生物技术：有机体的草所和应用有机体生产有用物质，改善人类生存环境的技术。
初级分离：从菌体发酵液，细胞培养液，胞内提取物及其他各种生物原料初步提取目标产物，使目标产物
得到浓缩的初步分离和初步分离的下游加工过程。
等电点沉淀：利用蛋白质在PH值等电点的溶液中溶解度下降的原理进行沉淀分级的方法。
泡沫分离：根据表面吸附的原理，利用通气鼓泡在液相中形成的气泡为载体对液相中的溶质或颗粒进行分
离。
色谱：根据混合物中的溶质在两相之间分配行为的差别引起的随流动相移动速度的不同进行分离的方法。 离子交换色谱: 利用离子交换机为固定相，是根据荷电溶质与离子交换剂之间静电互相作用力的差别进行
溶质分离的洗脱色谱法。
二维电泳：同时利用分子尺寸和等电点这两种性质的差别进行蛋白质等生物大分子的分离，即将普通凝胶
电泳和IEF相结合，是溶质在二维平面上得到分离。
结晶：从液相或气相生成形状一定，分子（或原子，离子）有规律排列的晶体的现象。 生物分离的特点？ 答：（1）生物物质的生物活性大多是在生物体内的温和条件下维持并发挥作用的，当遇到高温，PH值的
改变以及某些化学药物存在等周围环境的急剧变化时极不稳定，容易发生活性降低甚至丧失。 （2）用作医药，视频和化妆品的生物产物与人类息息相关。因此，要求分离纯化过程必须除去原料液中含有的热原及具有免疫原性的异体蛋白质等有害人类健康的物质。
（3）原料液中常存在与目标分子在结构，构成成分等理化性质上极其相似的分子及异构体，形成用常法难于分离的混合物，因此，一般需要利用具有高度选择性的分子识别技术或高压液相色谱技术纯化目标产物。
（4）原料液中目标产物的浓度一般比较低，有时甚至是极微量的，因此，往往需要从庞大体积的原料液中分离纯化目标产物，即需要对原料液进行高度浓缩。 在选择盐析的无机盐时，对盐的要求？ 答：（1）各种盐的盐析效果
（2）溶解度大，能配置高离子强度的盐浓度
（3）溶解度受温度的影响小，便于在低温下进行演习操作 （4）盐溶液密度不高，以便蛋白质沉淀的沉降或离心分离 生物分离时对膜的要求？ 答：（1）起过滤作用的有效膜厚度小，超滤和微滤膜的开孔率高，过滤阻力小。 （2）膜材料有惰性，不吸附溶质，从而使膜不易污染，膜孔不易堵塞。
（3）适用的PH值和温度范围广，耐高温灭菌，耐酸碱洗涤剂，稳定性高，使用寿命长。 （4）容易通过洗涤恢复通透性。 （5）满足实现分离目的的各种要求。 错流过滤法的优势？ 答：1透过通量大；
2.滤液清净，菌体回收率高；
3.不添加助滤剂或絮凝剂，回收的菌体纯净，有利于进一步分离操作 4.适于大规模连续操作；
5.易于进行无菌操作，防止杂菌污染。 渐进模型基于的假设条件？？ 答：（1）内水相液滴在液膜内呈均匀分布
（2）外水相溶质透过液膜，立即与内水相发生瞬间不可逆反应，内水相液滴中的反应试剂从W/O液滴的外层向中心逐渐反应完全
（3）完全反应区与未反应区之间有明显的分界面，此分界面称反应前沿 （4）膜外传质阻力忽略不计，不考虑膜破裂
（5）反应完全区内同一半径距离上，膜相与内水相的溶质浓度相等。 超临界萃取的优点？
答：（1）萃取速度高于液相萃取，特别适合于固体物质的分离萃取。
（2）在接近室温的条件下操作，能耗低于一般的精馏法，适于热敏性物质和易氧化物质的分离。 （3）传热速率快，温度易于控制。
（4）适合于非挥发性物质的分离。 膨胀床吸附介质的要求？ 答：（1）有一定的粒径或密度分布
（2）吸附剂的尺寸和密度应保证其终端流速与料液中需除去的固定颗粒间有明显的差异 （3）吸附剂应具有良好的孔道结构，不易被料液中的脂类，核酸和杂蛋白等生物物质所污染
（4）吸附剂应具有活性基团，可以修饰吸附目标产物的配基，并且对目标产物具有较高的吸附容量 （5）吸附剂应具有较高化学稳定性和良好机械强度，保证吸附剂可以承受苛刻的原位清洗条件，使用寿命长
（6）吸附剂应具有良好的传质性能，在较高的流速下，可以保持较高的吸附量 凝胶过滤色谱介质的要求？ 答：（1）亲水性大，表面介质惰性，即介质与溶质之间不发生任何化学或物理相互作用。
（2）化学稳定性高，在较宽的PH值和离子强度范围以及化学试剂中保持稳定，使用寿命长。 （3）具有一定的孔径分布范围。 （4）具有良好的机械强度。，允许较高的操作压力。 1.置换色谱的优势和局限？
优势（1）与一般的洗脱色谱经常出现脱尾现象相比，置换列中各溶质区带的边界陡直，因此置换色谱的分辨率高
（2）置换色谱具有浓缩作用，并可以通过调节置换剂浓度控制分离产品的浓度，处理量大，并且特别适用于处理稀料液
（3）置换列中各组分区带紧密相连，色谱柱利用率高，流动相用量少
（4）与亲和色谱专一性纯化单一目标产物相比，置换色谱同时实现多个目标产物的分离纯化，适于含有
多个目标产物的料液的分离。 局限：（1）置换列的检测与控制比较困难置换列中浓缩的组分区带紧密相连，离开色谱柱后容易发生混合，
因此不能进行在线分析，需要在色谱柱出口直接分取样品进行离线分析
（2）置换列中各高度浓缩的组分紧密相连，需要较高分效率，因此，一般置换色谱使用的吸附剂粒径较
小，并需在较低的流速下操作，减少激波层区带间的混合。
（3）置换色谱为经典的非线性色谱，其过程理论和模拟放大方法有待进一步发展。 （4）置换剂的选择和开发是限制置换色谱发展的主要技术问题，这一点还有待于拓展
一、选择题：
1、生物分离过程的一般步骤包括___D____。
A、 预处理和固液分离 B、 初步纯化 C、 高度纯化和成品加工 D、A，B和C
2、生物悬浮液常用的预处理方法有： ____D_____。
A、加热法 B、 调节悬浮液的pH值的大小 C、凝聚和絮凝 D、A，B和C
3、有机溶液沉淀是利用亲水性的有机溶剂______A____，从而降低溶质的溶解度来实现的。 A、降低水的活度 B、降低溶质的浓度 C、增加水化层厚度 D、提高介质的介电常数
5、反胶团萃取是利用两性表面活性剂在____B___有机溶剂中亲___C___性基团自发向内形成反微团的的原理而实现的。
A、 极性 B、 水 C、 非极性 D、脂 6、双水相萃取是利用_________B_________的原理。
A、 物质在互不相溶的两相间的分配系数的差异 B、 物质在互不相溶的两水相间的分配系数的差异 C、物质在互不相溶的两相间的溶解度的差异 D、物质在互不相溶的两水相间的溶解度的差异 7、反渗透膜分离的原理是______B________。
A、利用反渗透膜，使溶液中的水能通过而使溶质浓缩的过程 B、利用渗透膜，使溶液中的水能通过而使溶质浓缩的过程 C、利用渗透膜，使溶液中的溶质能通过而水分子被截留的过程 D、利用反渗透膜，使溶液中的溶质能通过而水分子被截留的过程 8、电泳分离是利用物质的__B__差异进行分离的方法。
A、 在力场中沉降速度 B、 在电场中泳动速度 C、 pI D、相对分子质量 9、细胞的化学破碎的推动力为____B_______。
A、胞内外的蒸汽压差 B、 胞内外的渗透压差 C、机械力 D、浓度差
二、填空题
1、高效液相色谱分离方法中，液-液色谱是以 液体 作为流动相；以 固定在固相载体表面的
液体 作为固定相。
2、完整的萃取操作过程一共分三个步骤，分别为 萃取 ，洗涤和 反萃取 。
3、离子交换树脂的组成： ___载体__， _活性基团__和 可交换离子 。
4、根据分离机理的不同，色谱法可分为吸附色谱，分配色谱，离子交换色谱，凝胶色谱 。 5、双相电泳中，第一相是 等电凝胶 ；第二相是 凝胶电泳 。
6、物料中所含水分可分为 化学结合水，物理结合水，机械结合水 三种；
7、电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是 引发剂 ；甲叉双丙烯酰胺的作用是
交联剂 ；TEMED的作用是 增速剂 。
9、简单地说，离子交换过程实际上只有 外部扩散，内部扩散，化学交换反应 三个步骤。
10、电泳过程中，加入溴酚兰的目的是 指示蛋白的迁移位置 。 11、吸附剂按孔道结构区分 多孔型 介质和 凝胶 介质。 12、常用的工业起晶方法：自然起晶法、刺激起晶、晶种起晶法
三、名词解释题
凝聚：添加盐类破坏细胞双电层，导致细胞聚集
絮凝：添加絮凝剂在细胞间形成桥架作用。
超临界流体萃取：当一种流体处于其临界点的温度和压力之下，则称之为超临界流体。使用超临界流体作为萃取剂的萃取方法。
膜分离：利用具有一定选择性透过特性的过滤介质进行物质的分离纯化。
包含体：外源基因在基因工程菌中高水平表达时，通常会形成不溶性、无活性的蛋白聚集体。
凝胶过滤色谱（Gle filtration chromatography）:利用凝胶粒子作为固定相是根据料液中溶质相对分子质量的差别进行分离的液相色谱法
四、简答题
1、请结合图示简述凝胶排阻色谱（分子筛）的分离原理。
答：凝胶排阻色谱的分离介质（填料）具有均匀的网格结构，其分离原理是具有不同分子量的溶质分子，在流经柱床是，由于大分子难以进入凝胶内部，而从凝胶颗粒之间流出，保留时间短；而小分子溶质可以进入凝胶内部，由于凝胶多孔结构的阻滞作用，流经体积变大，保留时间延长。这样，分子量不同的溶质分子得以分离。
2、 绘制结晶过程中饱和曲线和过饱和曲线图，并简述其意义。
结晶过程中的饱和温度曲线和不饱和温度曲线的简图如下图所示： S-S曲线为饱和温度曲线，在其下方为稳定溶液为不饱和溶液，不会自发结晶；
T-T曲线为过饱和温度曲线，在其上方为不自发形成结晶；
S-S曲线和T-T曲线之间为亚稳区，在该区饱和溶液，但若无晶种存在，也不能自发形成
3、 何谓亲和吸附，有何特点？
答：亲和吸附是吸附单元操作的一种，它是附剂与目标物之间的特殊的化学作用实现
手段。亲和吸附剂的组成包括：惰性载体、手臂链、特异性亲和配基。
亲和吸附的特点是高效、简便、适用范围广、分离速度快、条件温和，但载体制备难度大，通用
区，在该区域稳定区，能够域，溶液为过
晶体。
利用亲和吸的高效分离
性差，成本较高。
4、 蛋白质盐析的两种方法和适用的范围，以及影响盐析的因素
Ks盐析法：一定的pH和温度下通过改变盐离子浓度进行盐
析，此时β影响较小，此法由于蛋白质对离子强度的变化非常敏感，易产生共沉淀现象，沉淀的分辨率低，故常用于提取液的前处理。
β盐析法：一定的盐离子浓度下改变pH和温度进行盐析，β影响较大，用于后期，分辨率高。 影响盐析的因素
无机盐的种类和浓度：影响Ks值。 温度与pH值：影响β值。 5、萃取操作中的乳化现象概念、产生原因以及乳化对分离的影响
乳化即水或有机溶剂以微小液滴形式分散于有机相或水相中的现象。
