对p-JNK表达具有剂量依赖性的抑制作用；同时上调丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶Ⅰ表达。据此推测，STS抗心肌肥厚机制与上调丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶Ⅰ，抑制p-JNK表达相关。下一步研究应着重于STS对ERK以及p35 信号通路的上下游分子的影响，进一步阐明STS抗心肌肥厚的机制，为其在临床用于心肌肥厚的防治提供实验依据[11,13]
对心血管系统的影响、对脑血管和细胞的影响、对肿瘤细胞的作用、对神经系统的影响、抗菌作用目前对丹参酮IIa 及其钠盐的药理作用研究取得了一定成果，但很少有人报道其在心血管受体的药理学方面和在体内与其他药物的相互作用方面的研究[5]。但是其杂质一直很少有研究，丹参酮IIa磺酸钠原料及丹参酮IIA磺酸钠注射液上市后，发现无论是原料还是水针剂在生产和销售过程中都会由于储存而出现酸性增强，含量降低的现象因为原有质量标准没有对丹参酮IIa磺酸钠原料及丹参酮IIa磺酸钠制剂有关物质进行有效监控。经HPLC检查，丹参酮IIa磺酸钠原料及制剂中均存在一未知杂质成分高达7%-15%。
目前，丹参酮IIa磺酸钠研究主要还是集中在其药理活性的探讨上，原料中的微量杂质成分的研究还是空白。由于丹参酮IIa磺酸钠是丹参提取物经过化进一步磺化制得，因此其可能的杂质主要有两个来源，一是作为磺化原料的参酮IIa中没有纯化干净的其他丹参酮类化合物，一是磺化过程中丹参酮IIa其他残留丹参酮磺化产物及其副产物，基于此方面的考虑，本课题采用色谱及波谱方法对丹参酮IIa磺酸钠的微量杂质的分离及结构鉴定。采用硅胶、大孔树脂等柱层析方法对丹参酮IIa磺酸钠的微量杂质进行制备分离，运用1H,13C，NMR等波谱技术鉴定化合物的结构。我们准备在这方面进行初步的研究。进一步制备大量高纯度样品作为杂质含量测定和结构鉴别及质量控制的方法，并比较了不同条件下的分离效果，建立了一个简单的含量测定方法可以用来作为原料药的和注射剂的质量控制。
第二章原料药中微量成分的分离及结构鉴定
2.1实验方法
2.1.1实验仪器
Agilent 1100 系列高效液相色谱仪
Shim-pack CLC-ODS-C18(150mn*6.0mn 5μm)色谱柱 VWD型紫外检测器
HP Chemstation 色谱工作站（美国惠普公司） JZH柱温箱（天津金洲科学仪器有限公司）
旋蒸蒸发仪 2.1.2 实验试剂
甲醇（色谱纯，江苏汉邦科技有限公司） 乙酸（分析纯，南京化学试剂有限公司） 氯仿（分析纯，上海凌峰化学试剂有限公司） 丙酮（分析纯，南京化学试剂有限公司 ） 95%乙醇 硅胶H（200-300目） 大孔树脂
2.1.3 原料药中微量成分的分离
准确称取原料药粗品2g，置于100ml圆底烧瓶中加水约25ml，超声使其充分溶解。然后置于回流装置上温度90℃回流四个小时，将样品转移到500ml楔形瓶内置旋蒸仪上蒸干，样品用40％乙醇溶解，抽滤。冷却后上样。(原料药高
VWD1 A, Wavelength=272 nm (K:\\08072505.D)mAU 300250200150100 5.15750 8.922 10.709 11.110 12.478002.557.51012.51517.5 19.92320min效液相色谱见图1)
图1 原料药粗品高效液相色谱图
原料药上大孔树脂吸附两个小时后用40％乙醇洗脱。用试管接馏分，流速不能过快。
大孔树脂收集所得馏分反相板检识（展开剂50%甲醇），对照品用95%乙醇溶解。点板后合并相同馏分，置于100ml楔形瓶内于旋蒸仪上蒸干，然后用95%乙醇少量溶解，旋蒸蒸干（如果残留物成大片状且色泽不均匀可用95%乙醇再次溶解，然后蒸干）。取出残留物转入试剂瓶内，得DST-1粗品.待上硅胶柱。
取DST-1粗品100mg。取硅胶20g，硅胶柱采用湿法装柱,干法上样。以氯仿：
丙酮=1：1洗脱，气泵加压。用10ml试管收集馏分，TLC检识 展开剂为氯仿：甲醇=8：2。合并馏分后，高效液相检测，流动相：甲醇：2%醋酸水=60%：40%；柱温35℃；流速：1ml/min； 检测波长：272nm；检测含量达到97%以上( 见图2-1，2-2)。
VWD1 A, Wavelength=272 nm (I:\\NEWFOL~1\\08111900.D)mAU -660-680-700-720-740图2-1 DST-1粗品高效液相色谱图 mAU 0246 6.97581012min VWD1 A, Wavelength=272 nm (I:\\NEWFOL~1\\08111902.D)-715-720-725-730-735图2-2 DST-1粗品高效液相色谱图 0246 7.994810min
2. 2目标化合物的结构鉴定及结果讨论：
羟基丹参酮IIa磺酸钠的结构鉴定：对DST-1粗品上硅胶柱分离得到的样品DST-1，进行氢谱共振检测，测定结果见图。
