基因工程1[试卷]

2026/4/28 3:55:53

1.若某种限制性核酸内切酶的识别序列是CCTAGG,它在A和G之间切断DNA。下图表示用该酶处理某基因后产生的片段。下列有关叙述正确的是

A.该正常基因中有4个CCTAGG序列

B.产生的DNA片段可用核糖核酸连接酶连接起来

C.用该酶处理得到图示基因片段要水解3个磷酸二酯键

D.若该基因某处有一个CCTAGC突变为CCTAGG,用该酶处理后将产生5个片段

2.一环状DNA分子,设其长度为1。限制性核酸内切酶A在其上的切点位于0.0处;限制性核酸内切酶B在其上的切点位于0.3处;限制性核酸内切酶C的切点未知。但C单独切或与A或B同时切的结果如下表,请确定C在该环状DNA分子的切点应位于图中的哪处

A.0.2和0.4处 B.0.4和0.6处 C.0.5和0.7处D.0.6和0.9处 C单独切 长度为0.8和0.2的两个片段 C与A同时切 长度为2个0.2和1个0.6的片段 C与B同时切 长度为2个0.1和1个0.8的片段 3.回答下列有关遗传信息传递和表达的问题。 (1)如图所示,若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因,并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb,1kb=1000对碱基)上相应的E—F区域 (0.2kb),那么所形成的重组质粒pZHZ2 。 A.既能被E也能被F切开 B.能被E但不能被F切开 C.既不能被E也不能被F切开 D.能被F但不能被E切开

(2)已知在质粒pZHZ1中,限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0.8kb,限制酶H切割位点距限制酶F切割位点0.5kb。若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样 品,据表4所列酶切结果判断目的基因的大小为 kb;并将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在左图中。

4.λ噬菌体有极强的侵染能力,能在细菌中快速进行DNA复制,产生子代噬菌体,最终导致细菌破裂(称为溶菌状态);或者整合到细菌基因组中潜伏起来,不产生子代噬菌体(称为溶原状态)。在转基因技术中常用λ噬菌体构建基因克隆载体,使其在受体细菌中大量扩增外源DNA,以备研究使用。相关操作如下图所示,请回答。

(1)组装噬菌体时,可被噬菌体蛋白质包装的DNA长度约为36~51kb,则经人工改造的λgtl0载体可插入的外源DNA的最大长度为 kb。人工改造载体时,为获得较大的插入能力,可删除λ噬菌体DNA组成中的 序列以缩短其长度。

(2)λ噬菌体DNA上通常没有适合的标记基因,因此人工改造时需加装适合的标记基因,如上图λgtl0载体中的imm434基因。该基因编码一种阻止λ噬菌体进入溶菌状态的阻遏物。构建基因克隆载体需用到的酶是 ,外源DNA的插入位置应位于imm434基因 (之中/之外),使经侵染培养后的受体菌处于 状态。 (3)蛋白质与DNA相比,特有的化学元素是 ,若用放射性同位素标记该元素,再用被标记的噬菌体侵染未被标记的细菌,短时保温后搅拌、离心,可检测到放射性物质主要分布在试管 部分。

5.构建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。如图是天然土壤农杆菌Ti质粒的结构示意图(示部分基因及部分限制酶作用位点),据图分析:

(1)人工改造天然土壤农杆菌Ti质粒时,第一,去除质粒上的 (基因),保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长;第二,使质粒带有单一限制酶作用位点,有利于 ;第三,使质粒大小适合,可以提高转化效率等。

(2)(多选)质粒上的 基因被删除,不会影响到转基因微生物的性状。 A.四环素抗性基因B.复制原点C.终止子D.卡那霉素和新霉素抗性基因 (3)若用限制酶Ⅱ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子,并构成重组Ti质粒,分别以四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞,观察到的细胞生长的现象是 。 6.pIJ702是一种常用质粒(如图),其中tsr为硫链丝菌素(一种抗生素)抗性基因,mel是黑色素合成基因,其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落;而限制酶ClaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列。

⑴质粒DNA分子中的两条链靠 键维系成双链结构。 ⑵以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置换pIJ702上0.4kb(1kb=1000对碱基)的SacⅠ/SphⅠ片段,构成重组质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表4中。由此判断目的基因内部是否含有BglⅡ切割位点,并说明判断依据 。 ⑶已知pIJ702上含mel基因的ClaⅠ/PstⅠ区域长度为2.5kb,若用ClaⅠ和PstⅠ联合酶切pZHZ8,则参照表4中数据可断定酶切产物中最小片段的长度为 kb。 ⑷不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素固体培养基上的生长状况如表5所示。若要筛选接纳了pIJ702或pZHZ8的链霉菌细胞,所需的硫链丝菌素最小浓度应为 μg/mL(填写表格中给定浓度);含有重组质粒pZHZ8的菌落呈 色。

⑸上述目的基因来源于原核生物,其蛋白质编码序列(即编码从起始密码子到终止密码子之间的序列)经测定为

1256对碱基,试判断对这段序列的测定是否存在错误: ,并说明依据 。


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