实验诊断学总结（07本硕 1班）
载脂蛋白B APO-B 脂蛋白(a) Lp(a) 三、 血清脂质检测
包括: 胆固醇 (cholesterol, CHOL)
甘油三酯 （triglyceride, TG) 磷脂 （phospholipid) 游离脂肪酸（free fatty acid) 1．总胆固醇测定(CHOL) 一.组成
是所有细胞膜与亚细胞器膜的重要构成成分,70%为胆固醇酯、30%为游离胆固醇。 二.性质
在血液中以可溶性蛋白的形式存在,其中 3/4存在于LDL中,1/4存在于HDL中 三、总胆固醇测定
胆固醇酯 ＋ H2O 胆固醇酯水解酶 胆固醇 ＋ 游离脂肪酸胆固醇 ＋ O2 胆固醇氧化酶 Δ4-胆甾烯酮 ＋ H2O2 2H2O2 ＋ 4-氨基安替比林 ＋ 酚 过氧化物酶 醌亚胺 ＋ 4H2O 总胆固醇临床评价
1.影响：年龄、性别；饮食；遗传因素 2.是CHD的主要危险因素之一
3.作为CHD的预防、发病估计、疗效观察的参考指标
4.原发高CHOL:见于家族性高胆固醇血症、家族性apoB缺陷症、混合性高脂蛋白血症 继发高CHOL:见于肾病综合征、甲状腺机能减退、糖尿病、妊娠等 四、甘油三酯（TG） 一.组成
是甘油和三个脂肪酸所形成的酯，又称为中性脂肪。首要功能是为细胞提供能量。 二.性质
主要存在于β脂蛋白和乳糜颗粒中，直接参与CHOL和CE的合成。 三、甘油三酯测定
甘油三酯 + 3H2O 脂蛋白脂肪酶 甘油 ＋ 脂肪酸 甘油 ＋ ATP 甘油激酶＋Mg++ 3-磷酸甘油 ＋ ADP
3-磷酸甘油 ＋ O2 磷酸甘油氧化酶 磷酸二羟丙酮 ＋ H2O2 ＋ 4-氨基安替比林 ＋ 4-氯酚 甘油三酯的临床评价
1.受生活习惯、饮食和年龄影响，波动较大 2.是CHD危险因素之一
3.确定暴发性黄色瘤、脂血性视网膜炎和手掌黄瘤是否为富含TG的脂蛋白升高的结果 4.增高见于冠心病、原发性高脂血症、动脉粥样硬化症、肥胖症等 5.降低见于严重肝脏疾病、吸收不良等
6.随访测定，以检查降低血中TG的效果。确定药物剂量。 四. 血清脂蛋白检测
脂蛋白是血脂在血液中存在、转运及代谢的形式，不仅了解血脂的质与量，也能对其生理功能进行分析。
包括: 微粒 (chylomicron, CM) 低密度脂蛋白 ( low density lipoprotein, LDL) 高密度脂蛋白 (high density lipoprotein, HDL) α-脂蛋白 (α-lipoprotein, LP(a) ) 脂蛋白检测方法
1. 超速离心法 2.电泳法 3.沉淀分离法 4.遮蔽直接测定法:
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利用脂蛋白中某种特异抗体及某些化学物质先将其它脂蛋白包裹起来,使其不受测定胆固醇试剂的影响,而直接测定未包裹的脂蛋白胆固醇 1、乳糜微粒 （CM） 一.组成
CM是最大的脂蛋白,脂质含量高达98%,蛋白质含量少于2%。 二.功能
运输外源性TG。
在血液中代谢快，半衰期短，正常空腹12h后血清中不应有CM。 2、低密度脂蛋白（LDL-C）
一、组成：是富含CHOL的脂蛋白,21%的LDL为蛋白质(含apoB-100),79%为脂质 LDL 化学修饰 其中apoB-100变性 通过清 道夫受体 被吞噬细胞摄取 形成泡沫细胞停留在血 管壁内 导致CHOL沉积 促使动脉壁形成动脉粥 样硬化斑块
2．低密度脂蛋白临床评价
增高: 判断发生冠心病的危险； 是动脉粥样硬化的危险因子
与冠心病发病呈正相关 ； 遗传性高脂蛋白血症、肥胖症等 减低：甲亢、吸收不良、肝硬化等 3．高密度脂蛋白（HDL-C）
一、组成： 是血清中颗粒密度最大的一组脂蛋白,其蛋白质和脂质各占50% HDL 将肝脏以外组织中CHOL 转运到肝脏分解 代谢 FC转化为CE 阻止FC在动脉壁和其它组织 中积聚 防止动脉粥样硬化发生 二、高密度脂蛋白临床评价
增高: 对防止动脉粥样硬化； 预防冠心病的发生有重要作用； 与冠心病的发病呈负相关 被称为好―胆固醇‖
减低：动脉粥样硬化、急性感染、慢性肾功能衰竭等 脂蛋白（a) [Lp(a)]
不同于其它脂蛋白的一种独立的脂蛋白和LDL 一样携带大量的胆固醇结合于血管壁不仅促进 动脉粥样硬化形成，且障碍血管内凝块溶解,促进血栓形成。 是动脉粥样硬化和血栓形成的重要独立危险因子 4．Lp（a)临床评价
Lp（a)水平高低主要由遗传因素决定
可将Lp（a)含量作为动脉粥样硬化的单项预报因子或确定为是否存在冠心病的多项预报因子之一 增高：I型糖尿病、肾脏疾病、血透后 减低：肝脏疾病 五、.血清载脂蛋白检测
脂蛋白中的蛋白部分称为载脂蛋白 (apolipoprotein,apo) apo-可分为apoA、apoB、apoC、apoE和apo（a） 在脂蛋白代谢中具有重要的生理功能，可构成脂蛋
白并稳定其结构 包括：载脂蛋白A （apoA） 载脂蛋白B （apoB） 载脂蛋白的功能：输送和结合脂溶性化合物； 调节脂蛋白代谢；修饰并影响有关酶 对组织受体的识别；作为脂蛋白结构的主干 1．载脂蛋白A-I（apoA-I）
组成： 是HDL的主要结构蛋白,具有清除组织中的脂质和抗动脉粥样硬化的作用。
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apoA-I的意义最明确,在组织中浓度最高,可催化卵磷脂-胆固醇酰基转移酶,将组织内多余 的CE转运至肝脏处理。 apoA-I的临床评价：
增高：1.可直接反应HDL水平
2.预测和评价冠心病的危险性，但较HDL更精确，更能反应脂蛋白状态 3.是诊断冠心病的一种较灵敏指标 减低：家族性缺乏症、急性心肌梗死、慢肝 2．载脂蛋白B （apoB）
组成： 是LDL中含量最多的蛋白质，90%以上apoB存在于LDL中。具有调节肝脏内外细胞表面 LDL受体与血浆LDL之间平衡的作用，对肝 脏合成VLDL有调节作用。 作用成分是apoB-100,正常人空腹检测的apoB为apoB-100。 apoB的临床评价
增高:1.可直接反应LDL水平
2.其水平增高与动脉粥样硬化、冠心病的发生率呈正相关 3.预测冠心病的危险性方面优于LDL和CHOL 4.糖尿病、肾病综合症等 减低： apoB缺乏症、恶性肿瘤等 六、我国要求
1.血脂测定项目：采用血清，如用EDTA抗凝血浆，结果乘以1.03 2.受检者的准备及取血方法 (1)空腹12h后取前臂静脉血
(2)2w平时习惯，近期无急性病、外伤、手术 (3)24h内不饮酒、不作剧烈运动 (4)停药数天或数周 (5)坐位5min后抽血
(6)止血带不超过1min，缓缓流入 (7)间隔1w测2～3次取平均值 3.血标本的处理与储存
(1)尽快送检，静置30～45min后离心分离
(2)4℃3d，－20℃数周，－70℃长期 (3)不可反复冻融 第二节 急性冠状动脉综合征时心肌标志物的应用
心肌蛋白和心肌酶的变化对诊断早期无典型症状、心电图无明显改变的急性缺血性心脏病极为重要。同时对指导治疗、监测溶栓治疗、判断预后有重要作用。 心肌损伤生化标志物 高度敏感性和特异性； AMI后出现早且持续时间长；
检验周转时间（Turn Around Time,TAT）短。
一类是早期标志物（<6h）: ； 肌红蛋白（2h），CK-MB。
另一类是确定标志物（6～9h并持续数天）； 心肌肌钙蛋白(cTn) （4～12h），可持续 4～10天，是目前诊断AMI较好的确定标志物。 一、心肌蛋白
1肌钙蛋白：是肌肉收缩的调节蛋白，共有三种亚单位 肌红蛋白：是一种存在于骨胳肌和心肌中的低分子含氧结合蛋白 肌钙蛋白的三种亚单位
2、肌钙蛋白T: 原肌球蛋白结合亚单位 (Tropomyosin-binding subunit,TnT) 肌钙蛋白I: 抑制亚单位 (Troponin-inhibiting subunit,TnI)
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肌钙蛋白C: 唯一与钙结合的亚单位 (Calcium-binding subunit,TnC 3、cTnT与cTnI比较
在对AMI诊断方面，cTnI和cTnT无显著性差异，都能鉴别出CK-MB所不能检测出的心肌损伤；相对cTnT而言，cTnI显示出较低的初始灵敏性和较高的特异性；就上升的相对值来说，cTnT比cTnI高；在不稳定性心绞痛病人中cTnT上升的频度比cTnI高；在AMI后30天死亡率的预报方面，cTnT优于cTnI。 4、肌红蛋白(Mb)： 是一种存在于骨胳肌和心肌中的含氧结合蛋白,正常人血清中含量极少,当心肌或骨胳肌损伤时,血液中Mb水平升高。
由于Mb分子量小，心肌损伤后即可从受损的心肌细胞中释放，故在AMI发病后30min-2h即可升高，作为早期诊断AMI的指标。 二、 心 肌 酶
1． 心肌内含有多种酶,当心肌损伤时这些酶，可由损伤的心肌释放入血,使血内相应酶的活性增高。 可以了解有否心肌损伤及损伤的程度， 对心肌病变进行诊断 2、临床常用心肌酶及其同工酶 肌酸激酶及其同工酶 (CK同工酶 )
门冬氨酸氨基转移酶及其同工酶(AST同工酶) 乳酸脱氢酶及其同工酶(LDH同工酶 ) 同工酶的定义
1、同工酶是以多种分子形式存在于机体的酶 2、催化功能相同 3、分子结构不同 检测同工酶的目的
1、检测同工酶活力比单测定酶的总活力更具有脏器特异性和高灵敏性等优点，因而提 高了临床诊断价值
2、早期诊断某些疾病，阳性率高，特异性强。3、可以估计病情严重性和判断预后。 (一) CK同工酶的组成
CK是由M和B两种亚单位组成的二聚体 1. 在细胞质内共有三种同工酶： CK-MM 骨胳肌 CK-MB 心肌
CK-BB 脑、前列腺、肺、肠等
2. 在细胞线粒体内还有另二种同工酶： 巨CK2（uMtCK、sMtCK） 3. CK与免疫球蛋白结合的巨分子酶： 巨CK1
这几种同工酶的分子量虽然相同，但免疫特 性不同，电泳迁移率也不同 CK同工酶的临床意义： 1．急性心肌梗死
（1） CK总活性在急性心肌梗塞后的4小时便开始升高，至20-30小时达高峰，3-5天后下降至基础水平。此酶为诊断心肌梗死的一个极灵敏指标。
（2）CK-MB主要存在于心肌细胞内，急性心肌梗死后先于CK总活力1-2小时升高，12-20小时达峰值，如无并发症3天后回复至正常水平，如果胸痛病人患者在48小时内CK-MB尚在正常水平活力不足总CK的2%，即可排除急性心肌梗死的诊断 若已下降的CK-MB再度上升，提示可能有新的心肌梗死发生。 2．神经肌肉系统疾病
进行性肌营养不良、多发性肌炎等：
骨骼肌中富含CK，以CK-MM为主，故各型肌营养不良均可引起CK活力升高，发病年龄越早，予后也越差。 其中半数以上可检出 CK-MB，（CK-MB/CK＜5%)而心电图都无阳性发现，说明并非心肌受
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