放入空白校正 → 1.光度（按“1”） → T%/ABS →【Goto WL】键设置波长→【AUTO ZERO】 →放入待测样→【START/STOP】→RETURN返回 3. BAEE,BA中文名
BAEE：N﹣苯甲酰﹣L﹣精氨酸乙酯 BA：N﹣苯甲酰﹣L﹣精氨酸
10.植物体内游离脯氨酸含量的测定
1. 植物体内游离脯氨酸有何意义？
??植物在正常条件下，游离脯氨酸含量很低，但遇到干旱、盐碱、低温等逆境时，
游离脯氨酸便会大量积累，并且积累指数与植物的抗逆性有关。因此，脯氨酸可作为植物抗逆性的一项生化指标。 ??脯氨酸是水溶性最大的氨基酸，具有很强的水和能力，其水溶液具有很高的水势。
其疏水端可与蛋白质结合，亲水端可与水分子结合，蛋白质可借脯氨酸束缚更多的水，从而防止渗透胁迫条件下蛋白质脱水变性。因此脯氨酸在植物的渗透调节中起重要作用。
2. 当改变萃取剂时比色应做哪些改变？如何选择最佳的萃取剂？
??当萃取剂发生改变时，测定光密度的波长应当改变，具体如何改变，根据实验而
定。
??萃取剂选用原则：a.萃取机和原溶剂互不相容b.萃取剂和溶质互不发生反应c.溶
质在萃取剂中溶解度远大于在原溶剂中溶解度。
11.植物基因组DNA的提取与纯度测定
1. CTAB的作用？
使核糖体解体，蛋白质和多糖沉淀，DNA溶解 2. CTAB溶液中组分有哪些？
? CTAB:十六烷基三甲基溴化铵
? Tris-HCl(pH=8.0)：提供一个缓冲环境，防止核酸被破坏 ? EDTA螯合 Mg2+和 Mn2+：抑制DNA酶活性
? NaCl：提供高盐环境，使DNA充分溶解，存在于液相当中
? β-硫基乙醇：抗氧化剂，有效防止酚被氧化成醌，避免褐变,使酚容易去
除基因组DNA。
3. DNA提取方法有哪些？
CTAB法，玻璃珠法，超声波法，研磨法，冻融法，异硫氰酸胍法，碱法，酶法
4. DNA纯度鉴定方法
OD260/OD280（紫外分光光度法）、电泳 5. OD260/OD280值大于1.8及小于1.8的原因
等于1.8时表示DNA纯度极高，大于时表示提取物混有RNA，小于时表示混有蛋白质。
12.基因组DNA的酶切及琼脂糖凝胶电泳
1. 什么是限制性内切酶？分为哪几种？
是可以识别特定核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。
? 能识别特定的核苷酸顺序，并在识别点附近进行切割，但切割的核苷酸
顺序无专一性，是随机的。
? 能识别专一的核苷酸顺序，并在该顺序内的固定位置上切割 ? 能识别的顺序是回文顺序，可切成粘性末端也可形成平末端。 2. 酶切的原理，EcoRI的酶切位点
G 〡AATT C C TTAA〡 G
限制性内切酶识别特定核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间
的磷酸二酯键进行切割
3. 琼脂糖凝胶电泳分离核酸的原理
DNA在高于等电点PH的溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质相同数量的双链DNA几乎带等量的静电荷。因此能以同样的速度向正极方向移动。在一定电场强度下，DNA迁移速度取决于分子本身的大小与构型，相对分子质量不同的DNA泳动速率不同。 4. 电泳点样时，加样孔在哪个电极附近，为什么？
负极。DNA在高于等电点PH的溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。
13.植物总RNA的提取与检测
1. 常用RNA提取方法
苯酚法，阴离子去污剂法，Licl-尿素法，改良Gomez法，异硫氰酸胍法，CTAB法，热硼酸法，Trizol试剂快速提取法 2. Trizol试剂提取RNA理论上有几条带？分别代表什么？
四条．5SrRNA，5.8SrRNA,18SrRNA,28SrRNA 3. Trizol试剂提取RNA原理
TRIZOL是一种新型总RNA抽提试剂，其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性，适用于从多种组织和细胞中快速分离总RNA。
4. 植物RNA提取注意事项
1、取植物材料新鲜、幼嫩的部分
2、移液枪头，离心管等耗材和试剂需要经过严格的去RNA酶处理或用DEPC 水配制。
3、叶片用足够液氮快速研磨。 4、100mg叶片对应1mlTRNzol
5、提取RNA后立即跑电泳，防止RNA被污染
6、跑电泳的槽子需要与RNA专用槽，或经过特殊处理。
14.SDS-PAGE电泳测定蛋白质分子量
1. 什么是重组蛋白：应用重组DNA或重组RNA技术而获得的蛋白质
2. 蛋白质分子量测定方法有几种？凝胶过滤层析法，SDS-PAGE电泳，色谱法，
质谱法，沉降法
3. SDS-PAGE电泳的染色剂：考马斯亮蓝G-250
4. 什么是不连续电泳：不连续电泳是指使用不同孔径和不同缓冲系统的电泳。
由于浓缩胶的堆积作用，可使样品（即使是稀样品）在浓缩胶和分离胶的界面上先浓缩成一窄带，然后在一定浓度（或一定浓度梯度）的凝胶上进行分离。由于不同孔径凝胶的分子筛作用，使不连续电泳的分辨率大大高于连续电泳。
