实验一 戊巴比妥钠半数有效量（ED50）和半数致死量（LD50）的测定
【实验目的】
1.用小白鼠求戊巴比妥钠的ED50
2.实验示例戊巴比妥钠的LD50以供参考。 3.求其治疗指数。
【实验原理】
1.戊巴比妥钠为镇静睡眠药，随着剂量的加大，相继出现镇静、催眠、抗惊厥、麻醉、死亡。
2.药物效应与药物剂量的关系称量效关系，从不同角度观察，有量反应与质反应之分。量反应：特定反应程度与剂量的关系，如血压的升高、血糖的降低等。质反应：特定出现与否与剂量的关系，如死亡与否、阳性或阴性等。
3.质反应实验中，以对数剂量为横坐标，反应百分率为纵坐标绘图，形成一条对称的“S”形曲线。半数有效量（ED50）：50%的实验对象有效时对应的剂量。半数致死量（LD50）：50%的实验对象死亡时对应的剂量。
4.测定ED50的方法很多，但仍以改良的寇氏法计算简便，结果较准确，比较常用。
一、戊巴比妥钠半数有效量（ED50）的测定
【材料与方法】
一、实验动物：小白鼠，雌雄各半，18～22g。
二、器材与药品：鼠笼×2个、天平×1个、注射器1ml（或0.25ml）×1支、注射针头51/2×1个、0.5%苦味酸（一支棉签）、戊巴比妥钠溶液（浓度为0.49%，0.39%，0.31%，0.25%，0.20%）。
三、方法与步骤：
1.取小鼠10只，分为5组，每组2只，称重。每组分别给与腹腔注射不同剂量戊巴比妥钠49、39、31、25、20 mg/kg，以翻正反射消失作为入睡指标，给药15分钟后，记录各组出现催眠反应的鼠数。
2.汇总整个实验室各浓度组催眠反应的鼠数后记入下表，采用公式ED50=1og-1[Xm-i(Σp-0.5)] （其中Xm=最大剂量对数值，P=动物催眠率（用小数表示），Σp=各组死亡率的总和，i=相邻两组剂量比值的对数（高剂量做分子））计算或机率单位—对数剂量作图法求得出现催眠反应的ED50记入下表。
不同剂量戊巴比妥钠对小鼠的影响
组别
1
剂量D(mg/kg)
49
1ogD 1.6900
实验
鼠数
催眠 鼠数
催眠反应 百分率%
P
ED50(mg/kg)
2 3 4 5
39 31 25 20
1.5911 1.4911 1.3979 1.3010
二、戊巴比妥钠半数致死量（LD50）的测定（实验示例，供同学参考）
【材料与方法】
一、实验动物：小白鼠，雌雄各半，18～22g。
二、器材与药品：鼠笼×2个、天平×1个、注射器1ml（或0.25ml）×1支、注射针头51/2×1个、0.5%苦味酸（一支棉签）、戊巴比妥钠溶液（浓度为1.875%，1.50%，1.20%，0.96%，0.72%）。 三、方法与步骤：
1.取小鼠50只，分为5组，每组10只，称重。每组分别给与腹腔注射不同剂量戊巴比妥钠187.5、150、120、96、720 mg/kg，给药后24小时，记录各组死亡鼠数。
2.各浓度组死亡鼠数后记入下表，采用公式ED50=1og-1[Xm-i(Σp-0.5)]计算或机率单位—对数剂量作图法求得戊巴比妥钠LD50记入下表。
结果：
LD50=㏒-1[Xm-i(ΣP-0.5)]计算或机率单位—对数剂量作图法求得LD50=120mg/kg。
不同剂量戊巴比妥钠对小鼠的影响
组别 1 2 3 4 5
剂量D (mg/kg) 187.5 150.0 120.0 96.0 72.0
1ogD 2.273 2.176 2.079 1.982 1.857
实验死亡鼠数
鼠数 10 10 10 10 10 10
7 6 2 0
死亡反应百分率（%） 100
70 60 20 0
P 1.0 0.7 0.6 0.2 0
120 LD50(mg/kg)
附计算过程：
按公式LD50=1og-1[Xm-i（Σp-0.5）]计算，求LD50。 其中Xm=最大剂量对数值 P=动物死亡率（用小数表示） Σp=各组死亡率的总和
i=相邻两组剂量比值的对数（高剂量做分子） 将实验结果代入上述公式 Xm=1og187.5=2.273 Σp=1.0+0.7+0.6+0.2+0=2.5
i=1og =1og1.25=0.0969
187.5-1.0150LD50=1og[Xm-i(Σp-0.5)]
=1og-1[2.273-0.0969(2.5-0.5)] =1og-1[2.273-0.1938]= 1og-12.0792 =120.0(mg/kg)
三、戊巴比妥钠治疗指数的测定
由以上实验所测得戊巴比妥钠的LD50和ED50，求得治疗指数。 治疗指数=
【注意事项】
LD50ED501.分组时采用均衡随机法。
2.实验室保持安静，实验操作的过程中尽量避免喧哗，以致影响催眠的效果，已睡眠鼠与未睡眠鼠分笼放置。
3.翻正反射消失出现一次就作为入睡的小鼠记录。
【思考题】
1.药物剂量对药物作用有什么影响?
2.简述药物的半数有效量、半数致死量、药物治疗指数及其测定意义
实验二 药物血浆浓度的测定及半衰期、表观分布容积等参数的计算
【实验目的】
1.以磺胺嘧啶钠为例学习测定药物半衰期（t1/2）和表观分布容积（Vd）等药动学参数的基本方法。
2.理解常用药动学参数的临床意义。
【实验原理】
磺胺类药物为对氨基苯磺酰胺类化合物，在酸性溶液中，可与亚硝酸钠起重氮反应，产生重氮盐。在碱性溶液中，重氮盐可与酚类化合物（麝香草酚）起偶氮反应，形成橙红色的偶氮化合物。可在525nm波长下进行比色测定。根据Beer-Lamber定律，浓度与光密度成正比关系。其化学反应式如下：
【材料与方法】
一、实验动物：家兔1只。
二、器材与药品：试管24只，移液吸管10ml，1只；1ml，2只；2ml 7只；移液器1支，吸头若干，试管夹，试管架，离心机，722型分光光度计，手术剪，眼科剪，止血钳，动脉夹，眼科镊，缝线，药棉，纱布，捆扎绳，注射器10ml 1支，5ml 1支。5%磺胺嘧啶钠溶液，7.5%三氯醋酸溶液，0.5%亚硝酸钠溶液，0.5% 麝香草酚溶液（溶于20％氢氧化钠内），草酸钾结晶，20%氨基甲酸乙酯溶液，肝素注射液。 三、方法与步骤
1.取试管5只，依次用A1、A2、A3……A6标记，各加入7.5%三氯醋酸2ml备用。 2.取试管5只，依次用B1，B2，B3……B6标记，各加入草酸钾结晶几粒。
3.取家兔，称重，以20%氨基甲酸乙酯溶液1g/kg耳缘静脉注射麻醉，麻醉后将兔背位固定于手术台上，正中切开颈部皮肤，分离一侧颈总动脉，结扎其远心端，并在近心端夹上动脉夹，以阻断血流，再将放血导管向心脏方向插入颈总动脉内，用线打活结固定。并于耳缘静脉注射肝素（1000U/kg）抗凝。
4.松开动脉夹，放血约1ml，置于B1管，迅速摇匀抗凝，然后耳缘静脉注入5%磺胺嘧啶钠150mg/kg（3ml/kg），记录注完时间（准确到分钟）。
5.给药后5min、10min、20min、30min及40min，用同样方法放血约1ml，分别置于
