DNA基本简介

2026/1/15 15:06:57

克/ml(毫升)的柠檬酸钠溶液、(21)物质的量浓度为2mol(摩尔)/L(升)和0.015mol/L的氯化钠溶液、(22)二苯胺试剂(本试剂是成瓶的)。

★制取方法:①制备鸡血细胞→取刚杀过的鸡血(要干净,不能有杂质)50毫升左右,加入柠檬酸钠防止凝血;除去上面的清液,因为DNA主要存在于细胞核中。②提取核物质→加蒸馏水(一般是鸡血细胞的2倍半)并用玻璃棒搅拌不少于5分钟,使血细胞破裂,释放出的DNA往往和蛋白质结合在一起。③溶解核内DNA→DNA在高浓度的氯化钠溶液中溶解度很高,用2mol/L的氯化钠溶液可以加速核蛋白解聚,游离出DNA。④析出含DNA的粘稠物→加蒸馏水降低氯化钠溶液的浓度至0.14mol/L,此时DNA的溶解度下降,蛋白质的溶解度增高,从而使DNA和蛋白质分离,析出DNA(注意:此步骤要精确浓度)。⑤滤出含DNA的粘稠物→用纱布过滤得到丝状DNA的粘稠物。⑥DNA粘稠物再溶解→加入2mol/L的氯化钠溶液后,充分搅拌,使DNA溶解。⑦过滤含DNA的氯化钠溶液→用新纱布过滤。⑧提取较纯净的DNA→加入冷却的浓度为95%的酒精,使DNA沉淀、浓缩、形成含杂质较少的白色丝状物。⑨DNA的鉴定→DNA的鉴定可用二苯胺法,DNA遇到二苯胺变为蓝色;还可以用“甲基绿”法,“甲基绿”使DNA变为蓝绿色。

★注意事项:①盛放鸡血细胞的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破碎后,DNA容易被玻璃容器吸附。因此,实验中最好使用塑料的烧杯和试管,可以减少提取过程中DNA的损失。②实验中搅拌含有悬浮物的溶液时,玻璃棒不要直插烧杯底部,同时搅拌要轻慢。③用“甲基绿”法鉴别DNA时,可将“甲基绿”直接滴到玻璃棒的丝状物上后,要用水充分冲洗掉浮色后再观察。

三:植物DNA的简易提取法

(提取时千万要注意里面的步骤!!!)

★所需的材料:①新鲜菜花(或蒜黄、菠菜)。②塑料烧杯一个。③量筒(规格和数量同上)。④玻璃棒一个。⑤尼龙纱布(数量同上)。⑥陶瓷研钵一个(最好用陶瓷的)。⑦试管(数量同上,没标明数量的要同时准备两个,以备用)。⑧试管架(数量同上)⑨试管夹(数量同上)。⑩漏斗(数量同上)。⑾酒精灯一个。⑿石棉网(数量同上)。⒀三角架。⒁火柴一把(小火柴)。⒂刀片一把(小刀即可)。⒃天平。⒄研磨液(可在化学品试剂店买)。⒅体积为95%的酒精溶液(体积就是浓度)。⒆二苯胺试剂一瓶。⒇蒸馏水(不少于500毫升)。(21)塑料离心机一台(也可用食品加工机代替)。

★制取方法:①准备材料→将新鲜菜花和浓度为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室内,至少24个小时,建议48个小时,冷冻室的温度要调成-18°以下。②取材→称取30克菜花,去梗取花,切碎。③研磨→将碎菜花放入研钵内,倒入10毫升研磨液,充分研磨10分钟,建议15分钟。④过滤→在漏斗中垫上尼龙纱布,将菜花研磨液滤入烧杯中(有条件的可将滤液滤入塑料离心机中离心,用1000转/分钟的速度旋转,离心5分钟,取出上面的清澈液体放入烧杯中。[也可用食品加工机代替,但速度一定要有保证!])在4°的冷藏室中放置5~6分钟后,再取上面的清澈液体。⑤加冷酒

精→将一倍体积的清澈液体倒入两倍体积浓度为95%的冷酒精中,并用玻璃棒缓缓地轻轻地搅拌溶液(玻璃棒不要插入烧杯底部)。沉淀3~5分钟后,可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转,絮状物会缠在玻璃棒上。⑥配制二苯胺试剂→取0.1毫升B液,滴入到10毫升A液中,混匀。⑦鉴定→取4毫升DNA提取液放入试管中,加入4毫升二苯胺试剂,混匀后观察溶液颜色(不变蓝)。用沸水浴(100°)加热10分钟。在加热过程中,随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色)。 ★注意事项:①一定的冷冻时间是绝对要掌握好的,因为植物的DNA提取不易。②研磨的时间也要掌握好,理由同前。③要想好一切步骤,一举呵成,就是要抓紧时间,理由同前。

DNA的心灵感应

DNA双螺旋结构DNA分子能够识别与自己“配对”的分子,即使相隔一段距离,并且在表面无其它外力帮助的情况下,相配对的两个分子最终能聚合在一起。科学家指出,这种“心理感应”会帮助DNA分子在它们混乱前排列整齐,这能够有效避免DNA结合时发生差错,也就有效避免了癌症,老化和其它的疾病的发生。但是同样的DNA适当地打乱组合顺序其实是对有性繁殖有意义的,因为要保证后代遗传得多样性。

DNA鉴定

人体细胞有总数约为30亿个碱基对的DNA[2],每个人的DNA都不完全相同,人与人之间不同的碱基对数目达几百万之多,因此通过分子生物学方法显示的DNA图谱也因人而异,由此可以识别不同的人。


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