D.胚胎分割
解析:哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获能和受精等几个主要步骤。胚胎分割是一种技术,不在受精过程的范围之内。 答案:D
18.利用胚胎干细胞治疗肝衰竭,实现此过程的最重要的手段是诱导( ) A.细胞分裂 B.细胞特化 C.细胞分化 D.细胞增殖
解析:利用胚胎干细胞治疗肝衰竭的原理是对胚胎干细胞移植,通过诱导使其定向分化为肝细胞,以替换坏死的肝细胞。 答案:C
19.下列关于胚胎工程的叙述,不正确的是( ) A.试管婴儿涉及体外受精和胚胎移植技术 B.可用桑椹胚或早期囊胚进行胚胎分割 C.胚胎移植前需用激素进行同期发情处理 D.早期胚胎培养时不需要加入动物血清
解析:早期胚胎培养类似动物细胞培养,培养液需要加入动物血清。 答案:D
20.2010年,英国“试管婴儿之父”罗伯特·爱德华兹获得了诺贝尔生理或医学奖。下面是试管婴儿的培育过程示意图。有关叙述,不正确的是( )
A.过程①中可通过注射促性腺激素增加排卵数量 B.过程②必须在获能液中完成
C.过程③的培养液中应该添加动物血清
D.过程④成功的条件之一是受体对供体胚胎没有排斥
解析:促性腺激素能促进雌性激素的形成,从而促进卵巢多排卵。精子和卵子在受精前必须让精子先获能,并培养出成熟的卵子后方可完成受精,可以在获能培养液中完成,也可以在专用受精溶液中完成。过程③可以看作是动物细胞培养的过程,因此,需要向培养液中加入动物的血清。经④过程把早期胚胎移植到母体中,让其在母体的子宫内发育成胎儿,该过程成功的条件之一是受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应。 答案:B
21.胚胎干细胞培养的基本过程如图所示,下列叙述正确的是( )
A.①过程的培养液与动物细胞培养的培养液成分的不同之处是不含有动物血清 B.②过程采用酶处理的方式将内细胞团细胞分散开 C.早期胚胎发育到囊胚时期与母体建立组织上的联系
D.早期胚胎继续发育会在外层形成滋养层细胞,最终这部分细胞发育为成体的一部分
解析:动物细胞培养所需的营养物质有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素,以及血清、血浆等天然成分。早期胚胎培养的培养液成分一般都比较复杂,除了一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及血清等。囊胚期的滋养层在以后发育过程中分化成胎儿的胎盘、胎膜后才与母体建立组织上的联系。
答案:B
22.老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的β-淀粉样蛋白体,它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降,某些基因的突变会导致β-淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是( ) A.胚胎移植技术 B.胚胎干细胞技术 C.单克隆抗体技术 D.基因治疗技术
解析:根据题意可知,治疗老年痴呆症的途径有:导入正常的基因(基因治疗技术);提供和修复受损伤的神经元(胚胎干细胞技术);降低β-淀粉样蛋白体的含量(单克隆抗体技术)。而胚胎移植是为了获得优良个体,不能用于治疗该病。 答案:A
23.下列有关干细胞的叙述,错误的是( ) A.自体干细胞移植通常不会引起免疫排斥反应 B.胚胎干细胞在体外培养能增殖也能被诱导分化 C.干细胞能特异性表达某些蛋白质,具有特定的功能
D.造血干细胞具有分化出多种血细胞的能力,可用于治疗白血病
解析:本题主要考查细胞的增殖、分化、凋亡及免疫等知识。自体干细胞不会被自身免疫系统识别为抗原,因此通常不会引起免疫排斥反应。胚胎干细胞全能性较高,在体外培养不但能增殖,更易被诱导分化。干细胞是可以进一步增殖分化的细胞,只有高度分化的细胞才具有特定的功能。造血干细胞具有分化出多种血细胞的能力,可用于治疗白血病。 答案:C
24.婴儿在出生后可保留其脐带血,在以后的生长发育过程中如果出现了某种难治疗的疾病,可以通过脐带血中的干细胞来为其治病。关于这个实例说法正确的是( ) A.用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病,需要激发细胞的所有全能性 B.用脐带血中的干细胞能够治疗这个孩子所有的疾病
C.如果要移植用他的干细胞培育出的器官,需要在培养液中添加分化诱导因子,促进干细胞分化
D.如果要移植用他的干细胞培育出的器官,应该长期给他使用免疫抑制药物
解析:用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病,不需要激发细胞的所有全能性;用脐带血中的干细胞能培育出人体的许多种细胞、组织或器官,但不是所有疾病都能治疗;用他的干细胞培育出的器官,需要用分化诱导因子让干细胞增殖和分化;用自身干细胞培育的器官,不会发生免疫排斥反应。 答案:C
25.下列关于“克隆羊”“试管羊”“转基因羊”的说法,合理的是( ) A.在培育过程中,都用到了早期胚胎培养技术、胚胎移植技术 B.它们的遗传物质都来自一个亲本 C.它们是通过相同的生殖方式获得的 D.繁殖目的都是定向改造生物的性状
解析:“克隆羊”“试管羊”“转基因羊”技术都用到了早期胚胎培养和胚胎移植技术。“克隆羊”的遗传物质主要来源于提供核的亲本,少量遗传物质来自于卵细胞中的细胞质,“试管羊”的遗传物质来自于父本和母本,“转基因羊”的遗传物质主要来自于受体细胞,目的基因来自于其他生物。只有“试管羊”是通过有性生殖获得的。“克隆羊”的繁殖方式是无性繁殖,其目的是快速繁殖具有优良性状的个体或濒危物种。“试管羊”利用体外
受精技术,充分发挥优良雌性个体的繁殖潜能。“转基因羊”是为了定向改造生物的性状。 答案:A
二、非选择题(共50分)
26.(10分)Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图所示。
(1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的 。
(2)步骤②中,重组胚胎培养到 期时,可从其内细胞团分离出ES细胞。
(3)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的 设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切
获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有 酶的酶切位点。
(4)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 ,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。 答案:(1)细胞核
(2)囊胚
(3)核苷酸序列 HindⅢ和PstⅠ (4)蛋白质
27.(8分)人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:
(1)htPA基因与载体用 切割后,通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用 技术。
(2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其 。采集的精子需要经过 ,才具备受精能力。
(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是 。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行 。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的 。
(4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到 ,说明目的基因成功表达。 答案:(1)同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶) DNA分子杂交(或核酸探针)
(2)超数排卵 获能(处理)
(3)显微注射法 性别鉴定 全能性 (4)htPA(或人组织纤溶酶原激活物)
28.(8分)毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
(1)过程①中最常用的运载工具是 ,所需要的酶是限制酶和 。
(2)在过程②中,用 处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中,将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中,CO2的作用是 。 (3)在过程③中,用 处理以获取更多的卵(母)细胞。成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行 处理。
(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是 。在胚胎移植前,通过 技术可获得较多胚胎。 答案:(1)质粒 DNA连接酶
(2)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) 维持培养基(液)的pH (3)促性腺激素(或促滤泡素、孕马血清) 去核 (4)(早期)胚胎培养 胚胎分割
29.(24分)长期以来,优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈,近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。下图1、2、3分别是牛胚胎移植、早期胚胎培养及克隆羊培育图,请据图完成下列问题。
图1
图2
图3
(1)在试管牛和克隆羊的培育过程中都必须用到的生物技术有 、 (至少写出两项)。
(2)和受精有关的过程有:①第一次卵裂开始;②释放第二极体;③顶体反应;④穿越透明带;⑤雌、雄原核的形成;⑥核膜消失,雌、雄原核融合。 其正确的顺序为 (填序号)。
(3)超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射 ;冲卵实质上是用特定装置,将供体母牛子宫内的 冲洗出来。
(4)从A到E中,适宜于牛的胚胎移植时期有 ;图中标号3为 ,它将来可发育为胎膜和胎盘。
(5)动物的早期胚胎移植到同种且 与供体相同的动物体内,使之继续发育为新个体的技术叫作胚胎移植。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时,发现活胚胎细胞不能被染色,其原因是活细胞膜 。
(6)试管牛E的性别为 ,克隆羊“多利”的性状和 最接近,原因是 。
解析:在试管牛和克隆羊的培育过程中都必须用到的生物技术是动物细胞培养、胚胎移植、卵母细胞的采集技术。特别是动物细胞培养,是细胞工程非常基础的技术。与受精有关的过程比较复杂,根据课本上的知识和题意可以确定为③④②⑤⑥①。促性腺激素在胚胎移植中有非常重要的作用,包括超数排卵和同期发情处理。从A到E中,分别是二细胞胚胎、四细胞胚胎、八细胞胚胎、桑椹胚和囊胚,适宜于牛的胚胎移植时期有桑椹胚和囊胚。动物的早期胚胎移植到同种且生理状态与供体相同的动物体内,使之继续发育为新个体的技术叫作胚胎移植。生理状态相同更有利于胚胎的存活。克隆是无性繁殖,所以其子代的性状取决于供核个体的性状。
答案:(1)动物细胞培养、胚胎移植、卵母细胞的采集技术(任选两项)
(2)③④②⑤⑥①
(3)促性腺激素 (早期)胚胎 (4)DE 滋养层细胞
(5)生理状态 对物质的吸收具有选择透过性
(6)不确定 白面绵羊 “多利”的细胞核由白面绵羊提供,遗传物质主要存在于细胞核中

