合作考试 沉着应考 坚决违纪 浙江大学2008–2009学年夏学期 《 医学生物化学实验 》课程期末考试试卷 开课学院： 医学院 ，考试形式： 开 卷，允许带__女友_________入场 考试时间： 2009 年 6 月 27 日,所需时间： 60 分钟 考生姓名： _____学号： 专业： ______ 考生承诺：“我确认本次考试是完全通过5个人以上的努力完成的。” 考生签名： 题序 得分 评卷人 一 二 三 四 五 六 七 八 总 分 * 理论考试占总成绩60％，平时实验成绩占总成绩40％。 一、 多项选择题 （每个2分，共20分） 1. 下列方法中哪一种不能将谷氨酸和赖氨酸分开? A．电泳 B．阴离子交换层析 C．阳离子交换层析 D．凝胶过滤 2. 在什么情况下，一种蛋白质在电泳时既不向正级移动，也不向负极移动，而停留在原点？ A．发生蛋白质变性 B．电极缓冲液的pH正好与该蛋白质的pI相同 C．电极缓冲液的pH大于该蛋白质的pI D．电极缓冲液的pH小于该蛋白质的pI 3. 可用于蛋白质分子量测定的方法包括 A: SDS－PAGE B: 亲和色谱 C: 排阻色谱 D: 透析 4.分离纯化中可用于物质浓缩的方法包括 A. 沉淀； B. 吸附 C. 超滤 D透析. 5. 用于分离纯化时其方法的原理与被分离物质的分子量有关的是 A.SDS-PAGE B.离子交换色谱 C. 超滤 D 抽提 6. 影响电泳的外界因素有： A.电泳介质的pH值 B.电场强度 C.缓冲溶液的离子强度 D.电渗作用 7. 聚丙烯酰胺凝胶电泳具有下列哪些效应： A.浓缩效应 B 电荷效应 C 分子筛效应 D 扩散作用 8. 提取核酸的方法有：
A 苯酚法 B 氯仿-异戊醇法 C SDS法 D 核酸酶法 9. 血清醋酸纤薄膜电泳结果的条带包括下列哪些蛋白：
A 白蛋白 B α2-球蛋白 C γ-球蛋白 D β -球蛋白 10.测定核酸含量的方法有：
A 定磷法 B 定糖法 C紫外分光光度法 D定碳法
二、 单选题 （每个1分，共20分） 1.
紫外法定量检测核酸选用的波长是
A. 260nm B.280nm C.254nm D.230nm 1.
下列不是用于蛋白质定量测定的方法是
A.福林－酚法 B.考马斯亮蓝法 C.定磷法 D.双缩脲法 1.
下列方法与免疫学原理没有关系的是
.A.蛋白印迹技术 B.ELISA C.亲和色谱 D 超滤 1.
考马斯亮兰能与蛋白质的哪个区域相结合？
A 疏水区 B亲水区 C 肽键 D羧基末端 1.
在DNA提取过程中，沉淀DNA用
A 无水乙醇 B 乙醚 C 氯仿 D 戊醇 6． SDS-PAGE时其迁移速率主要取决于蛋白质的
A 带电性 B 相对分子量 C 分子形状 D 生物活性 7．聚丙烯酰胺凝胶制备过程中使用的催化剂是
A TEMED B SDS C 过硫酸铵 D Tris-HCl 8．脂类薄层层析中使用的显色剂是
A 茚三酮 B考马斯亮兰 C 磷钨酸 D 磷钼酸 9．离子交换层析分离混合氨基酸时，洗脱天冬氨酸用 A pH 5.0, 0.1M 柠檬酸缓冲液 B 0.1M NaOH溶液 C 2M HCl溶液 D pH 2.2,0.1M柠檬酸缓冲液 10．凝集素的制备过程中，洗脱凝集素用
A.NaCl溶液 B.葡萄糖溶液 C.蒸馏水 D. 磷酸缓冲液 11. 下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时最先被洗脱的是
A．马肝过氧化氢酶（分子量247,500） B．肌红蛋白（分子量16,900） C．血清清蛋白（分子量68,500） D．牛b-乳球蛋白（分子量35,000）
12. 有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的pI分别为4.6、5.0、5.3、6.7、7.3，电泳时欲使其中四种泳向正极，缓冲液的pH应是多少
A．4.0 B．5.0 C．6.0 D．7.0 13. 从组织提取液沉淀活性蛋白而又不使之变性的方法是加入 A．硫酸铵 B．三氯醋酸 C．氯化汞 D．1mol/L HCL
14. 一酶促反应，1/V对1/[S]作图得一直线，在某一抑制剂存在时，得到第二条直线，它在1/[S]轴上与第一条直线相交。这说明： A．该抑制是不可逆抑制 B．该抑制属非竞争性抑制
C．S和I（抑制剂）对酶分子的同一部分都有亲和力 D．如增加[S]，该抑制作用可被解除 15.有机溶剂沉淀蛋白质的基本原理是：
A.改变蛋白质的带电性 B.破坏蛋白质表面的水化层 C.改变蛋白质的一级结构 D.改变蛋白质的空间结构
16. Lowry法测定蛋白质时，Folin-酚试剂能与蛋白质分子中哪一项起反应？ A.羧基 B.氨基 C.肽键 D.巯基
17. 在酚/氯仿法提取DNA过程中，苯酚的主要作用是： A.使蛋白质变性 B.使RNA变性 C.提取脂类 D.提取糖类
18. 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳时，薄膜在电泳槽中的正确放置应该是： A.点样端朝负极，粗糙面向上 B.点样端朝负极，粗糙面向下 C.点样端朝正极，粗糙面向上 D.点样端朝正极，粗糙面向上 19. 测定酶的Km 及Vmax值时，1/Vo 对1/[S]作图，横坐标截距表示： A.1/Vmax B. Vmax C.-1/Km D.-Km
20. 纸层析法分离氨基酸时，固定相是：
A.滤纸 B.吸附在滤纸上的水分 C.酚 D.正丁醇
三、 是非题 （每个1分，共20分） 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19.
在进行大分子分离纯化时，杂质是含量最高的那些组分，所以要去除。 吸附色谱是分离生物大分子常用到的色谱方法。
抽提液中加入蔗糖、甘油、巯基乙醇等物质是为了改变溶液的极性。 核酸抽提中加入SDS、Triton X-100、Tween40有利于使膜蛋白和脂肪溶解。 沉淀法是将所需要的成分沉淀下来从而使其与杂质分离。 应用密度梯度离心技术可以将粗面内质网和滑面内质网彼此分离。 超速离心是指离心力达到100,000 g 的离心。 冷冻及抽真空装置是每台离心机必须具备的。 电泳法测定蛋白质分子量是一种最准确的方法。 亲和色谱法是一种分离效果最好的极为理想的色谱方法。 用透析袋进行脱盐处理比用凝胶过滤法快而且样品损失少。 盐析法最常用的盐是硫酸铵。
双向凝胶电泳方法是进行蛋白质组学研究的最理想的技术。 蛋白质分离纯化中最简便而且专一的检测方法是测定UV280。
同时采用用SDS-PAGE和凝胶过滤方法进行蛋白质分子量测定可以得到可靠结果。 DNP和 RNP都能溶于1-2M的NaCl溶液中。
用260nm进行紫外分光光度测定，可以测出DNA的含量和纯度。 在纸层析过程中，谷氨酸的迁移速率比丙氨酸快。
从酶反应的进程曲线上，可以求出酶反应初速率的时间范围。
20． 凝集素能与细胞膜上的磷脂相结合。
