规模化养牛场消毒技术指南
一、 概述
1、消毒目的：消毒是指采用物理、化学及生物方法杀死物体表面的病原微生物。其目的是：
（1） 防止外源病原体带入畜群 （2） 减少环境中病原微生物的数量 （3） 切断传染病的传染途径。
消毒是控制动物传染病发生必不可少的重要手段之一。 2、消毒的分类：根据消毒的目的不同，将消毒分为： （1） 预防性消毒，即日常消毒。
（2） 临时消毒，即发生一般性疫病时的局部环境的强化消毒。 （3） 终末消毒，即发生重大疫病时的大消毒。 3、消毒对象：奶牛场消毒的主要对象是： （1） 进入牛场生产区的人员及交通工具 （2） 牛舍环境
（3） 挤奶间及其挤奶设备 （4） 奶牛乳房及乳头 （5） 饮水
4、 消毒设备：奶牛场经常用消毒设备有紫外消毒灯、喷雾器、高压清洗机、高压灭菌容器。主要消毒设施包括生产区入口消毒池，人行消毒通道，尸体处理坑，粪便发酵场，专用消毒工作服、帽及胶鞋。 5、消毒方法：
（1） 物理消毒法：指机械清扫、高压水冲洗、紫外线照射、高压灭菌处理。 （2） 化学消毒法：指采用化学消毒剂对牛舍环境，挤奶间、饲养与挤奶用具，牛体表
进行消毒处理。
（3） 生物学消毒：指对牛粪便及污水进行生物发酵，制成高效有机物后利用。 6、常用消毒药：根据消毒对象不同，奶牛场常用化学消毒包括：
（1） 石灰乳及漂白粉：用于消毒池、牛舍地面、墙壁、粪便消毒，常用浓度为10-20%。 （2） 百毒杀、次氯酸钠：用于交通工具、人员体表、挤奶设备、奶牛乳房、饮水消毒。
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常用浓度为0.1-0.2%用于空气喷雾消毒，0.5%为机械清洗消毒，0.01-0.02%为饮水消毒及乳房消毒。
（3） 碘液、洗必泰：主要用于奶牛乳头药浴，常用浓度为0.5-1%碘伏、0.2%的碘液、
0.3-0.5%洗必泰。
（4） 氢氧化钠及过氧乙酸：主要用于发生某种传染病时的消毒。2-4%氢氧化钠的水溶
液用于牛舍污染地面消毒，消毒后必须用水冲洗。0.2-0.5%过氧乙酸用于腾空牛舍空气喷雾消毒。 二、 消毒技术
1、车辆进入牛场区的消毒：各种车辆进入牛场生产区时必须进行消毒。牛场门口应设专用消毒池，其大小为：宽3米x长5米x深0.3米。内加2%氢氧化钠或10%石灰乳或5%漂白粉。并定期更换消毒液。进入冬季后，可改用喷雾消毒，消毒液为0.5%的百毒杀或次氯酸钠，重点是车轮的消毒。
2、人员进入牛场生产区的消毒：进入牛场的人员必须经消毒后方可进入。牛场应备有专用消毒服、帽及胶靴、紫外线消毒间、喷淋消毒及消毒走道。根据国家卫生部颁布的《消毒技术规范》的规定，紫外消毒间室内悬吊式紫外线消毒灯安装数量为每立方米空间不少于1.5W、吊装高度距离地面1.8-2.2米，连续照射时间不少于30分钟（室内应无可见光进入）。紫外线消毒主要用于空气消毒，不适合人员体表消毒。进入牛场人员在紫外线消毒间更新衣服、帽及胶靴后进入专为消毒鞋底的消毒走道，走道地面铺设草垫或塑料胶垫，内加0.5%次氯酸钠，消毒液的容积以药浴能浸满鞋底为准，有条件的牛场在人员进入生产区前最好做一次体表喷雾消毒，所用药液为0.1%百毒杀。
3、挤奶过程中奶牛乳房及乳头消毒：做好挤奶中的消毒是控制奶牛乳房炎的最主要的技术手段。挤奶员必须保持个人卫生，指甲勤修、工作服勤洗、挤奶操作时手臂用0.1%百毒杀溶液消毒。挤奶前先进行奶牛乳房及乳头清洗与消毒，方法是：（1）用专门的容器收集头三把牛奶。（2）用含0.2%次氯酸钠、水温为50℃左右消毒热水浸泡的毛巾擦洗乳头及乳头括约肌，再用另一消毒毛巾擦干乳头并进行按摩。（3）待奶挤干后，用0.5-1%碘伏或0.3-0.5%洗必泰对每个乳头药浴30秒钟，冬季应在药浴后擦干乳头，或在药浴液中加入油剂，或在药浴后涂擦少量药用凡士林，防止乳头冻伤。消毒乳房用的毛巾应每天用0.5%漂白粉溶液中煮沸消毒，经高压灭菌后备用。 4、挤奶设备消毒：重点是挤奶器的内鞘及挤奶杯的消毒。采用0.2%百毒杀或0.2%次氯
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酸钠溶液浸泡30分钟，再用85℃以上热水冲洗。挤奶杯每天消毒一次，挤奶器内鞘每周清洗一次。
5、挤奶间的消毒：挤奶间是病原微生物易于滋生的场所，是奶牛场重点消毒部位。每次挤奶结束后用高压清洗机冲洗地面，必要时可在水中加入0.2%百毒杀或次氯酸钠，每周对挤奶间进行一次空气消毒，可用0.2%百毒杀或0.2%次氯酸钠喷雾。 6、牛舍环境消毒：重点是地面、墙壁、空气、牛舍应设专为奶牛休息的牛床、冬季铺设垫草或细纱。牛舍地面应每天清除粪便、污水及污染垫草，保持通风、干燥、清洁。夏季每隔一个月对舍内地面进行一次喷雾消毒；已使用了2年以上的牛舍，应每年对离地面1.5米的墙壁用20%石灰乳粉刷一次。
7、产犊期消毒：怀孕母牛在分娩前应在其所处地面铺设干净垫草，并进行乳房及乳头的擦洗消毒；犊牛出生后，脐带断端用2%碘酊消毒；要及时给犊牛吃上初乳，为犊牛准备的专用奶桶每次使用时要用热水冲洗干净。 做好上述消毒工作是减少犊牛大肠性腹泻的重要环节。
8、饮水消毒：奶牛场应给牛群提供水质良好的清洁饮水。夏季炎热时间为防止水中病原微生物污染，可与水中加入0.02%的次氯酸钠或百毒杀。冬季应提供加温清洁水，防止饮用冰冻水而发生消化道疾病。
9、兽用器械消毒：奶牛场使用的各种手术器械、注射器、针头、输精枪、开殖器等必须按常规消毒方法严格消毒，免疫注射时，应保证每头奶牛更换一个针头，防止由于针头传播奶牛无浆体病。
10、发生疫病时的紧急消毒：当牛群发生某种传染病时，应将发病牛只隔离、病牛停留
的环境用2-4%烧碱喷洒消毒，粪便中加入生石灰处理后用密闭编织袋清除；死亡病牛应深埋或焚烧处理，运送病死牛的工具应用2%烧碱或5%漂白粉冲洗消毒；病牛舍用0.5%过氧乙酸喷雾空气消毒。 三、奶牛场消毒效果监测
消毒效果的监测是评价其消毒方法是否合理、消毒效果是否可靠的唯一有效手段，因而在消毒工作中十分重要。奶牛场消毒效果监测的主要对象是紫外线消毒室、挤奶间空气及设备、奶牛乳头、牛舍环境等。主要采用现场生物检测方法及流行病学评价方法。 （一）消毒效果的现场生物学检测方法 1、空气消毒效果检测
检测对象：紫外线消毒间、挤奶间、牛舍等。
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检测方法：平板沉降法。 监测指标：计数平板上的菌落。
操作步骤：在消毒前后，按室内面积≤30m2,于对角线上取3点，即中心一点，两端各一点；室内面积>30m2时，于四角和中央取5个点，每点在距墙1m处放置一个直径为9cm的普通营养琼脂平板，将平板盖打开倒放在平板旁，暴露15分钟后盖上盖，立即置37℃恒温培养箱培养24小时，计算平板上菌落数，并按下式计算空气中的菌落数： 5000N 空气中的菌落总数（cfu/m3）=
A T
A为平板面积（cm2）；T为平板暴露的时间（min）；N为片板上平均菌落数（cfu） 根据消毒前后被测房间空气中的细菌总数变化，判断消毒是否有效。 2、奶牛乳房及乳头消毒效果检测 （1）、细菌菌落总数检测：
按常规方法进行乳房及乳头清洗与消毒，待挤完奶后，用浸有灭菌生理盐水的灭菌棉试子（棉棒）在奶牛乳头及周围5x5cm处深擦2次，剪去操作者手接触的部分，将棉试子投入装有5ml采样液（灭菌生理盐水）的试管内立即送检。
将采样管用力振打80次，用无菌吸管吸取1ml待检采样液，加入灭菌的平皿内，加入已灭菌的45-48℃的普通营养琼脂15ml。边倾注边摇匀，待琼脂凝固后置37℃培养箱培养24-48小时，计算菌落总数。菌落的计算方法：
平板上的菌落数 x 采样液稀释倍数 乳房细菌菌落总数（cfu/cm2）=
采样面积（cm2） （2）、金黄色葡萄球菌检测：
吸取采样液0.1ml，接种于营养肉汤中，于37℃培养24小时，再用接种环划线接种于血平板，37℃24培养小时，观察有无金黄色、圆形凸起、表面光滑、不透明、周围有溶血环的菌落，并对典型菌落作涂片革兰氏染色镜检，如发现革兰氏染色阳性呈葡萄状排列球菌时，可初步判为阳性。 3、奶牛乳头药浴液中细菌含量检测
奶牛乳头药浴是挤奶过程中的必须环节，而检测药浴杯中药液的细菌含量，是确定药浴效果的重要指标 （1）、采样方法：
采取换液前使用中的药溶液1ml，加入9ml含有相应中和剂的普通肉汤采样管中混
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匀。其中：含氯、碘消毒液，可在肉汤中有0.1%硫代硫酸钠；洗必泰、季胺类消毒液，需在肉汤中加入3%的吐温80，用于中和被检样液中的残效作用。 （2）、检测方法：
采用平板涂抹法。用灭菌吸管吸0.2ml药浴液分点滴于2个普通琼脂平板上，用灭菌棉试子涂布均匀，一个平板置20℃培养7天，观察有无真菌生长，另一个平板置37℃培养72小时，观察细菌生长情况。必要时可作金黄色葡萄球菌的分离（方法同上）。 4、挤奶设备及环境表面消毒效果监测
检测对象：挤奶器内鞘，挤奶杯，挤奶用毛巾、工作服、胶靴，挤奶间，牛舍及工作人员进入牛场的消毒走道表面。
（1）、采样方法：棉试子采样法与奶牛乳房采样方法相同。压印采样法用于消毒毛巾的检测，可用一张直径为4cm浸有无菌生理盐水的滤纸在被采样毛巾或物体表面压贴10-20分钟，将贴有样品的滤纸一面贴于普通营养琼脂平皿表面，停留5-10分钟后揭去滤纸，将平板置37℃培养24小时。
（2）、检测方法：细菌菌落总数检测方法同奶牛乳房检测方法相同。其采样面积（cm2）可估测。对于奶牛乳房炎感染率较高的牛场，有必要在检测物体表面细菌总数的同时，进行特殊病原体（以金黄色葡萄球菌为准）的分离。 （二）、消毒效果的流行病学评价方法
一种消毒方法运用于牛场牛群后，其消毒效果的好坏不仅体现在消毒前后环境、牛体、物体表面的微生物含量，更直接的体现在对某种感染性疫病的预防中，即采用消毒措施是否可以使牛群减少感染或少发生疾病，这种减少和对照组（消毒方法更换以前）相比有无显著性差异，进而计算出使用消毒剂后对某种疾病的保护率和效果指数，从而得出该消毒方法或消毒液有无使用价值的结论。
采用何种疾病作为判定指标，应根据消毒对象不同而定。用于挤奶过程中的消毒的评价，以奶牛乳房炎（包括临床型和隐性乳房炎）的感染情况作为判定消毒效果的指标；用于犊牛舍、犊牛奶桶、产房环境消毒时，以犊牛发生下痢、肺炎的发病率作为判定消毒效果的指标。
评价方法包括通过对实施消毒或改变消毒方法前后某种疾病的现况调查（描述性调查）和实验对照性调查两种常用方法，各牛场可根据本场技术力量、管理水平及各种条件选择不同的评价方法。
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