产品如青霉素，链霉素，红霉素，氨基酸等。代表人物是发现青霉素的英国科学家Fleming. 第四阶段 基因工程等高新技术应用阶段。现代生物技术的发展是人们加深了对微生物代谢产物合成的遗传学与调节机制的了解，为更好的应用提供了前提条件。DAN双螺旋结构模型的建立，质粒中遗传物质的发现，DNA限制酶和连接酶的应用，为人类控制生物体生物代谢过程提供了强大的工具，使发酵技术能为人类提供需要的产品。代表产品胰岛素，干扰素等， 人物如沃森、克里克等。
2. 简述培养基对发酵的影响
微生物的生长需要一定的营养，不同的微生物对营养的要求有很大的差异，培养基的成分和配比合适与否，对产生菌的生长发育，发酵单位的增长，有相当大的影响，同时还会影响到提取工艺和产品质量。
微生物的生长需要较多供给有机碳架的碳源，构成含氮物质的氮源，还有无机盐类，微量元素和水分等。
碳源是构成微生物细胞和各种代谢产物碳架的营养物质，同时碳源在微生物的代谢过程中被氧化、释放出能量，并以ATP的形式贮存于细胞内，供给微生物生命活动所需的能量。
碳源是构成菌体细胞的物质，同时也是细胞合成氨基酸、蛋白质、核酸、酶类及含氮代谢产物的成分，选择氮源需要注意氮源促进菌体生长、繁殖和合成产物间的关系。
无机盐和微量元素是构成菌体原生质的成分，可维持酶的活性，可调节细胞的渗透压和PH，参与产物的合成等。
水是必需的物质，它既是构成菌体细胞的主要成分，又是营养物质传递的介质，对微生物的生长繁殖和产物合成有很重要的作用。
3. 简述温度对发酵的影响，如何控制温度可提高目标产物的产率？
在发酵过程中，菌体的生长和产物的合成均温度有密切关系，一般最适生长温度和最适生产温度往往不一致。在具体控制过程中，究竟选择哪个温度，需要视在微生物生长阶段和产物合成阶段中哪一矛盾是主要而定，另外，温度还会影响微生物代谢的途径和方向。 在理论上，整个发酵过程中不应只选一个培养温度，而应该根据发酵的不同阶段选择不同的培养温度。在生长阶段，应选择最适生长温度；在产物分泌阶段，应选择最适生产温度。这样变温发酵所得产物的产量是比较理想的。但在工业发酵过程中，由于发酵液的体积很大，升降温度都比较的困难，所以在整个发酵过程中，往往采用一个比较适合的培养温度，使得到的产物产率最高。
4. 简述溶氧对发酵的影响，如何控制溶氧浓度可提高目标产物的产率？
大部分工业微生物需要在有氧环境中生长，培养这类微生物需要采取通气发酵，适量的溶解氧可维持其呼吸代谢和代谢产物的合成。，对决大多数发酵来说，供氧不足会造成代谢异
常，降低产物产量。因此，保证发酵液中溶氧和加速气相、液相和微生物之间的物质传递对于提高发酵的效率是至关重要的。
发酵液的溶氧浓度，是由供氧和需氧两方面多决定的，也就是说当发酵的供氧量大于需氧量，溶氧浓度就上升，反之就下降。因此要控制好溶氧浓度需要从这两方面入手。在供氧方面主要是设法提高氧传递的推动力和液相体积氧传递系数的值，如可调节搅拌转速或通气速率来控制供氧；发酵液的需氧量受菌体浓度的影响最为明显，发酵液的摄氧率随菌浓增加而按一定比例增加，但是氧的传递速率随菌浓的增加呈对数减少。因此可通过控制最合适菌体浓度来控制需氧量。在工业生产中还可通过调节温度，液化培养基，中间补水，填加表面活性剂来改善溶氧水平。
5. 简述PH对发酵的影响，如何控制PH可提高目标产物的产率
发酵培养基的PH对微生物的生长具有非常明显的影响，也是影响发酵过程中各种酶活的重要因素，由于PH不当，可能严重影响微生物的生长和产物的合成，因此对微生物发酵来讲，有最适生长PH和最适生产PH。
在了解发酵过程中的最适PH的要求后，就要采取各种方法来控制。首先要使培养基在发酵过程中的PH变化在合适的范围内，一般控制培养基PH变化的能力有限，在不能满足要求的前提下，可在发酵过程中直接加碱或酸性物质的方法来控制。 6. 简述抗生素生物合成基因的特点？ 抗生素合成基因的特点是：
（1）抗生素合成基因的一个典型特点是高G-C碱基组成，含量达70%；三联体密码子中的第三个碱基的G-C比例极高；
（2）对已克隆的抗生素合成基因进行分析，发现他们大多处在一个基因簇中； （3）抗生素合成基因除定位在染色体上外，还发现定位在质粒上。 7. 利用基因工程如何提高抗生素的产量？ 利用基因工程可通过以下方法提高抗生素的产量： （1）增加参与生物合成限速阶段基因的拷贝数； （2）通过调节基因的作用； （3）增加抗性基因；
8. 基因工程在抗生素生产中有那些应用？
通过基因工程明确抗生素合成基因的典型特点和克隆的方法，解析合成基因的结构，深入了解微生物的生长代谢过程，更有效的控制抗生素的生产，为人类的健康提供更多更有效的产品，主要体现在以下几方面： （1）提高抗生素的产量 （2）改善抗生素的组分 （3）改进抗生素的生产工艺；
（4）产生杂合抗生素，提供新的药物来源 （5），用组合生物合成方法合成复杂化合物
9. 发酵工程的研究内容包括那些？
发酵工程的内容包括：菌种的培养和选育、菌的代谢和调节、培养基灭菌、通气搅拌、溶氧、发酵条件的优化、发酵过程各种参数与动力学、发酵反应器的设计和自动控制、产品的分离纯化和精制等。
10.理想的发酵罐应该具有那些特点？
（1）制造发酵罐的材料稳定性好，对微生物无毒性 （2）密封性良好
（3）良好的传质传热和混合性能
（4）内壁平整光滑，连接接口无死角死腔； （5）能自动控制且控制精确度高 论述题
根据生物技术制药的特点,在国内外的发展现状,分析该制药技术在我国的发展前景. 第三章 动物细胞制药
填空
1、动物与微生物、植物细胞培养生长条件最明显的区别是动物细胞需要
贴壁生长 生长。
2、生产用动物细胞为 原代 细胞、 二倍休 细胞系、 转化 细胞系 以及 工程 细胞系。
3、按我国和美国FDA的规定，用于生产的工程细胞必须建立 原始细胞库 和 工作细胞库 两个细胞库。
4、动物细胞培养根据培养基的不同分为 液体培养 和 固体培养 。
5、从生产实际看，动物细胞的大规模培养主要可以分为悬浮培养、 贴壁培养 和贴壁-悬浮培养。 选择题
1．人胚成纤维细胞约可以培养（C ）代。 A 30 B 40 C 50 D 60
2．动物细胞培养时新买的玻璃器材在使用前必须先（ A ）。 A 泡酸 B 清洗 C 消毒 D 刷洗 3．动物细胞培养的最适PH为（ D ）。 A 6.5-6.8 B 6.8-7.0 C 7.0-7.2 D 7.2-7.4
4．目前卫生部对生物工程的产品一般要求纯度在（ C ）以上。 A 95% B 97% C 98% D 99%
5.将构建好载体导入动物细胞最常用有方法是( D )。
A 细胞融合法和微细胞介导法。 B 原生质介导法和染色体介导法 C 显微注射法和基因枪法 D 磷酸钙沉淀法和电穿孔法
6. 搅拌的作用在于使罐内物料充分混合，有利于营养物和氧的传递，但在动物细胞培养中搅拌速度一般控制在（ D ）r/min. A.400 B 40 C 60 D 100
7.将蛋白质分子与其它相对分子质量较小的杂质分开最常用的方法是（ A ）。 A 透析 B 亲和层析 C 高压液相层析 D 离心 名词解释
灌流式操作 ： 当细胞和培养基一起加入反应器后，在细胞增长和产物形成过程中，不断地将部分条件培养基取出，同时不断地补充新鲜培养基。
分批式操作将细胞和培养基一次性加入反应器内进行培养，细胞不断增长，产物不断形成，最后将条件培养基取出，培养结束的方法。 半连续操作 细胞工程
组织培养： 将组织或细胞从机体取出，在体外模拟机体体内的生理条件进行培养，使之生存和生长。
贴壁细胞: 生长须有贴附的支持物表面，自身分泌或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长。两种形态：成纤维细胞型和上皮细胞型 简答题
1． 植物细胞及微生物相比动物细胞有那些生理特点？ 2． 无血清培养基有何优点？ （1）提高重复性 （2）减少微生物污染 （3）供应充足稳定 （4）产品易纯化
（5）避免血清因素对细胞的毒性 （6）减少血清中蛋白对生物测定的干扰
3，包埋或微囊培养法有何优点？
（1）细胞可获得保护，避免了剪切力的损害。
