时以内采集2-5个样本，一般就足以获得药物的峰浓度。FDA对试验整体数据的分析中一般不纳入由于早期样本（给药后5-15分钟之内采集的样本）未采集而导致的首个样本为Cmax的受试者的数据。 （四）含酒精饮料对非常释制剂的影响
饮用含酒精的饮料会影响药物自非常释制剂中释放。酒精会改变药物释放特性，导致药物过快释放，并改变药物体内暴露量，进而影响药物的安全性和有效性。
FDA建议研发缓释固体口服制剂的申办者进行体外研究，用以评价药物在体内酒精环境中出现药物突释的可能性。应考察药物在不同浓度的酒精溶媒中的释放情况。某些特定情况下可能需要进行体内药物与酒同服时的生物等效性研究。可参考FDA个药的相关指导原则以获取更多信息。 （五）内源性化合物
内源性化合物是指体内产生或饮食中含有的化合物。体内的与从药物中摄入的化合物相同，很难准确定量有多少药物自制剂中释放并被每个个体吸收。建议先估算内源性化合物在血中（血浆中）的基线值，再从给药后测得的每个人的总血药浓度中减去这一基线值，依次估算自药物释放的真实药量。因内源性化合物来源不同，生物等效性研究方法可能有所不同：
√ 由机体产生：建议给药前根据药代动力学特征多点测定基线值，从给药后的血药浓度中减去相应的基线值。
√ 来源于食物：建议试验前及试验过程中严格控制该化合物自饮食摄入。受试者应自试验前即进入研究中心，统一标准化饮食，控制餐饮中内源性化合物的量与正式试验相当。
有些内源性化合物的基线值可能是周期特异性（period specific），此时建议每个试验周期均采集基线值。若经过基线校正后血药浓度出现负值，则以零计。校正前和校正后的数据应分别进行药代动力学参数计算和统计分析。采用校正后的数据进行生物等效性评价。 （六）口服给药局部作用的药物
对于在胃肠道内局部发挥作用的药物，有时也可以用药代动力学方法评价生物等效性，有时则需用临床指征或药效指标，甚至设计实施较好的体外试验来作为补充或替代评价方法。详情可参考个别具体药物的相关指导原则。
（七）体外溶出试验
有关溶出试验方法的开发、质量标准的建立及溶出试验方法的应用方面的指导原则详见： √ Dissolution Testing of Immediate Release Solid Oral Dosage Forms
√ Extended Release Oral Dosage Forms: Development, Evaluation, and Application of In Vitro/In Vivo Correlations 1．常释制剂
建议申办者采用美国药典（USP）药物各论中阐述的方法。如USP中没有相应的方法，建议采用FDA推荐的方法，并要求其符合USP总论对溶出试验的要求。详见以下网址：
http://www.accessdata.fda.gov/scripts/cder/dissolution/index.cfm. 如果自建新方法，需提供以下信息： √ 药物在不同pH条件下的溶解度曲线
√ 在不同搅拌条件下获得溶出曲线（如篮法100-150rpm，或桨法50-100rpm）
√ 在至少3种溶出介质中获得的所有规格制剂的溶出曲线（如pH1.2, 4.5和6.8缓冲液）。水可以作为额外的溶出介质。难溶药物可适当加入表面活性剂。 2．非常释制剂
建议申办者采用美国药典（USP）药物各论中阐述的方法。如USP各论中没有相应的方法，建议采用FDA推荐的方法（见上述网址），或自建方法。此外，建议依照USP总论或FDA关于溶出度的要求提交上述三种条件（如pH1.2, 4.5缓冲液和6.8缓冲液）下的溶出曲线。若采用USP和FDA推荐方法以外的自建方法，建议将USP和FDA方法与自建方法结果做比较。
申办方应选择不同搅拌速度和介质，纳入各种体内体外影响因素，使方法具有足够的区分能力。 建议非常释制剂采用近期生产的三个批次参比制剂进行溶出试验，建立质量标准。 附件：一般试验设计和数据处理原则
建议重复和非重复设计的生物等效性试验均采用如下设计原则，可做个别的参数调整。 1.试验的实施
√ 在空腹状态下用8盎司（240mL）水送服受试制剂和参比制剂（餐后等效性试验除外）
√ 餐后等效性试验：试验前夜至少空腹10小时，试验日给药前30分钟时开始进食标准餐。受试者应在30分钟内用餐完毕，并在开始进餐时间的30分钟后准时服用试验药，用8盎司（240mL）水送服。 √ 服药后4小时内禁食。服药前1小时至服药后1小时内禁止饮水，其他时间自由饮水。每个试验周期受试者应在相同的特定时间点用标准餐。
√ 通常最高规格的制剂可以一个单位（单片或单粒）服用，如需获得足够的生物分析灵敏度，在安全性允许的条件下，在说明书服药总量范围内可同时服用多片/粒最高规格制剂。 √ 试验周期之间应有足够长的洗脱期（待测物5倍半衰期以上）。
√ 应说明受试制剂和参比制剂的批号、参比制剂的有效期等信息。建议受试制剂药物含量与参比制剂药物含量差值小于5%。申办者应提供受试制剂和参比制剂的组成说明，尽可能提供二者成分一一对比的资料。试验资料等应保存至试验后5年。详见Handling and Retention of Bioavailability and Bioequivalence Testing Samples。
√ 对受试者的要求：（1）服药前1小时至服药后1小时内禁止饮水，其他时间自由饮水。（2）提供标准餐的时间不早于服药后4小时。（3）每个试验周期开始之前24小时至该试验周期最后一个采样完成之间禁止酒精摄入。
2．餐后生物等效性研究的标准餐组成
建议采用对胃肠道生理功能和药物生物利用度影响大的餐饮进行餐后生物等效性研究，如高脂（提供食物中约50%的热量）高热（约800-1000卡路里）饮食。其中蛋白质约150卡路里，碳水化合物约250卡路里，脂肪约500-600卡路里。报告中应提供试验标准餐的热量分析说明。 3.样本采集
通常建议采集血样，而非尿样或组织样本。多数情况下检测血清或血浆中的药物或其代谢物。有时分析全血样本。
建议恰当地选择样本采集时间，使其包含吸收、分布、消除相。一般建议每位受试者每个试验周期采集12-18个样本，其中包括给药前的样本。采样时间不短于3个半衰期。根据药物特性和药物摄入的速率来确定样本采集的具体时间，要求应能准确估计最大血药浓度（Cmax）和消除速率常数（Kel）。末端消除相应至少采集3-4个样本以确保准确估算末端斜率（λz）。实际服药和采样时间与计划时间可能有偏差，建议采用实际时间进行药代参数计算。 4．给药前血药浓度不为零
如果给药前血样的浓度小于Cmax的5%，则该受试者的数据可以不经校正而直接参与药代数据计算和统计分析。如果给药前血样浓度大于Cmax的5%，则建议剔除该受试者的数据。 5．因出现呕吐而剔除数据
如果受试者服用常释制剂后，在Tmax中位数值两倍的时间以内发生呕吐，建议剔除该受试者的数据。对于服用非常释制剂的受试者，如果在服药后短于服药间隔的时间内发生呕吐，也建议剔除该受试者的数据。 6．建议报告中提交的药代动力学数据： √ 血药浓度和采血时间点
● 受试者（subject）、周期（period）、次序（sequence）、治疗组（treatment） ● 单次给药：AUC0-t、AUC0-inf、Cmax、Tmax、Kel和 t1/2 ● 受试者个体间、个体内和/或总的变异（如果有）
● 稳态生物等效性研究：AUC0-tau 、Cmaxss、Cminss(给药间隔末的浓度)、Cavss (一个给药间隔的平均浓度)，以及反映波动程度的参数 [(Cmax-Cmin)/Cavss]和 [(Cmaxss-Cminss)/Cminss]。 7．统计学参数
建议提供AUC0-t、AUC0-inf、Cmax对数转换的数据，以及以下数据：几何均数、算术均数、几何均值的比值和90%置信区间。 8．置信区间有效位数保留
置信区间(CI)的数值要保留足够的有效位数。要达到80%到125%的标准，CI的数值不得低于80.00%，且不超过125.00%。
备注
