绪论
?细胞工程与生物技术
?细胞工程的概念及其研究内容 ?植物组织培养的研究内容及其技术 ?植物组织培养的发展历史 ?植物组织培养的应用及发展趋势
一、细胞工程与生物技术（Biotechnology）
1生物技术
生物技术：指应用自然科学和工程原理，依靠动物、植物、微生物为反应器，将物料加工以提供产品来为社会服务。 2发展阶段 传统生物 现代生物技术
特点：是综合性学科，涉及多个领域的技术，采用先进的方法，设备、仪器和手段 3.研究内容 ?蛋白质工程 ?细胞工程 ?基因工程 ?酶工程
二、细胞工程的概念及其研究内容 1 细胞工程（Cell engineering）
细胞工程：指在细胞水平上研究、开发和利用各种细胞的工程。具体是指应用现代生物学、细胞学、遗传学、生物化学、分子生物学和细胞生物学的方法和技术，对细胞进行遗传操作及离体培养，以改良品种，生产有用的生物产品或原料。 2 细胞工程的研究内容
（1） 植物细胞工程（植物组织培养） （2） 动物细胞工程 （3） 微生物细胞工程
三、植物组织培养的研究内容及其技术 1植物组织培养的概念
?发酵工程
?生化工程、基因组学蛋白质组学 ?生物芯片
?生物信息学、海洋生物技术、太空生物技术
植物组织培养，又称“植物的离体培养技术”，“植物的器官、组织和细胞培养技术”，指通过细胞或非细胞水平上的离体培养，细胞融合、遗传物质的改造或修饰等技术来改良植物品种或生产有用物质。 2. 植物组织培养的研究内容
?植物细胞与组织培养(Plant cell and tissue culture)
?植物细胞融合(Plant protoplast fusion and somatic hybridization) ?植物细胞质工程(Plant Cytoplasm engineering)
?植物染色体与染色体组工程(Plant chromosome engineering and plant genome engineering) ?植物细胞核与细胞器的移植(plant nucleus and organelle transplantation) （1）植物细胞与组织培养技术
植物细胞与组织培养技术：指在无菌条件下，将离体的植物器官、细胞、组织或完整个体，在人工控制的条件下进行培养，使之成为完整的植物体。
外植体（explant）：从活体植物上切取下来，进行培养的那一部分组织或器官均称为外植体。
? 器官培养（Organ culture） ? 胚胎培养（Embryo culture） ? 组织培养（Tissue culture） （2）植物原生质体融合和体细胞杂交
指将两种异源的原生质体，在诱导剂诱发下相互接触，从而发生膜融合，胞质融合和核融合并形成杂种细胞，进一步发育成杂种植物体，称为细胞融合。 3. 植物组织培养技术 ?基本的无菌操作技术 ?器官培养技术 ?胚胎培养技术 ?组织培养技术 ?细胞培养技术
?原生质体培养与体细胞杂交技术 四、 植物组织培养的发展历史 ?探索阶段 ?技术建立阶段
?技术与理论的发展时期 ?快速发展和实践应用阶段?单倍体育种技术 ?突变体筛选技术
?体细胞胚胎的发生及人工种子 ?细胞遗传转化与转基因植物的鉴定 ?细胞培养物的形态和细胞学观察 ?细胞、组织培养物的超低温保存? 细胞培养（Cell culture ）
? 原生质体培养（Protoplasm culture）
五.植物组织培养的应用及发展趋势 ?快速繁殖方面 ?苗木脱毒技术 ?次生代谢物质的生产 ?培育体细胞杂种 ?培育人工种子 参考书目
?植物组织培养教程 李浚明编著 ?植物细胞工程 林顺全编著 ?植物细胞工程实验技术 孙敬三 ?实用植物组织培养教程 曹孜义主编 ?细胞培养 司徒镇强编著 ?花卉组织培养 韦三立编著 参考期刊 ?植物生理学通讯 ?植物学报 ?实验生物学报 ?植物生理学报
?种质保存 ?基因工程 ?突变体育种
?遗传学、分子生物学、病理学等基础研究方面的应用
第一章 植物组织培养实验室及基本操作技术
第一节：植物组织培养实验室
一、实验室的设计
植物细胞工程的实验室有化学实验室、无菌室、培养室、细胞学实验室、摄影室、灭菌室等，（如下图） 1、化学实验室
用途：药物放置、称取、配制、仪器存放、洗涤、干燥、灭菌、培养基配制、消毒、制蒸馏水、接种材料：准备、培养 要求：干净、便于工作
放置的仪器：药物柜、天平、烘箱、培养箱、高压灭菌器、无离子水发生器、蒸馏水器、水槽、电炉、
2、无菌操作室
用途：接种外植体、转移培养物，原生质体的游离、放灭菌后用的培养基。 要求：关键保持较长时间无菌状态。 要做到以下几点：
墙壁地面光滑平整无缝隙；
空气不对流，空气净化后入室内，一天换一次空气或装排气扇； 控制温度；
装日光灯照明，紫外光灯消毒，工作台装紫外灯消毒。 设缓冲间
作用：防工作人员带入杂菌，约2㎡即可。
设洗手池、装消毒液、衣架，供工作人员换衣、鞋、帽、口罩。 定期消毒：2%新洁尔灭溶液擦地板，每天甲醛、KMnO4消毒。 设置：培养架：放灭菌后待接种的培养基； 照明灯、消毒紫外光、排气扇。 超净工作台或接种箱，接种箱有单人、 3、培养室
用途：离体组织、原生质体和试管苗生 长发育的场所，相当于作物的大田。 要求：
墙壁地面光滑保温、保湿，窗装双层 玻璃透光保温，顶高2.6m易控温湿； 恒温灯25℃--27℃,日光灯照明；
保持干燥清洁：定期2%新洁尔灭溶液消毒， 定期熏蒸，喷70%酒精降尘。 双人操作两种。(如图2)设置：
光培养室：培养物上方装日光灯，用于分化培养。 暗培养室：用于诱导培养或紫外检测。
培养架：用于固体培养，用3*3cm或2.5*2.5cm万用角铁搭成4—6层，最低一层离地40cm左右，每层间隔30cm，一般1.3m长，宽50cm，每层装2支40w日光灯。 摇床、转床
