III。
16．下列有关质粒分子生物学的叙述，错误的是 【 】 Ａ： 质粒是共价环状的双链 DNA 分子；
Ｂ： 天然质粒一般不含有限制性内切酶的识别序列； Ｃ： 质粒在宿主细胞内能独立于染色体 DNA 自主复制； Ｄ： 松弛复制型的质粒可用氯霉素扩增； Ｅ： 质粒并非其宿主细胞生长所必需。 17．带有多个不同种复制起始区的质粒是 【 】 Ａ： 穿梭质粒； Ｂ： 表达质粒； Ｃ： 探针质粒； Ｄ： 整合质粒； Ｅ： 多拷贝质粒。
18．多聚接头（ Polylinker ）指的是【 】
Ａ： 含有多种限制性内切酶识别及切割顺序的人工 DNA 片段； Ｂ： 含有多种复制起始区的人工 DNA 片段； Ｃ： 含有多种 SD 顺序的人工 DNA 片段； Ｄ： 含有多种启动基因的人工 DNA 片段； Ｅ： 含有多种特定密码子的人工 DNA 片段。
19．?-DNA 体外包装的上下限是天然? -DNA 长度的 【 】 Ａ： 25 - 50 % ； Ｂ： 50 - 100 %； Ｃ： 75 - 100 %； Ｄ： 75 - 105 %； Ｅ： 100 - 125 %。
20．考斯质粒（cosmid）是一种【 】 Ａ： 天然质粒载体；
Ｂ： 由?-DNA 的 cos 区与一质粒重组而成的载体； Ｃ： 能裂解受体细胞的烈性载体； Ｄ： 具有溶原性质的载体；
Ｅ： 能在受体细胞内复制并包装的载体。
21．下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是 【 】 Ａ： Cosmid >?-DNA > Plasmid； Ｂ： ?-DNA > Cosmid > Plasmid； Ｃ： Plasmid >?-DNA > Cosmid； Ｄ： Cosmid > Plasmid >? -DNA； Ｅ： ?-DNA > Plasmid > Cosmid。
22．目前在植物基因工程中广泛使用的载体是 【 】 Ａ： 质粒 DNA； Ｂ： 噬菌体 DNA； Ｃ： 病毒 DNA； Ｄ： 线粒体 DNA； Ｅ： 叶绿体 DNA。
23． 促红细胞生长素（ EPO ）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为 【 】 Ａ： 人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用； Ｂ： 人的促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定；
Ｃ： 大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活； Ｄ： 人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感； Ｅ： 大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化。 24．克隆菌扩增的目的是 【 】
I： 增殖外源基因拷贝； II： 表达标记基因； III： 表达外源基因。 Ａ： I； Ｂ： I + II； Ｃ： I + III； Ｄ： II + III； Ｅ： I + II + III。
25．载体质粒 pBR322 共有两个选择性标记： Ap r 、 Tc r。它们分别含有一个单一酶切位点： Pst I 、 Sph I。若将一外源基因插入Ap r中的Pst I位点，那么用于转化子和重组子筛选的抗生素使用方法应是 【 】 Ａ： 只在Ap上筛选； Ｂ： 只在Tc上筛选；
Ｃ： 先在Ap上筛选，阳性菌再接种到Tc上； Ｄ： 先在Tc上筛选，阳性菌再接种到Ap上； Ｅ： Ap + Tc上一次性筛选。
26．若某质粒带有?互补的 lacZ? 标记基因，那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入显色底物为【 】 Ａ： 半乳糖； Ｂ： 葡萄糖； Ｃ： 蔗糖；
Ｄ： 5-溴-4-氯-3-吲哚基- ?-D-半乳糖苷（ X-gal ）； Ｅ： 异丙基巯基-?-半乳糖苷（ IPTG ）。
27．下列载体常用选择性标记中属于营养缺陷型的是 【 】 Ａ： ts； Ｂ： Ap r； Ｃ： lac Z? ； Ｄ： Tc r； Ｅ： Trp –。
28．下列各组专业术语中，含义最为接近的是 【 】 Ａ： 终止子与终止密码子； Ｂ： 基因表达与基因重组； Ｃ： DNA 退火与 DNA 复性； Ｄ： 转化与转染； Ｅ： 重组子与转化子。
29．核酸分子杂交的化学原理是形成 【 】 Ａ： 共价键； Ｂ： 离子键； Ｃ： 疏水键； Ｄ： 配位键； Ｅ： 氢键。
30．下列三种探针同位素标记法中，必须使用?- 32 P-dNTP 的是 【 】 Ａ： 缺口平移标记； Ｂ： DNA 5? 末端激酶标记； Ｃ： 反转录标记； Ｄ： 随机引物标记； Ｅ： DNA 3? 标记。
31．Subcloning（亚克隆） 法一般用于 【 】 Ａ： 基因杂交； Ｂ： 基因作图； Ｃ： 基因表达； Ｄ： 基因调控； Ｅ： 基因诱变。
32．双脱氧末端终止法测定 DNA 序列是基于 【 】 Ａ： DNA 的聚合反应； Ｂ： DNA 的连接反应； Ｃ： DNA 的降解反应； Ｄ： 特殊的 DNA 连接酶； Ｅ： 聚合单体 2' 和 5' 位的脱氧。
33．多项研究结果表明，苍蝇体内存在一种新型高效广谱抗菌蛋白。为克隆其基因，最快速有效的筛选方法是 【 】 Ａ： 噬菌斑模型； Ｂ： 透明圈模型； Ｃ： 颜色反应模型； Ｄ： 免疫杂交模型； Ｅ： 凝胶电泳模型。
34．下列三种方法中，能有效区分重组子与非重组子的是 【 】 I：限制性酶切；II：PCR 扩增；III：抗药性筛选。 Ａ： I； Ｂ： I + II； Ｃ： I + III； Ｄ： II + III； Ｅ： I + II + III。
35．下列能区分期望重组子的筛选方法是 【 】 Ａ： 抗药性 筛选法； Ｂ： 营养缺陷 筛选法； Ｃ： 显色 筛选法； Ｄ： 次级克隆法； Ｅ： 菌落原位杂交法。
36．鸟枪法克隆目的基因的战略适用于 【 】 Ａ： 原核细菌； Ｂ： 酵母菌； Ｃ： 丝状真菌； Ｄ： 植物； Ｅ： 人类。
37．鸟枪法克隆目的基因的第一步是随机或非随机切割外源 DNA ，其方法有 【 】
I：超声波处理；II：酶解；III：机械搅拌。 Ａ： III； Ｂ： I + II； Ｃ： I + III； Ｄ： II + III； Ｅ： I + II + III。
38．mRNA 分离纯化技术的关键是【 】 Ａ： 细胞的温和破碎；
Ｂ： 分离系统中不得含有痕量的 SDS； Ｃ： 高离子强度缓冲液的使用； Ｄ： 密度梯度超离心； Ｅ： 严防核酸酶的降解。
39．cDNA 第一链合成所需的引物是 【 】 Ａ： Poly A； Ｂ： Poly C； Ｃ： Poly G； Ｄ： Poly T； Ｅ： 发夹结构。
40．离体cDNA 合成中所涉及的三种工具酶是 【 】
I：限制性内切酶；II：Klenow 聚合酶； III：RNase H；IV：Bal31 核酸酶；V：反转录酶。 Ａ： I + II + III； Ｂ： I + III + IV； Ｃ： II + III + IV； Ｄ： II + III + V； Ｅ： III + IV + V。
41．cDNA 法获得目的基因的优点是【 】 Ａ： 成功率高； Ｂ： 不含内含子； Ｃ： 操作简便； Ｄ： 表达产物可以分泌； Ｅ： 能纠正密码子的偏爱性。
42．Taq DNA 聚合酶的发现使得 PCR 技术的广泛运用成为可能，这是因为 【 】 Ａ：Taq DNA 聚合酶能有效地变性基因扩增产物； Ｂ：Taq DNA 聚合酶催化的聚和反应不需要引物； Ｃ：Taq DNA 聚合酶具有极强的聚和活性；
Ｄ：Taq DNA 聚合酶能耐受高温，使多轮扩增反应连续化； Ｅ：Taq DNA 聚合酶能使扩增反应在 DNA 变性条件下进行。
43．为了利用 PCR 技术扩增下列染色体 DNA 片段上的部分区段，从下列四种寡核苷酸中应选用的一对引物是 【 】
Ａ：I + II； Ｂ：I + III； Ｃ：I + IV； Ｄ：II + III；
