回收率12mg/kg-2 回收率12mg/kg-3 回收率12mg/kg-3
未加标
0.000
0.0000
准确度的评价通过测定回收率的方法，将被测样品分为两份，其中一份加入已知量的欲测组分，然后用同样的方法分析这两份样品，按公式计算回收率：
回收率?加入欲测组分样品的测定结果—未加入欲测组份样品测定结果×100%
加入欲测组份量测出加标的回收率越接近100%，说明此定量分析结果的准确度就越高。
样品名
平行实验浓度平均值
(mg/L)
回收率8mg/kg—1 回收率8mg/kg—2 回收率8mg/kg—3 回收率10mg/kg—1 回收率10mg/kg—2 回收率10mg/kg—3 回收率12mg/kg—1 回收率12mg/kg—2 回收率12mg/kg—3
回收率
各加标量回收率平均值
3. 结果与讨论
3.1流动相及检测波长的选择
国家标准中测定防腐剂时流动相采用甲醇—乙酸铵溶液系统，而乙酸铵溶液缓冲能力较弱，部分样品溶液对PH较为敏感，从而导致脱氢乙酸峰出现拖尾，甚至与山梨酸峰无法完全分离有机酸的HPLC分析中，甲醇—磷酸盐缓冲液系统是在反相C18柱中最为常用的流动相，能更好更稳定的控制溶液的PH，本实验采用甲醇—0.02mol/L磷酸氢二钾溶液PH7.0作为流动相标准混合溶液色谱图见图(1) 有文献报道，对苯甲酸.山梨酸.脱氢乙酸均通过230nm 波长检测。利用紫外分光光度计对脱氢乙酸标准溶液进行全波长扫描，在230nm 及290nm 处均有最大吸收，大量试验表明，不同基质的样品对色谱图有不同程度的基线干扰，293nm波长的色谱图基线平滑，优于230nm 波长的色谱图，两
者计算的检测限无明显差别，因此，本法沿用国家标准GB/T23377-2009和 GB/T23495-2009的方法，脱氢乙酸通过293nm 波
长检测，苯甲酸山梨酸及糖精钠通过230nm波长检测。
3.2 提取方法的选择
样品中蛋白质及脂肪含量的高低直接影响检验结果的准确性及色谱柱的使用寿命，因此，沉淀蛋白质成为样品前处理的首要考量 常用的沉淀蛋白质方法有盐析法 有机溶剂沉淀法重金属盐沉淀法及生物碱试剂沉淀法等，其中亚铁氰化钾—乙酸锌溶液是最常用的蛋白质沉淀剂，具有沉淀快速，滤液澄清的特点，然而大量实验证明，除样品本身外，沉淀剂自身会产生大量絮状沉淀，对目标物有不同程度的吸附作用，从而使样品回收率很难达到要求 本法采用0.3%盐酸乙醇溶液作为提取溶剂，在酸性条件下，各组分都以分子状态存在，易溶于乙醇中 。乙醇具有沉淀蛋白质的作用，低温下效果更佳，故将提取液于4℃ 放置24h ，趁冷离心，如取上清液直接进样供HPLC分析，样液中乙醇量远高于流动相中的甲醇量，会产生溶剂效应，使峰形变钝，且有机相提取后用水稀释更易于蛋白质的沉淀，因此精密量取3ml上清液至10ml量瓶中，用水稀释至刻度，过滤，滤液供HPLC分析，峰形尖锐且对称。
